ЛИМФОЦИТЫ, ИНФИЛЬТРИРУЮЩИЕ ОПУХОЛЬ ПРИ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ. СВЯЗЬ С КЛИНИКО-ПАТОЛОГИЧЕСКИМИ ПАРАМЕТРАМИ

Аннотация:

У пациенток с первично операбельным РМЖ наблюдалась положительная взаимосвязь между возрастом и количеством СD16+-лимфоцитов и отрицательная — с количеством регуляторных CD4+CD25+CD127- Т-клеток и уровнем пролиферативной активности опухолевых клеток Ki-67. Повышенный уровень Ki-67 ассоциировался со снижением количества лимфоцитов эффекторного звена иммунитета (СD8+ и CD16+) и увеличением числа регуляторных CD8+CD11b-CD28- Т-клеток. Отсутствие экспрессии рецепторов эстрогенов сочеталось со снижением цитотоксического потенциала CD8+ Т-клеток по сравнению с ER+-РМЖ. Процентное содержание общего числа СD8+-лимфоцитов (CD3+CD8+ и CD8+CD11b+CD28+) в составе лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, было выше при PR+ типе, чем при PR-. При увеличении опухолевой нагрузки наблюдалось снижение количества лимфоцитов, экспрессирующих маркер CD16, и их цитотоксического потенциала. Ключевые слова: рак молочной железы, Ki-67%, рецепторы эстрогенов и прогестерона, лимфоциты, инфильтрирующие опухоль РМЖ является гетерогенным заболеванием и на основании профиля экспрессии генов рецепторов эстрогенов (ER) и прогестерона (PR), маркера пролиферации Ki-67, рецептора эпидермального фактора роста 2 (HER2) выделяют 5 подтипов РМЖ, которые различаются по характеру течения, чувствительности к терапии и прогнозу заболевания. Исход заболевания и эффект лечения зависят также от разных факторов организма хозяина, влияющих на опухолевый рост. Известно, что в контроле и ограничении опухолевого роста активное участие принимает иммунная система: при злокачественных опухолях, включая РМЖ, прогностическое и предиктивное значение могут иметь эффекторные и регуляторные популяции лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль (TILs). Установлено, что при РМЖ прогностическое значение TILs зависит от подтипа рака. Однако взаимосвязь между вариантами внутриопухолевых иммунных инфильтратов и исходом РМЖ остается не до конца ясной. Цель нашего исследования — определить связи между основными клинико-патологическими характеристиками РМЖ: экспрессией ER и PR, уровнем пролиферативной активности (%Ki-67), распространенностью процесса и количеством основных эффекторных и регуляторных популяций TILs до лечения. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ. В исследование были включены больные первично-операбельным (1-я группа; N=61) и первично неоперабельным РМЖ (2-я группа; N=26) со всеми подтипами опухоли. Возраст пациенток— от 24 до 76 лет, медиана — 55 лет. Все пациентки подписали информированное согласие на проведение иммунологического обследования. Образцы опухолевой ткани получали из операционного материала (1-я группа) или до лечения при Соге-биопсии опухолевого узла (2-я группа). В клеточной суспензии из опухолевой ткани определяли содержание TILs (в %) и их субпопуляционный состав с помощью многопараметрового иммунофенотипирования методом проточной цитофлюориметрии на 5-параметровом проточном цитофлюориметре "FACSCalibur" ("Becton Dickinson"). Лимфоциты выделяли по параметрам светорассеяния и экспрессии CD45 в 100% случаев. Проводили 2-, 3- и 4-цветное окрашивание клеток с использованием панели моноклональных антител к следующим маркерам лимфоцитов: CD3, CD4, CD8, CD28, CD11 b, HLA-DR, CD25, CD16, CD56, CD19, CD127, Perforin ("BD Biosciences", "BekmanCoulter"). Цитотоксический потенциал (ЦТП) CD16+- и СD8+-лимфоцитов оценивали как долю Реrforin+-клеток в составе соответствующей популяции. Полученные результаты статистически обрабатывали в программе "Statistica 7.0" ("StatSoft, inc."). Характер распределения показателей определяли с помощью критерия Шапиро—Уилка. Результаты представлены в виде медианы (Me) и квартилей (25%; 75%). Значимость различий оценивали с помощью непараметрического двустороннего U критерия Манна—Уитни. Связь между показателями определяли корреляционным анализом Спирмена (коэффициент корреляции р). Различия считали значимыми при р<0.05. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Известно, что у пациенток моложе 30-40 лет РМЖ протекает агрессивнее, чем у женщин старшего возраста. Корреляционный анализ связи между возрастом и содержанием TILs у больных 1-й группы показал, что, хотя доля TILs с возрастом уменьшалась (р=-0.317; р-0.013), наблюдалась положительная ассоциация между возрастом и количеством CD16+-лимфоцитов (р=0.379; р=0.012). В то же время увеличение возраста сопровождалось уменьшением количества регуляторных CD4+CD25+CD127- Т-клеток (Treg) (р=-0.316; р=0.047) и уровня пролиферативной активности Ki-67% (р=-0.491; р=0,000). Можно предположить, что повышение с возрастом в составе TILs доли клеток-эффекторов естественного иммунитета (CD16+NK- или NKT-клеток) и снижение количества Treg и уровня Ki-67 вносит определенный вклад в более благоприятное течение РМЖ у больных старшего возраста. У пациенток с низким уровнем Ki-67 (<20%) значение соотношения CD8+CD28+/CD8+ CD28- Т-клеток было значимо выше, а количество регуляторных CD8+CD11 b-CD28- Т-лимфоцитов ниже, чем в группе с высоким уровнем показателя (>20%) (табл. 1). Корреляционный анализ выявил также отрицательную связь между уровнем пролиферативной активности опухолевых клеток и ЦТП СD8+-лимфоцитов (р=-0.328, р=0.036). Таким образом, высокая пролиферативная активность опухолевых клеток у больных 1-й группы (с первично-операбельным РМЖ) ассоциировалась со снижением количества и функциональной активности лимфоцитов эффекторного звена иммунитета и повышением количества клеток-супрессоров. Установлено, что прогностическим фактором при РМЖ является также наличие или отсутствие ER и PR на опухолевых клетках. Опухоли, экспрессирующие оба или хотя бы один из рецепторов стероидных гормонов, характеризуются более благоприятным течением, чем варианты РМЖ, не экспрессирующие эти рецепторы. Мы обнаружили, что уровень маркера пролиферации Ki-67 был выше у больных с ЕР--статусом, чем у пациенток с ER+-TnnoM РМЖ: 60 (50; 85)% и 30 (20; 50)% соответственно (р=0.000). PR--статус также ассоциировался с увеличением уровня Ki-67 (табл. 2). Отсутствие экспрессии ER сочеталось со снижением ЦТП CD8+ Т-клеток по сравнению с ER+-THnoM РМЖ: 6.67 (1.48; 9.99)% и 15.4 (7.2; 21.0)% соответственно (р=0.041), а отсутствие экспрессии PR — со снижением содержания СD8+-лимфоцитов (CD3+CD8+ и CD8+CD11b+CD28+) в составе TILs по сравнению с PR+-типом (табл. 2). Таким образом, основные различия между рецептор+- и рецептор--вариантами РМЖ касались CD8+-клеток, что подтверждает особое значение этой популяции лимфоцитов в иммунном ответе на опухоль при разных подтипах РМЖ. Количественный и качественный состав лимфоцитов в опухолевом микроокружении может изменяться в процессе опухолевого роста. Мы обнаружили, что доля лимфоцитов, экспрессирующих маркер CD16 (CD16+-лимфоциты, CD16+Perforin+- и CD8+CD16+-клетки, а также ЦТП СD16+-лимфоцитов), у больных в 1-й группе был значимо выше, чем у пациенток 2-й группы. У пациенток 1 -й группы было повышено количество регуляторных CD8+ CD11b-CD28- Т-клеток по сравнению с больными 2-й группы, что может отражать ответ регуляторных клеток на эффективный иммунный ответ, существующий на начальных стадиях заболевания. Количество NK- и В-клеток, наивных CD8+CD11b-CD28+ Т-клеток и значение соотношения CD8+ CD28VCD8+CD28- Т-лимфоцитов были выше у пациенток 2-й группы. Количество клеток, экспрессирующих активационный маркер CD25 в обеих группах было на одном уровне, однако количество лимфоцитов, экспрессирующих активационный маркер HLA-DR, было значимо выше у больных 2-й группы по сравнению с 1-й (табл.3). Можно предположить, что повышение количества наивных CD8+ Т-лимфоцитов и лимфоцитов, экспрессирующих активационный маркер HLA-DR, у больных 2-й группы связано с нарастанием объема опухолевого поражения и усилением воспаления в процессе опухолевого роста. В то же время более высокое количество и более высокий ЦТП CD16+-лимфоцитов, обнаруженные у больных с ранними стадиями заболевания, могут указывать на положительную роль этих клеток в иммунном ответе при РМЖ. Их положительное значение подтверждает и то, что более высокое содержание CD16+- и CD16+Perforin+-клеток было обнаружено у больных с низким уровнем Ki-67 (<20%). У пациенток обеих групп в структуре TILs преобладали CD3+ Т-клетки. Количество основных популяций Т-клеток (CD3+CD4+ и CD3+CD8+) и соотношение CD4/CD8 в обеих группах были практически на одном уровне (табл. 3). Представления о значении различных популяций лимфоцитов для прогноза заболевания и клинической эффективности лечения при РМЖ остаются противоречивыми, что во многом связано с существованием разных подтипов РМЖ. Обнаруженная связь между основными клинико-патологическими маркерами РМЖ и популяциями TILs подтверждает необходимость тщательного и глубокого исследования прогностического и предиктивного значения эффекторных и регуляторных популяций лимфоцитов врожденного и адаптивного иммунитета, инфильтрирующих опухоль, при РМЖ в зависимости от молекулярного фенотипа, гистологического варианта опухоли и стадии заболевания.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2018
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2018.-N 8.-С.200-203. Библ. 10 назв.
Просмотров: 400