Влияние женских половых гормонов на функционирование белка-транспортера гликопротеина-Р

Аннотация:

Гликопротеин-Р (Pgp, АВСВ1 -белок) — белок-транспортер, локализующийся в мембране гепатоцитов, энтероцитов тонкого и толстого кишечника, эпителиоцитов почечных канальцев, эндотелиальных клеток гистогематических барьеров, опухолевых клеток. Цель исследования: изучить в эксперименте влияние физиологических концентраций эстрадиола и прогестерона на функциональную активность Pgp на уровне целостного организма. Материал и методы. Работа выполнена на 17 половозрелых кроликах-самках породы шиншилла. 1-й группе кроликов была проведена «ложная операция» (п=5); 2-й группе (п=6) выполняли овариэктомию; 3-й группе (п=6) проводили овариэктомию и в течение 14 дней, начиная с 14-х послеоперационных суток, вводили эстрадиол (по 0,5 мг), а затем комбинацию эстрадиола (0,5 мг) и прогестерона (5 мг) в течение 14 сут. За 7 дней до начала исследования, на 14, 28 и 42-е сутки после операции у кроликов всех групп методом ВЭЖХ определяли функциональную активность Pgp по фармакокинетике его маркерного субстрата фексофенадина. Накопление фексофенадина в организме свидетельствует об ингибировании Pgp, а снижение его содержания — об индукции Pgp. Результаты. Овариэктомия приводила к снижению функциональной активности Pgp. Введение эстрадиола в течение 14 сут после овариэктомии существенно не влияло на функциональную активность белка-транспортера. Введение комбинации эстрадиола и прогестерона в течение 14 дней привело к повышению активности Pgp относительно показателя у овариэктомированных животных и исходного уровня. Заключение. Влияние физиологических концентраций эстрадиола и прогестерона на функционирование белка-транспортера свидетельствует о том, что эффективность фармакотерапии субстратами Pgp может зависеть от фазы менструального цикла, а для повышения эффективности соответствующей фармакотерапии возможна корректировка доз лекарственных средств. Ключевые слова: гликопротеин-Р, АВСВ1 -белок, функциональная активность, фексофеналин, ВЭЖХ, прогестерон, эстрадиол. Гликопротеин-Р (Pgp, АВСВ1-белок) — АТФ-зависимый белок-транспортер, локализующийся в цитоплазматической мембране гепатоцитов, энтероцитов тонкого и толстого кишечника, эпителиоцитов почечных канальцев, эндотелиальных клеток гистогематических барьеров, а также опухолевых клеток. Во всех них он выполняет одну и ту же функцию: выводит ксено- и эндобиотики во внеклеточное пространство, биологические жидкости (кровь, желчь или мочу) и просвет кишечника. Таким образом, Pgp играет важную роль в фармакокинетике (всасывание, распределение и выведение) лекарственных средств — его субстратов, транспорте эндогенных веществ (например, стероидных и тиреоидных гормонов) и формировании резистентности опухолевых клеток к химиотерапии. Функциональная активность Pgp меняется под влиянием различных факторов. Ряд веществ — индукторы (рифампицин, глюкокортикостероиды, тироксин) повышают активность этого белка-транспортера, что может снижать эффективность терапии субстратами Pgp (дигоксин, дабигатрана этексилат, статины и др.), тогда как ингибиторы (верапамил, амиодарон, кетоконазол) снижают активность Pgp, что может приводить к относительной передозировке его субстратов. Способность лекарственных средств ингибировать функциональную активность Pgp можно использовать в терапии онкологических заболеваний с целью преодоления множественной лекарственной устойчивости, обусловленной повышенной активностью данного белка-транспортера. В исследованиях in vitro на различных клеточных линиях были получены противоречивые результаты относительно влияния женских половых гормонов на функциональную активность и экспрессию Pgp. Так, на клетках линии LSI80 (клетки рака толстой кишки человека) было показано, что эстрогены и прогестерон в концентрации 50 мкМ повышают экспрессию мРНК гена MDR1, кодирующего белок-транспортер. В то же время на клетках