ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ И ИХ АССОЦИАЦИИ С ПАРАМЕТРАМИ ОКИСЛИТЕЛЬНО-АНТИОКСИДАНТНОГО ПОТЕНЦИАЛА КРОВИ И ЛИПОПРОТЕИНАССОЦИИРОВАННОЙ ФОСФОЛИПАЗОЙ А2 ПРИ КОРОНАРНОМ АТЕРОСКЛЕРОЗЕ

Аннотация:

Исследовали содержание отдельных полиненасыщенных жирных кислот в сыворотке крови и их ассоциации с параметрами окислительного повреждения (FORT), общей антиоксидантной способности (FORD), липопротеинассоциированной фосфолипазой А2 (Лп-ФЛА2) и уровнем продуктов ПОЛ у мужчин с коронарным атеросклерозом. У пациентов с коронарным атеросклерозом выявлено снижение массовой доли полиненасыщенных жирных кислот и FORD. Показатели Лп-ФЛА2, FORT и продуктов ПОЛ были выше, чем в контрольной группе относительно здоровых мужчин. Установлены отрицательные корреляционные связи средней силы полиненасыщенных жирных кислот с биомаркерами воспаления и оксидативным стрессом, которые, вероятно, свидетельствуют о том, что снижение уровня данных кислот сопровождается повышением активности образования свободных радикалов, что может являться фактором, повышающим риск развития атеросклероза. Ключевые слова: коронарный атеросклероз, жирные кислоты, окислительный стресс, антиоксидантная защита, липопротеинассоциированная фосфолипаза А2. В общепринятых и разработанных теориях патогенеза атеросклероза отмечается, что нарушения регуляции обмена липидов, липопротеинов, жирных кислот, развитие системного воспаления и окислительного стресса являются ведущими факторами риска, влияющими на развитие и прогрессирование атеросклероза. В последние годы большое количество исследований в области атеросклероза посвящено поиску и изучению биохимических маркеров заболевания. Одним из таких маркеров является липопротеинассоциированная фосфолипаза А2 (Лп-ФЛА2). Уровень циркулирующей Лп-ФЛА2 изучался во многих эпидемиологических исследованиях в качестве потенциального биомаркера, специфичного в отношении сосудистого воспаления и информирующего о развитии и прогрессировании сердечно-сосудистых заболеваний, в том числе коронарного атеросклероза. При нарушении баланса про- и антиоксидантных систем в организме возникает оксидативный стресс. В свою очередь, он рассматривается как важный патогенетический фактор возникновения острых и хронических дегенеративных заболеваний, таких как атеросклероз, диабет, инсульт и инфаркт. Целью данной работы являлось изучение содержания отдельных полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) и их возможной ассоциации с параметрами окислительного стресса, антиоксидантной защиты крови и Лп-ФЛА2 у пациентов с коронарным атеросклерозом (КА). МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ. В исследование были включены 80 мужчин в возрасте 38-66 лет. Основную группу составили 60 человек с коронароангиографически верифицированным атеросклерозом коронарных артерий, со стабильной стенокардией напряжения, без острого коронарного синдрома, поступивших в клинику ФГБУ НМИЦ им. акад. Е.Н.Мешалкина МЗ РФ на операцию коронарного шунтирования. Критерии исключения из исследования: инфаркт миокарда давностью менее 6 мес, острые и обострение хронических инфекционно-воспалительных заболеваний, почечная недостаточность, активные заболевания печени, онкологические заболевания. Контрольная группа состояла из 20 относительно здоровых мужчин, у которых согласно данным клинико-функциональных исследований не было ИБС. Все пациенты заполняли форму информированного согласия на участие в исследовании. Кровь у пациентов опытной и контрольной групп брали из локтевой вены в утренние часы после 10-12ч голодания для получения сыворотки. Во всех образцах после экстракции и метанолиза исследовали жирно-кислотный состав методами высокоэффективной капиллярной газожидкостной хроматографии (хроматограф "Agilent Technologies" 6890N с пламенно-ионизационным детектором) и хромато-масс-спектрометрии (хроматограф "Agilent Technologies" 6890N с масс-селективным детектором 5975N). Изучали массовую долю ПНЖК: линолевой (С18:2, W-6), а-линоленовой (С18:3, W-3), y-линоленовой (С18:3, w-6), эйкозадиеновой (С20:2, w-6), арахидоновой (С20:4, w-б), эйкозатриеновой (С20:3, w-6), эйкозапентаеновой (С20:5, w-3), докозапентаеновой (С22:5, w-З) и докозагексаеновой (С22:6, w-З). Оценку окислительного повреждения свободными радикалами (Free Oxygen Radicals Test; тест FORT) и общей антиоксидантной способности (Free Oxygen Radicals Defence; тест FORD) проводили на анализаторе "FORM Plus CR3000" ("Callegari"). Методом ИФА определяли концентрации Лп-ФЛА2 с использованием тест-системы ELISA ("Cloud-Clone Corp"). Уровень продуктов ПОЛ в выделенных из сыворотки крови ЛПНП оценивали по содержанию в ЛПНП ТБК-реактивных продуктов (МДА) флюориметрическим методом. Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью программного пакета "SPSS 13.0". Данные представлены в виде медианы и 25 и 75 процентилей. Для оценки формы распределения признаков использовали тест Колмогорова—Смирнова. Достоверность различий между средними значениями оценивали с помощью критерия Манна—Уитни, корреляционные связи — с помощью коэффициента корреляции Спирмена (г). Различия считали статистически значимыми при р<0.05. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Всего в сыворотке крови было идентифицировано 20 жирных кислот (насыщенных и ненасыщенных), в том числе 9 ПНЖК, которые мы изучали в данном исследовании (табл. 1). Сравнительный анализ показал значимое уменьшение массовой доли ПНЖК в группе пациентов с КА по сравнению с контрольной группой. У мужчин с КА отмечено снижение в содержании омега-3 ПНЖК: докозапентаеновой кислоты в 1.65 раза (р<0.01), докозагексаеновой — в 1.63 раза и эйкозапентаеновой — в 1.44 раза (р<0.05). Полученные результаты не противоречат данным об изменении в соотношении отдельных ПНЖК в сыворотке крови в сторону их снижения у больных с атеросклерозом за счет повышенных процессов ПОЛ, которым наиболее подвержены ПНЖК, что еще раз подчеркивает важность оксидативного стресса в патогенезе заболевания. Нами также установлено статистически достоверное снижение омега-6 ПНЖК у пациентов с КА за счет арахидоновой (в 1.76 раза), эйкозадиеновой (в 1.6 раза) и линолевой (в 1.38 раза) кислоты (р<0.01). При детальном изучении биомаркеров воспаления и оксидативного стресса (табл. 2) в группе пациентов с КА, как и предполагалось, обнаружено повышение показателя окислительного повреждения (FORT) в 1.2 раза (р<0.05). Оценка общей антиоксидантной способности (FORD) показала противоположный результат — снижение в 1.8 раза (р<0.01) по сравнению с контрольной группой. Полученные результаты свидетельствуют о том, что оксидативный стресс играет значимую роль в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний. Уровень Лп-ФЛА2 у мужчин с КА оказался выше в 1.5 раза по сравнению с контрольной группой (р<0.05). Этот фермент принимает непосредственное участие в атерогенезе, окисляя свободные ЖК, вызывает модификацию липидов и стимулирует развитие воспаления. Уровень продуктов ПОЛ в ЛПНП после 30 мин инкубации in vitro с катализаторами окисления был выше в 1.3 раза (р<0.01) у мужчин с КА, что указывает на низкую устойчивость ЛПНП к окислению при КА. При проведении корреляционного анализа для оценки взаимосвязи изменений в жирно-кислотном составе с показателями FORT, FORD и Лп-ФЛА2 (табл. 3) установлены отрицательные связи средней силы у всех ПНЖК с показателями окислительного стресса (r<-0.31; р<0.01), большинства ПНЖК с Лп-ФЛА2 (r<-0.22; р<0.05). Можно предположить, что повышение уровня ПНЖК сопровождается снижением активности образования свободных радикалов и может являться фактором, уменьшающим риск развития атеросклероза. Таким образом, при КА в крови наблюдаются выраженные потенциально атерогенные изменения спектра ПНЖК: снижение содержания w>3 ПНЖК (докозапентаеновой, докозагексаеновой и эйкозапентаеновой) и w-6 ПНЖК (арахидоновой, эйкозадиеновой и линолевой), ассоциированное с показателями окислительно-антиоксидантного дисбаланса крови и повышенной концентрацией окислительно-воспалительного биомаркера — ЛП-ФЛА2. Работа выполнена в рамках бюджетной темы по государственному заданию № 0324-2018-0002 и бюджетной темы по поддержке биоресурсных коллекций по государственному заданию № 0324-2017-0048.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2018
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2018.-N 7.-С.14-17. Библ. 15 назв.
Просмотров: 58