ОСОБЕННОСТИ ФАРМАКОКИНЕТИКИ 7-О-ГЕНТИОБИОЗИДА ФОРМОНОНЕТИНА ОПРЕДЕЛЯЮТ ЕГО ГЕМОСТАТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ У КРЫС

Аннотация:

Цели исследования: 1) изучить сравнительное влияние 7-О-гентиобиозида формононетина (ГБФ) из корней М. amurensis на показатели тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза в условиях длительного энтерального и внутрибрюшинного введения крысам; 2) определить продукты метаболизма ГБФ в крови и моче крыс в условиях энтерального и внутрибрюшинного введения. Материалы и методы. Исследование выполнено на самцах крыс Wistar массой 220-280 г. В первой серии экспериментов животные на протяжении 10 дней получали ГБФ энтерально и внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг. По окончании периода введения определяли АДФ-стимулируемую агрегацию тромбоцитов, значения активированного парциального тромбопластинового времени, протромбинового времени, тромбинового времени, содержание фибриногена, растворимых фибрин-мономерных комплексов, активность антитромбина III. Для интегрального анализа системы гемостаза применяли тромбоэластометрию. Во второй серии экспериментов ГБФ вводили внутрь 6 животным (1 группа) в дозе 150 мг/кг. Отбирали кровь через 2 и 4 часа после введения ГБФ, собирали мочу за 8 часов после введения ГБФ. У 6 животных (2 группа) производили те же манипуляции после внутрибрюшинного введения ГБФ в такой же дозе. Осуществляли специальную подготовку взятых проб для хромато-масс-спектрометрического анализа; полученные фракции анализировали на хромато-масс-спектрометре Shimadzu HPLC-PDA-MS. Масс-спектры регистрировали с использованием метода электрораспылительной ионизации в режиме положительных и отрицательных ионов (1,50 кВ) в диапазоне m/z 100-800. Полученные результаты обрабатывали статистическим методом вариационных рядов с использованием критерия Манна-Уитни. Результаты. Изофлавоноид ГБФ оказывал существенное влияние на процессы тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза у крыс при его энтеральном введении, т.е. в условиях попадания ГБФ в желудочно-кишечный тракт, ингибируя процессы агрегации тромбоцитов и свертывания крови. Было зафиксировано почти 10-кратное снижение АДФ-агрегации по сравнению с показателями контрольных животных. При исследовании коагуляционного гемостаза энтеральное применение ГБФ сопровождалось отчетливым и глубоким сдвигом основных учитываемых хронометрических показателей. Принципиально иная картина наблюдалась при внутрибрюшинном введении ГБФ: его угнетающего влияния на гемостаз обнаружено не было. Определены основные этапы метаболизма ГБФ у крыс в условиях энтерального применения. Установлены продукты биотрансформации изученного изофлавоноида, происходящей в кишечнике крыс. Заключение. 1. В экспериментах на крысах впервые выявлена способность изофлавоноида ГБФ, выделенного из корней М. amurensis, ингибировать ряд показателей тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза в условиях энтерального, но не внутрибрюшинного введения. Этот факт имеет важное практическое значение, поскольку открывает перспективу создания нового перорального лекарственного средства, способного уменьшить вероятность возникновения тромбозов при различных сердечно-сосудистых заболеваниях. 2. Определены основные этапы метаболизма ГБФ у крыс, влияющие на его биодоступность в условиях энтерального применения. 3. Биологическая активность изученного изофлавоноида у крыс обусловлена его биотрансформацией в формононетин, даидзеин и другие продукты метаболизма, образующиеся под воздействием кишечной микробиоты животных. Ключевые слова: 7-О-гентиобиозид формононетина, энтеральное и внутрибрюшинное введение, тромбоциты, коагуляционный гемостаз, крысы. ВВЕДЕНИЕ. Изофлавоноиды — полифенольные соединения растительного происхождения, по многочисленным сведениям обладающие полезными свойствами для организма человека, основным из которых считается фитоэстрогенный эффект. В последние годы появляется все больше сведений, согласно которым влияние изофлавоноидов не ограничивается взаимодействием с эстрогеновыми рецепторами, а проявляется в облегчении течения и снижении риска ряда сердечно-сосудистых заболеваний, что связывают с антиоксидантными свойствами этих полифенолов, а также их воздействием на гемостаз. Реликтовое дальневосточное растение маакия амурская (Maackia amurensis Rupr. et Maxim.) наряду с другими биологически активными соединениями богата изофлавоноидами. Не так давно из корней этого растения были выделены и идентифицированы 