рака молочной железы, трансдуцированных геном MDR1, эстрадиол в концентрациях 10 пМ — 10 нМ снижал уровень Pgp. На линиях клеток L-MDR1 и P388/dx было показано, что прогестерон ингибирует активность белка-транспортера в концентрации 13,3±3,2 и 30,2±9,8 мкМ соответственно. Прогестерон в концентрации 50 мкМ также снижал функциональную активность Pgp на клеточной линии, резистентной к винбластину, о чем свидетельствовало повышение накопления в клетках винбластина (субстрата Pgp) в 4—5 раз. Следует отметить, что in vitro использовались концентрации гормонов, существенно превышающие их сывороточные уровни в организме человека и животных (3х10 в -9 степени М). Кроме того, не изучалось совместное действие эстрадиола и прогестерона. В женском организме на протяжении менструального цикла концентрации половых гормонов постоянно меняются. Это позволяет предположить изменение функционирования Pgp в различные фазы цикла, что может повлиять на фармакокинетику лекарственных средств — субстратов белка-транспортера. Такое предположение косвенно подтверждается противоречивостью данных о половых различиях в фармакокинетике субстратов Pgp (верапамила, циклоспорина и др.), что может быть связано с разными фазами цикла у включенных в исследование женщин. Цель исследования — изучить в эксперименте влияние физиологических концентраций эстрадиола и прогестерона на функциональную активность Pgp на уровне целостного организма. Материал и методы: Дизайн исследования Проведено экспериментальное проспективное контролируемое исследование с участием лабораторных животных. Критерии соответствия: Работа выполнена на 17 половозрелых кроликах-самках породы шиншилла массой 3000—3500 г. Все животные на момент включения в исследование достигли половой зрелости и находились в состоянии течки (полиэструс). Условия проведения: Животные были получены из питомника ОАО «Касимов—Миакро», имели необходимые ветеринарные свидетельства и содержались в стандартных условиях вивария ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России. Работа с животными проводилась в соответствии с правилами лабораторной практики (приказ МЗ РФ №199н от 01.04.16). Продолжительность исследования: Исследование проведено в 2017 г., продолжительность исследования для каждого животного составила 47 сут. Анализ в подгруппах и описание медицинского вмешательства: Животные были разделены на три группы. 1-й (контрольной) группе кроликов (n=5) была проведена «ложная операция», заключающаяся во вскрытии кожных покровов и подкожной жировой клетчатки передней брюшной стенки с последующим послойным ушиванием раны. 2-й группе животных (п=6) выполняли овариэктомию. 3-й группе кроликов (n=6) проводили овариэктомию и с 14-х послеоперационных суток в течение 14 дней вводили эстрадиол по 0,5 мг/кролик, а затем комбинацию эстрадиола (0,5 мг/кролик) и прогестерона (5 мг/ кролик) также в течение 14 сут. Эстрадиол (прогинова, «Вауег», Германия) и прогестерон (утрожестан, «Besins Healthcare», Бельгия) вводили кроликам peros 1 раз в день. Подобная схема эксперимента имитирует менструальный цикл, когда во время менструации концентрация эстрогенов и прогестерона в крови снижается, в фолликулярную фазу концентрация эстрогенов возрастает, а в лютеиновую фазу увеличивается содержание как эстрогенов, так и прогестерона в крови. Овариэктомию и «ложную операцию» выполняли в условиях операционной вивария РязГМУ под наркозом, который осуществляли в/м введением ксилазина гидрохлорида (рометар, СПОФА, Чехия) в дозе 4,0—6,0 мг/кг массы и золетила-50 («Virbac», Франция) в дозе 5—10 мг/кг массы. Основной исход исследования: За 7 дней до начала исследования, а также на 14, 28 и 42-е сутки после оперативного вмешательства у животных всех групп определяли функциональную активность Pgp (по фармакокинетике маркерного субстрата). Дополнительные исходы исследования: Дополнительно у животных в указанные сроки определяли сывороточную концентрацию половых гормонов (тестостерона, эстрадиола, прогестерона). Методы регистрации исходов: Функциональную активность Pgp оценивали по фармакокинетике фексофенадина (аллегра, «Sanofy Aventis», Франция) после его однократного перорального введения (67,5 мг/кг массы, в объеме 5 мл) в виде водной суспензии. Фексофенадин не подвергается биотрансформации и его фармакокинетика зависит преимущественно от активности данного белка-транспортера. Накопление фексофенадина в организме свидетельствует об ингибировании Pgp, а снижение содержания — об индукции PgP. Для определения концентрации фексофенадина кровь в объеме 5 мл забирали из краевой вены уха кролика в гепаринизированные пробирки через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 и 24 ч после введения препарата. Образцы крови центрифугировали (1000 g, 10 мин), полученную плазму хранили до анализа при —29°С в течение месяца. Концентрацию фексофенадина в плазме определяли на высокоэффективном жидкостном хроматографе Стайер с УФ-спектрофотометрическим детектором UW 104 при длине волны 220 нм с применением обращенно-фазовой хроматографической колонки Ultrasphere 4,6x250 мм (зернение 5 мкм) фирмы «Beckman Coulter». Фексофенадин экстрагировали из плазмы с помощью дихлорметана (ACROS ORGANICS), этилацетата (ACROS ORGANICS) и диэтилового эфира (ХИМ-МЕД). Элюирование выполняли подвижной фазой следующего состава (на 200 мл): 64 мл ацетонитрила, 133,7 мл бидистиллированной воды, содержащей 2,33 мл ледяной уксусной кислоты (ХИММЕД) и 0,936 мл триэтиламина (ACROS ORGANICS). Триэтиламином доводили рН подвижной фазы до 5,0. Время удерживания пика фексофенадина составило 12,6 мин. С использованием модельнонезависимого метода рассчитывали следующие фармакокинетические параметры фексофенадина: Сmах — максимальная концентрация (нг/мл), AUC0-1 — площадь под фармакокинетической кривой концентрация — время от нуля до времени последнего забора крови (нг x ч/мл); Сl — общий клиренс (л/ч). Концентрацию половых гормонов определяли в ЦНИЛ РязГМУ радиоиммунным методом с применением стандартной тест-системы производства IMMUNOTECH (Чехия) с дальнейшей обработкой полученных результатов на анализаторе Иммунотест (Россия). Этическая экспертиза: Протокол исследования был рассмотрен и утвержден на заседании локального этического комитета ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России №12 от 08.04.16. Статистический анализ: Принципы расчета размера выборки: количество животных, использованных в исследовании, обусловлено их числом, минимально необходимым для экспериментальных фармакокинетических исследований. Методы статистического анализа данных. Полученные результаты обрабатывали с помощью программы StatSoft Statistica 7.0 (США). Достоверность различий между показателями гормонального статуса животных оценивали с помощью критерия Фридмана. При наличии статистической значимости парные сравнения выполняли по критерию Вилкоксона. Полученные результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей. Статистическую значимость различий между фармакокинетическими параметрами фексофенадина оценивали, исходя из представления о лог-нормальном распределении данных. Сравнение изучаемых фармакокинетических параметров проводили с помощью дисперсионного анализа (ANOVA) после их логарифмирования. Различия с исходными показателями внутри групп и межгрупповые сравнения выполняли по критерию множественного сравнения Фишера. Полученные результаты представлены в таблицах в виде среднего геометрического и его 95% доверительного интервала (ДИ). Различия считали статистически значимыми при р<0,05. Зависимость между показателями гормонального фона животных 2-й и 3-й групп от фармакокинетических параметров фексофенадина оценивали с помощью коэффициента корреляции Пирсона (Rs). Дополнительно рассчитывали двусторонний 90% ДИ отношения средних геометрических фармакокинетических параметров фексофенадина на фоне воздействия к параметрам интактных животных (внутри групп), а также 90% ДИ отношения средних геометрических фармакокинетических параметров фексофенадина на фоне воздействия (кролики 3-й группы) к параметрам животных, после овариэктомии (кролики 2-й группы). Согласно U.S. Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluationand Research, значимыми считаются различия между фармакокинетическими параметрами, если двусторонний 90% ДИ их отношения находится за пределами диапазона 0,8—1,25 (80—125%), поскольку изменение фармакокинетических параметров только Основной исход исследования: За 7 дней до начала исследования, а также на 14, 28 и 42-е сутки после оперативного вмешательства у животных всех групп определяли функциональную активность Pgp (по фармакокинетике маркерного субстрата). Дополнительные исходы исследования: Дополнительно у животных в указанные сроки определяли сывороточную концентрацию половых гормонов (тестостерона, эстрадиола, прогестерона). Методы регистрации исходов: Функциональную активность Pgp оценивали по фармакокинетике фексофенадина (аллегра, «Sanofy Aventis», Франция) после его однократного перорального введения (67,5 мг/кг массы, в объеме 5 мл) в виде водной суспензии. Фексофенадин не подвергается биотрансформации и его фармакокинетика зависит преимущественно от активности данного белка-транспортера. Накопление фексофенадина в организме свидетельствует об ингибировании Pgp, а снижение содержания — об индукции PgP. Для определения концентрации фексофенадина кровь в объеме 5 мл забирали из краевой вены уха кролика в гепаринизированные пробирки через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 и 24 ч после введения препарата. Образцы крови центрифугировали (1000 g, 10 мин), полученную плазму хранили до анализа при —29°С в течение месяца. Концентрацию фексофенадина в плазме определяли на высокоэффективном жидкостном хроматографе Стайер с УФ-спектрофотометрическим детектором UW 104 при длине волны 220 нм с применением обращенно-фазовой хроматографической колонки Ultrasphere 4,6x250 мм (зернение 5 мкм) фирмы «Beckman Coulter». Фексофенадин экстрагировали из плазмы с помощью дихлорметана (ACROS ORGANICS), этилацетата (ACROS ORGANICS) и диэтилового эфира (ХИМ-МЕД). Элюирование выполняли подвижной фазой следующего состава (на 200 мл): 64 мл ацетонитрила, 133,7 мл бидистиллированной воды, содержащей 2,33 мл ледяной уксусной кислоты (ХИММЕД) и 0,936 мл триэтиламина (ACROS ORGANICS). Триэтиламином доводили рН подвижной фазы до 5,0. Время удерживания пика фексофенадина составило 12,6 мин. С использованием модельнонезависимого метода рассчитывали следующие фармакокинетические параметры фексофенадина: Сmах — максимальная концентрация (нг/мл), AUC0-1 — площадь под фармакокинетической кривой концентрация — время от нуля до времени последнего забора крови (нг x ч/мл); Сl — общий клиренс (л/ч). Концентрацию половых гормонов определяли в ЦНИЛ РязГМУ радиоиммунным методом с применением стандартной тест-системы производства IMMUNOTECH (Чехия) с дальнейшей обработкой полученных результатов на анализаторе Иммунотест (Россия). Этическая экспертиза: Протокол исследования был рассмотрен и утвержден на заседании локального этического комитета ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России №12 от 08.04.16. Статистический анализ: Принципы расчета размера выборки: количество животных, использованных в исследовании, обусловлено их числом, минимально необходимым для экспериментальных фармакокинетических исследований. Методы статистического анализа данных. Полученные результаты обрабатывали с помощью программы StatSoft Statistica 7.0 (США). Достоверность различий между показателями гормонального статуса животных оценивали с помощью критерия Фридмана. При наличии статистической значимости парные сравнения выполняли по критерию Вилкоксона. Полученные результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей. Статистическую значимость различий между