12 гликозидов изофлавонов и птерокарпанов, которые в древесине М. amurensis присутствуют в виде агликонов. К этим гликозидам относятся 7-О-гентиобиозиды даидзеина, генистеина, афромозина, псевдобаптигенина, формононетина, 5-О-метилгенистеина, З-О-гентиобиозиды маакиаина и медикарпина, даидзин, генистин, 7-О-примверозиды формононетина и псевдобаптигенина. В наших экспериментах in vivo были продемонстрированы антиоксидантные свойства смеси указанных соединений. Серьезной проблемой, сопровождающей целесообразность и перспективность клинического применения изофлавоноидов, как и большинства других флавоноидных соединений, является их биодоступность. Почти все изофлавоны (даидзеин, генистеин и формононетин), присутствующие в растениях семейства Fabaceae почти исключительно в виде гликозидов, из-за их высокой полярности и большой молекулярной массы, не поглощаются клетками эпителия кишечника. Поэтому такие молекулы не способны всасываться в желудочно-кишечном тракте без соответствующих метаболических преобразований, которые начинаются в тонком кишечнике, продолжаются в печени и завершаются в толстом кишечнике при участии кишечной микрофлоры. Превращение гликозидов изофлавонов в биоактивные агликоны осуществляется посредством действия кишечных глюкозидаз. Затем эти агликоны доводятся до периферического кровообращения. Все эти преобразования направлены, во-первых, на отрыв сахарной части молекулы с высвобождением более легко абсорбируемых в кишечнике агликонов, во-вторых, на образование в энтероцитах тонкой кишки и печени конъюгированных форм изофлавонов и, в-третьих, на образование новых метаболитов под влиянием сапрофитной флоры толстого кишечника. Важно отметить, что благодаря столь интенсивным преобразованиям изофлавоны в крови, как правило, не обнаруживаются или присутствуют там в минорных количествах. Биотрансформация микрофлорой кишечника изучена только для изофлавонов генистеина и даидзеина, которые обнаруживаются в крови и тканях как агликоны и в конъюгированных формах (глюкурониды и сульфаты). Конъюгаты этих изофлавонов могут обладать биологической активностью, либо служить перспективным источником биологически активных соединений. Ранее в наших экспериментах была установлена антиагрегантная и антикоагулянтная активность 7-О-гентиобиозида формононетина in vitro и в условиях длительного энтерального введения крысам. Исходя из изложенной выше проблемы биодоступности флавоноидов, возник вопрос о возможной зависимости активности этого соединения от пути введения. Цели исследования: 1) изучить сравнительное влияние 7-О-гентиобиозида формононетина (ГБФ) из корней М. amurensis на показатели тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза в условиях длительного энтерального и внутрибрюшинного введения крысам; 2) определить продукты метаболизма ГБФ в крови и моче крыс в условиях энтерального и внутрибрюшинного введения. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Исследование выполнено на аутбредных самцах крыс Wistar средней массой 220-280 г. На протяжении всего периода наблюдения животные находились в условиях свободного доступа к воде и пище при нормальном чередовании светлого и темного времени суток. Эксперименты на животных проводили с соблюдением требований Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (2000) и «Правил лабораторной практики в Российской Федерации» (приказ МЗ РФ № 708н от 23.08.2010). В первой серии экспериментов для изучения влияния длительного введения на показатели тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза животные на протяжении 10 дней получали ГБФ энтерально в виде крахмальной взвеси, внутрибрюшинно — в 1% растворе диметилсуль-фоксида (ДМСО) в дозе 25 мг/кг массы тела. Полученные результаты сравнивали с соответствующими показателями контрольных животных, получавших эквиобъемные количества крахмальной слизи. По окончанию периода введения у крыс под легким эфирным наркозом из брюшной аорты отбирали кровь в объеме 5 мл и определяли стимулируемую агрегацию тромбоцитов с помощью лазерного двухканального анализатора агрегации. В качестве индуктора агрегации использовали раствор АДФ с конечной концентрацией 10 мкМ. Для исследования коагуляционного гемостаза во взятой у животных крови определяли значения активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ), протромбинового времени (ПВ), тромбинового времени (ТВ), содержание фибриногена в плазме, уровень растворимых фибрин-мономерных комплексов (РФМК) и активность антитромбина III (AT-III). Для интегрального