фармакокинетическими параметрами фексофенадина оценивали, исходя из представления о лог-нормальном распределении данных. Сравнение изучаемых фармакокинетических параметров проводили с помощью дисперсионного анализа (ANOVA) после их логарифмирования. Различия с исходными показателями внутри групп и межгрупповые сравнения выполняли по критерию множественного сравнения Фишера. Полученные результаты представлены в таблицах в виде среднего геометрического и его 95% доверительного интервала (ДИ). Различия считали статистически значимыми при р<0,05. Зависимость между показателями гормонального фона животных 2-й и 3-й групп от фармакокинетических параметров фексофенадина оценивали с помощью коэффициента корреляции Пирсона (Rs). Дополнительно рассчитывали двусторонний 90% ДИ отношения средних геометрических фармакокинетических параметров фексофенадина на фоне воздействия к параметрам интактных животных (внутри групп), а также 90% ДИ отношения средних геометрических фармакокинетических параметров фексофенадина на фоне воздействия (кролики 3-й группы) к параметрам животных, после овариэктомии (кролики 2-й группы). Согласно U.S. Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluationand Research, значимыми считаются различия между фармакокинетическими параметрами, если двусторонний 90% ДИ их отношения находится за пределами диапазона 0,8—1,25 (80—125%), поскольку изменение фармакокинетических параметров только более чем на 25% может привести к изменению фармакодинамики препаратов. Результаты Объекты (участники) исследования Все животные завершили исследование и вошли в итоговый анализ. Основные результаты исследования Концентрации половых гормонов (тестостерон, прогестерон и эстрадиол) в сыворотке у животных различных групп до начала эксперимента не различались. При выполнении «ложной» операции гормональный статус кроликов существенно не изменялся на протяжении всего эксперимента. У животных 2-й группы (изолированная овариэктомия) по сравнению с исходными показателями отмечалось значимое снижение (на 29,7%; p=0,028) уровня эстрадиола на 42-е сутки после операции (рис. 1), а также уменьшение концентрации прогестерона на 30,9% (р=0,028) на 14-е сутки эксперимента, на 54,9% (p=0,028) на 28-е сутки и на 48,7% (p=0,028) на 42-е сутки (рис. 2). У кроликов 3-й группы (введение эстрадиола и прогестерона на фоне овариэктомии) концентрация эстрадиола на протяжении всего эксперимента статистически значимо не отличалась от исходных показателей (до овариэктомии) и превышала значения кроликов 2-й группы (изолированная овариэктомия) на 42-е сутки эксперимента на 62,3% (p=0,004) (см. рис. 2). Уровень прогестерона снижался на 14-е сутки исследования на 46,9% (р=0,028), на 28-е сутки — на 88,1% (p=0,028), а на 42-е сутки повышался на 168,5% (p=0,046). В этот срок концентрация прогестерона у животных 3-й группы превышала показатели животных 2-й группы на 500,0% (/7=0,002). Концентрация тестостерона у животных всех исследуемых групп на протяжении всего эксперимента значимо не менялась. Функциональную активность Pgp оценивали по фармакокинетике его маркерного субстрата — фексофенадина. Фексофенадин не подвергается биотрансформации, и его фармакокинетика зависит от данного белка-транспортера. Накопление фексофенадина в организме кроликов (повышение Cmax и AUC0-1) и снижение его выведения (уменьшение С1) свидетельствуют о снижении функциональной активности Pgp в организме, а противоположные изменения показателей — о возрастании активности Pgp. Фармакокинетические параметры фексофенадина у животных разных групп до начала эксперимента не различались (см. таблицу). В группе ложнооперированных животных фармакокинетические параметры фексофенадина значимо не отличались от исходных показателей на протяжении всего эксперимента, что свидетельствует об отсутствии изменения активности Pgp в организме. У животных второй группы (изолированная овариэктомия) на 14-е послеоперационные