анализа системы гемостаза применяли тромбоэластометрию. Проводимые исследования выполняли с учетом известных рекомендаций. Во второй серии экспериментов ГБФ, растворенный в 1% ДМСО, вводили внутрь животным первой группы из 6 крыс в дозе 150 мг/кг в объеме 1 мл. У двух крыс отбирали кровь, смешивая ее после отбора, через 2 часа после введения ГБФ, у двух — через 4 часа, у двух смешивали мочу, собранную за 8 часов после энтерального введения ГБФ. У 6 животных второй группы производили те же манипуляции после внутрибрюшинного введения ГБФ в такой же дозе. Этилацетатные экстракты, полученные из образцов мочи, крови и печени после энтерального и внутрибрюшинного введения препарата ГБФ, растворяли в 200 мкл этилового спирта; 100 мкл раствора каждой пробы наносили на патроны, заполненные сорбентом С-8. Остатки этилового спирта из патронов С-8 удаляли при пониженном давлении. Элюирование метаболитов ГБФ из патронов С-8 проводили последовательно 2 мл дистиллированной воды, 2 мл 40% этилового спирта и 2 мл этилового спирта. Полученные растворы, предварительно профильтрованные через фильтры с диаметром пор 2 мкм, использовали для анализа. Полученные фракции анализировали на хромато-масс-спектрометре Shimadzu HPLC-PDA-MS, снабженном контроллером СВМ-20А, двумя насосами LC-20AD, дегазатором DGU-20A3, автосамплером SIL-20A, фотодиодным детектором SPD-M20A UV-VIS и масс-спектрометрическим детектором Shimadzu LCMS-2020. Масс-спектры высокого разрешения (HR-ESI-MS) получали на приборе Shimadzu LCMS-IT-TOF (Киото, Япония). Масс-спектры на обоих приборах регистрировали с использованием метода электрораспылительной ионизации (ESI) в режиме положительных и отрицательных ионов (1,50 кВ) в диапазоне m/z 100-800. Температура источника ионов составляла 200 еС, потенциал источника ионов изменялся от -3,8 до 4,5 кВ. Расход и давление сухого газа-распылителя (N2) составляли 1,5 л/мин и 200 кПа, соответственно. Хроматографирование фракций проводили при 280 нм на колонке Discovery HS С-18 (15042.1 мм, Supelco, Bellefonte, США) и предколонке (Supelguard Ascentics С-18, 242.1 мм, Supelco, Bellefonte, США) с использованием бинарного градиента Н20 (А) — MeCN (В) с добавлением 0,1% НО Ас при скорости потока 0,2 мл/мин и температуре колонки 40°С. Градиент растворителей был следующим: 0-6 минут, 10-40% (В); 6-11 минут, 40-100% (В); 11-12 минут, 100% (В), 12-13 минут, 100-10% (В); 13-17 минут, 10% (В). Скорость потока растворителей и размер частиц колонки составляли 0,3 мл/мин и 3 мкм, соответственно. Полученные результаты обрабатывали статистическим методом вариационных рядов с использованием критерия Манна-Уитни. Расчеты велись по общепринятым формулам. Результаты представлены в виде М±га, где М — выборочное среднее, m — ошибка среднего, n — выборка для каждой из групп в конкретный период эксперимента. Разница сравниваемых средних значений считалась статистически значимой, если показатель достоверности (р) был меньше 0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ. В результате проведенных экспериментов было установлено, что 10-дневное энтеральное введение крысам ГБФ сопровождалось значительными изменениями в системе тромбоцитарного гемостаза (табл. 1). Было зафиксировано почти 10-кратное снижение АДФ-агрегации по сравнению с показателями контрольных животных. В то же время показатели агрегации тромбоцитов контрольных крыс и животных, получавших ГБФ внутри брюшинно, практически не различались. Правда, величина агрегации тромбоцитов у крыс после внутрибрюшинного введения была существенно ниже таковой у интактных и контрольных крыс, получавших крахмальную взвесь внутрь. Возможно, это объясняется влиянием ДМСО, применявшегося в условиях внутрибрюшинного контроля, и введения ГБФ. При исследовании коагуляционного гемостаза энтеральное применение ГБФ сопровождалось отчетливым и глубоким сдвигом основных учитываемых хронометрических показателей (табл. 2). Зафиксировано удлинение показателей АПТВ, ПВ и ТВ в 1,4, 1,6 и 1,7 раз, соответственно, по сравнению с цифрами контрольных животных. Совершенно иная динамика была зарегистрирована в условиях внутрибрюшинного введения изучаемого соединения: удлинения значений времен свертывания не происходило; более того, было даже установлено достоверное сокращение АПТВ и ПВ. Другие показатели коагуляционного гемостаза в контрольной и подопытной группах животных, использованных для внутрибрюшинного введения, практически не различались. Столь существенные различия, полученные при энтеральном и внутрибрюшинном путях введения ГБФ, нашли подтверждение при использовании метода тромбоэластографии, позволяющего оценить вклад всех участников гемостатических реакций в образование фибрина и описать плотность фибринового сгустка. Цифры, представленные в таблице 3, подтвердили факт выраженной гипокоагуляции (по показателю СТ) и более умеренной динамики фибринообразования (по углу а, показателям CFT и MCF) на фоне энтерального использования ГБФ. В то же время существенных различий между соответствующей контрольной группой и животными, получавшими ГБФ внутрибрюшинно, практически не обнаружено. Таким образом, в экспериментах с длительным энтеральным и внутрибрюшинным путями введения ГБФ выявлены значительные различия. При этом выраженная способность ингибировать процесс тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза выявлялась исключительно при введении ГБФ в желудочно-кишечный тракт. Представленные результаты имеют прямое отношение к особенностям фармакокинетики флавоноидов и касаются главным образом возможности воспроизведения их эффектов, получаемых in vitro, в условиях целого организма. В ходе исследования данной проблемы интересные данные были получены при определении состава и содержания ГБФ и его метаболитов в крови и моче крыс в условиях разных путей введения однократной дозы 150 мг/кг. Хромато-масс-спектрометрический анализ образцов мочи, крови и печени при энтеральном и внутрибрюшинном введении препарата ГБФ показал наличие 7 различных продуктов метаболизма ГБФ (табл. 4). Оказалось, что и через 2 и через 4 часа после энтерального введения в плазме крови животных определялись лишь следы ГБФ. Кроме того, в плазме крови через 4 часа после попадания ГБФ внутрь выявлялись следы даидзеина — одного из продуктов превращения формо-нонетина под влиянием микрофлоры толстого кишечника. Иная картина наблюдалась в крови крыс после внутрибрюшинного введения ГБФ. Через 2 часа после инъекции в крови выявлялось значительное количество ГБФ, присутствие которого через 4 часа сохранялось в виде следов. Примечательно, что даже следовых количеств каких-либо метаболитов ГБФ после его внутрибрюшинного введения определено не было. Анализ мочи после энтерального и внутрибрюшинного введения ГБФ также показал существенные различия. Моча, собранная в течение 8 часов после введения ГБФ внутрь, содержала значительное количество его метаболитов (табл. 5). Наряду со следами ГБФ в ней были обнаружены методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения 7-О-глюкуронилдаидзеин (1), сульфат формононетина (2), 7-О-глюкуронилкаликозин (3), сульфат даидзеина (4), 7-О-глюкуронилформононетин (5), даидзеин (6), и формононетин (7) (табл. 4). В то же время моча, собранная после внутрибрюшинного введения ГБФ, содержала значительное количество этого изофлавоноида (8) в неизмененном виде и значительно меньше продуктов его метаболизма. В печени удалось зафиксировать лишь следы формононетина и даидзеина. В крови при любом способе введения ГБФ продукты его метаболизма практически отсутствовали (рис. 1, табл. 5). В экспериментах на крысах длительное энтеральное введение ГБФ оказало существенное влияние на показатели тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза. Было зафиксировано значительное подавление агрегационной активности тромбоцитов. Подавляющий функцию тромбоцитов эффект изучаемого нами препарата не явился неожиданным. Способность флавоноидов и изофлавоноидов подавлять процесс агрегации тромбоцитов известна. Ранее в экспериментах in vivo суммарный сухой экстракт из древесины М. amurensis, равно как и экстракт той же части растения, содержавший сумму изофлавоноидов, существенно ослабляли агрегацию тромбоцитов у овариоэктомированных крыс. Данный эффект может быть обусловлен эндотелий-протективной активностью, проявляемой изофлавоноидами. Не исключено, что механизм антиагрегантного действия флавоноидов может быть связан с ингибированием каскада образования тромбоксана А2 (ТХА2), взаимодействием с тромбоксановыми рецепторами, влиянием на внутриклеточные события, инициируемые в результате активирования этих рецепторов, изменением внутриклеточного содержания свободных ионов кальция, уровня циклического АМФ, ингибированием GPIIb/IIIa рецепторов тромбоцитов, а также известными антиоксидантными свойствами этих соединений. Отдельно отметим, что недавно была убедительно продемонстрирована способность ряда флавоноидов ингибировать активность метаболического каскада арахидоновой кислоты. Оказалось, что из 29 изученных флавоноидов и изофлавоноидов в эксперименте