сутки Стах фексофенадина возрастала в 1,61 раза (90% ДИ 1,09-2,38; p=0,039), AUC0-1 - в 1,56 раза (90% ДИ 1,08-2,24; p=0,05), а С1 снижался в 0,325 раза (90% ДИ 0,12—0,95; p=0,036) по сравнению с исходными показателями. На 28-е сутки отмечалось снижение С1 в 0,52 раза (90% ДИ 0,31-0,87; p=0,07) по сравнению с параметрами до операции. На 42-е сутки отмечалось увеличение Стах фексофенадина в 2,43 раза (90% ДИ 1,87-3,15;p=0,0008), AUC0-1 - в 2,24 раза (90% ДИ 1,53-3,28; p=0,0017) и снижение С1 в 0,37 раза (90% ДИ 0,17—0,82; p=0,06) (см. таблицу) по сравнению с исходными значениями. Полученные данные свидетельствуют о накоплении фексофенадина в организме кроликов и замедлении его выведения, что отражает снижение функциональной активности Pgp. Максимальные и клинически значимые различия (90% ДИ отношения средних геометрических фармакокинетических параметров фексофенадина у животных, подвергнутых овариэктомии, к параметрам интактных животных, находящиеся вне диапазона 0,8—1,25) были зарегистрированы на 42-е сутки после операции. У животных 3-й группы (введение эстрадиола и прогестерона на фоне овариэктомии) на 14-е сутки после овариэктомии С1 фексофенадина снижался в 0,62 раза (90% ДИ 0,45—0,86; p=0,024) по сравнению с исходными значениями. На 28-е сутки (14-е сутки после начала введения эстрадиола) AUC0-1 фексофенадина увеличивалась в 1,4 раза (90% ДИ 1,16-1,7; р=0,038), а С1 снижался в 0,5 раза (90% ДИ 0,4—0,64; p=0,042). На 42-е сутки эксперимента (14-е сутки после начала введения эстрадиола и 14-е сутки после начала введения комбинации эстрадиола и прогестерона) отмечалось снижение Сmах в 0,73 раза (90% ДИ 0,56-0,96; р=0,041) и AUC0-1 в 0,618 раза (90% ДИ 0,46-0,83; p=0,044). Обнаруженные изменения фармакокинетики фексофенадина свидетельствуют о его накоплении и замедлении выведения в течение 28 сут исследования, т.е. об ингибировании Pgp. Снижение содержания фексофенадина в организме кроликов при введении комбинации эстрадиола и прогестерона на протяжении 14 сут по сравнению с исходными показателями отражает индукцию белка-транспортера. При сравнении фармакокинетических показателей фексофенадина у животных 2-й и 3-й групп в течение 28 сут исследования значимых различий выявлено не было. На 42-е сутки Стахфексофенадина у животных 3-й группы была ниже, чем у кроликов 2-й группы в 0,385 раза (90% ДИ 0,23-0,64; p=0,031), AUC0-1 - ниже в 0,30 раза (90% ДИ 0,19— 0,49; р=0,016), а С1 — выше в 3,19 раза (90% ДИ 1,49-6,81;p=0,009). Дополнительные результаты исследования При корреляционном анализе во 2-й группе была выявлена прямая связь между концентрацией прогестерона и общим клиренсом фексофенадина (Rs=0,536; р=0,007), а концентрация эстрадиола не обнаруживала связи ни с одним из изученных фармакокинетических параметров. В 3-й группе обнаружена обратная зависимость между концентрацией прогестерона и Сгаах (Rs= -0,435;p=0,034 и AUC0-1, (Rs=-0,497; р=0,014) фексофенадина и между концентрацией эстрадиола и Стах фексофенадина (Rs= —0,388; p=0,061). Зависимость между концентрацией прогестерона и С1 фексофенадина (Rs=0,733; p=0,00024) оказалась прямой. Нежелательные явления В ходе выполнения исследования не было зафиксировано ни одного летального исхода. Обсуждение. Резюме основного результата исследования: Начиная с 14-х суток после овариэктомии функциональная активность Pgp на уровне целостного организма снижается и достигает минимума на 42-е сутки после операции. Учитывая отсутствие значимых изменений концентрации эстрадиола в первые 28 сут, уменьшение активности белка-транспортера в эти сроки скорее всего связано со снижением уровня прогестерона, что подтверждается корреляцией между концентрацией прогестерона и общим клиренсом фексофенадина. Наибольшее снижение активности Pgp наблюдалось на 42-е сутки исследования, когда снижался уровень и эстрадиола, и прогестерона. Введение 0,5 мг эстрадиола в течение 14 сут после овариэктомии существенно не влияло на