in vitro некоторые проявили себя как антагонисты тромбоксановых рецепторов, а генистеин и дайдзеин в значительной мере подавляли образование ТХА,, ингибируя активность циклооксигеназы (ЦОГ) сопоставимо с известным ингибитором этого фермента — ацетилсалициловой кислотой. Последний факт представляется нам особенно интересным, учитывая, что оба отмеченных соединения, как и использованный нами ГБФ, являются изофлавоноидами. Как известно, активность ЦОГ в тромбоцитах обеспечивает метаболизм арахидоновой кислоты с образованием в качестве конечного продукта этого каскада синтеза ТХА2. Примечательно, что активность тромбоксансинтазы под влиянием изученных флавоноидов в цитированной выше работе практически не изменялась. Сходные результаты были получены ранее и другими исследователями. Анализируя предполагаемые механизмы воздействия флавоноидов на сложный каскад свертывания крови, следует отметить 2 основные возможные мишени, играющие ключевую роль в процессе гемокоагуляции. Этими мишенями являются сериновые протеазы: фактор Ха, в комплексе с фактором V активирующий переход протромбина в тромбин, и сам тромбин, обеспечивающий переход фибриногена в фибрин. Исследования последних лет показывают, что природные полифенолы способны ингибировать активность многих ферментов, в том числе сериновых протеаз. Так, было продемонстрировано, что некоторые сульфатированные флавоноиды непрямо ингибируют фактор Ха посредством модулирования активности AT-III. А совсем недавно с помощью метода молекулярного моделирования (молекулярного докинга) удалось показать, что 4 флавоноида из 19 изученных полифенолов прямо ингибировали активность фактора Ха, связываясь с активными местами в его молекуле и блокируя тем самым доступ к ней субстратов. Не исключено также, что обнаруженные эффекты обусловлены прямым или непрямым воздействием на активность тромбина, ингибирование которой может приводить к развитию как антитромбоцитарно-го, так и антикоагулянтного эффектов. В ряде исследований, проведенных в последние годы, с помощью in vitro экспериментов удалось показать угнетение амидолитической активности тромбина при воздействии полифенольных комплексов и отдельных компонентов, выделенных из различных растений. Использование молекулярного докинга подтвердило способность ряда флавоноидов прямо блокировать активность тромбина за счет связывания с активными центрами его молекулы. И наконец, совсем недавно было продемонстрировано, что из 20 проверенных природных полифенолов 6 ингибировали амидолитическую активность тромбина, а 3 из них подавляли его протеолитическую активность, угнетая способность тромбина индуцировать полимеризацию фибриногена. В результате проведенного исследования впервые установлено, что изофлавоноид 7-О-гентиобиозид формононетина оказывает существенное влияние на процессы тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза у крыс при его энтеральном введении, т.е. в условиях попадания ГБФ в желудочно-кишечный тракт. Принципиально иная картина наблюдалась при внутрибрюшинном введении ГБФ. В этих условиях угнетающего влияния у использованного гликозида изофлавоноида на гемостаз обнаружено не было. Не до конца решенной остается важная проблема, касающаяся возможности воспроизведения эффектов флавоноидов вообще и изофлавоноидов в частности, получаемых in vitro, в условиях целого организма. Эта непростая проблема связана с особенностями химического строения изофлавоноидов, их биодоступности и метаболизма в организме. Поэтому важность полученных нами результатов состоит еще и в том, что эксперименты с длительным энтеральным введением ГБФ крысам подтверждают факт наличия антитромбоцитарного и антикоагулянтного действия этого изофлавоноида in vivo. С целью более глубокого проникновения в отмеченную проблему была проведена вторая часть нашего исследования. Относительно исследования биодоступности ГБФ при разных путях введения крысам проведенная работа показала, что 7-О-гентиобиозид формононетина (рис. 2) при попадании в организм через желудочно-кишечный тракт, как и другие изофлавоноиды, подвергается существенным метаболическим трансформациям. Первая из них (дегликозилирование), по-видимому, происходит в тонком кишечнике при участии бета-глюкозидаз щеточной каймы энтероцитов с отщеплением сахарной части и высвобождением его агликона. Наибольшую роль в этом процессе у млекопитающих играет фермент лактаза-флоридзиновая гидролаза. Абсорбированный агликон (в нашем случае — формононетин) обычно подвергается сначала деметилированию с образованием