функциональную активность Pgp; она оставалась ниже исходной и статистически не отличалась от таковой у животных 2-й группы. Введение комбинации эстрадиола и прогестерона в течение 14 дней повышало активность Pgp по сравнению не только с показателями 2-й группы, но и с исходными показателями. На наш взгляд, это обусловлено тем, что при введении комбинации гормонов происходят нормализация уровня эстрадиола (она значимо не отличается от нормы) и повышение концентрации прогестерона. Обсуждение основного результата исследования Выявленные изменения активности Pgp согласуются с полученными нами ранее данными о более низкой его активности у кроликов самцов, чем у самок. Видимо, одной из причин половых различий в функциональной активности белка-транспортера является стимулирующее влияние эстрадиола и прогестерона на его функциональную активность. Влияние эстрадиола и прогестерона на активность Pgp может обусловливать вариабельность фармакокинетики субстратов белка-транспортера у женщин. Однако нами не найдено исследований, в которых изучалась бы связь безопасности и эффективности фармакотерапии субстратами Pgp от фазы менструального цикла. Функционирование Pgp может меняться в результате непосредственного влияния веществ на его активность, либо за счет модификации экспрессии гена MDR1, кодирующего белок-транспортер. Действие половых гормонов в физиологических (относительно низких) концентрациях на белок-транспортер скорее всего связано с изменением его экспрессии. В базе данных TRANSFAC обнаружена локализация предполагаемого estrogen response element выше сайта инициации транскрипции, но не в промоторе гена MDR1. Однако были выявлены сайты связывания для транскрипционного фактора АР-1, что указывает на возможность опосредованного влияния эстрадиола на экспрессию Pgp. Эстрогены уменьшают экспрессию белка c-Jun, являющегося основным компонентом АР-1. Повышенная экспрессия c-Jun связана с подавлением экспрессии гена MDR1 в различных клеточных линиях человека. На клетках линии T47D, трансфецированных промотором гена mdrlb, показано, что агонист прогестероновых рецепторов R5020 в физиологической концентрации 5х10 в -7 степени М, действуя через прогестероновый рецептор PRA, стимулирует экспрессию гена, кодирующего Pgp в матке мышей. Эстрогены и гестагены в высоких концентрациях (10 мкМ) также способны действовать как типичные ксенобиотики через другие типы ядерных рецепторов, такие как прегнан Х-рецептор (PXR), который повышает экспрессию гена MDR1. Ограничения исследования В выполненной работе не изучалась экспрессия Pgp в органах и тканях, что не позволяет однозначно ответить на вопросы: за счет чего изменилось функционирование белка-транспортера (вследствие модуляции экспрессии или собственно активности), а также в каком конкретно органе модуляция активности Pgp (кишечник, почки, печень) привела к изменению фармакокинетики его маркерного субстрата — фексофенадина. Дальнейшие исследования в данной области позволят установить органоспецифичные молекулярные механизмы изменения функционирования данного белка-транспортера в различные фазы менструального цикла. Заключение: Овариэктомия кроликов приводит к снижению функциональной активности Pgp; введение эстрадиола (0,5 мг) после операции в течение 14 сут не влияет на активность белка-транспортера, а последующее применение комбинации эстрадиола (0,5 мг) и прогестерона (5 мг) в течение 14 сут повышает активность Pgp. Зависимость функционирования белка-транспортера от физиологических колебаний концентраций эстрадиола и прогестерона свидетельствует о том, что эффективность и безопасность фармакотерапии субстратами Pgp в разные фазы менструального цикла может различаться, что требует коррекции доз лекарственных средств в зависимости от фазы цикла.

Авторы:

Издание: Проблемы эндокринологии
Год издания: 2018
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2018.-N 3.-С.144-150. Библ. 20 назв.
Просмотров: 157