даидзеина, а затем конъюгированию в клетках тонкого кишечника млекопитающих. Часть изофлавонов с током крови попадает в печень, где также образуются конъюгаты изофлавонов 6 и 7 (табл. 5) в процессе их глюкуронирования, сульфатирования и гидроксилирования(рис. 2). Затем из печени конъюгированные соединения разносятся кровью по организму, взаимодействуют с органами-мишенями и экскретируются почками с мочой. Некоторая же часть конъюгатов из печени с желчью вновь секретируется в кишечник, доходит до толстой кишки, где под влиянием кишечнои микрофлоры превращается в активные микробные метаболиты, способные вновь абсорбироваться и оказать значимое воздействие на организм. Вполне возможно, что описанная так называемая энтерогепатическая циркуляция и обеспечивает биологическую активность и продолжительность действия многих флавоноидов. Так, в толстом кишечнике человека изучаемый нами формононетин быстро конвертируется в дайдзеин и далее — в эквол и/или О-десметиланголензин. И именно эквол, как установлено, обладает наибольшей биологической активностью в организме человека. В нашей работе удалось показать, что у крыс, как и у людей, после попадания внутрь на первом этапе происходит гидролиз ГБФ в кишечнике с высвобождением формононетина (7), который был обнаружен в моче (табл. 5). Затем часть формононетина и даидзеина подверглась конъюгированию в клетках кишечника и печени, а другая часть в толстом кишечнике конвертировалась в дайдзеин (6), который также был идентифицирован в моче. Кроме того, в моче обнаружен предположительно ряд конъюгатов формононетина и даидзеина, в основном в виде глюкуронидов и сульфатов (1-5). Эквол как конечный продукт метаболизма даидзеина обнаружить не удалось, что, по-видимому, обусловлено особенностями микробиоты толстого кишечника у данных крыс. Поэтому в наших экспериментах биологическая активность, зафиксированная в результате энтерального введения ГБФ, по всей вероятности, обеспечивалась формононетином и/или даидзеином, идентифицированными в моче крыс. Не исключено, что конъюгаты этих изофлавонов (1-5) могут служить прекрасными источниками, из которых после ферментативного гидролиза смогут образовываться биологически активные формононетин (7) и даидзеин (6). Что касается внутрибрюшинного введения ГБФ, из проведенных экспериментов следует, что в этом случае соединение в значительной мере в неизмененном состоянии оказывается в крови, а затем — в моче, не подвергаясь столь выраженным метаболическим преобразованиям. По всей видимости, значительная часть введенного внутрибрюшинно неметаболизированного ГБФ попадала в кровоток, затем экскретировалась с мочой, не оказывая существенного биологического эффекта. Полученные данные соответствовали результатам, полученным корейскими исследователями, которые заметили, что антиагрегантная активность у крыс при энтеральном введении изофлавоноидов пуэрарина и даидзина значительно превосходила таковую при их внутрибрюшинном введении. Такой эффект, по мнению авторов, обусловлен образованием под влиянием микрофлоры кишечника даидзеина, основного метаболита данных флавоноидов. Представленные результаты указывают на важную роль желудочно-кишечного тракта и его микрофлоры в процессе биотрансформации ГБФ, как и других флавоноидов в целом. Насколько такие различия в путях введения влияют на фармакологическую активность ГБФ, должны показать дальнейшие исследования, проводимые в условиях in vivo. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. В экспериментах на крысах впервые выявлена способность изофлавоноида 7-О-гентиобиозида формононетина, выделенного из корней М. amurensis, ингибировать ряд показателей тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза в условиях энтерального, но не внутрибрюшинного введения. Этот факт имеет важное практическое значение, поскольку открывает перспективу создания нового перорального лекарственного средства, способного уменьшить вероятность возникновения тромбозов при различных сердечно-сосудистых заболеваниях. Определены основные этапы метаболизма 7-О-гентиобиозида формононетина у крыс, влияющие на его биодоступность в условиях энтерального применения. Биологическая активность изученного изофлавоноида у крыс обусловлена его биотрансформацией в фор-мононетин, даидзеин и другие продукты метаболизма, образующиеся под воздействием кишечной микробиоты животных.

Авторы:

Издание: Тромбоз гемостаз и реология
Год издания: 2018
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2018.-N 2.-С.78-87. Библ. 32 назв.
Просмотров: 64