ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ НЕОАДЪЮВАНТНОЙ И АДЪЮВАНТНОЙ ТЕРАПИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ НА СТРУКТУРУ БРЫЖЕЕЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ

Аннотация:

Проведен морфометрический анализ брыжеечных лимфатических узлов самок крыс Вистар при химически индуцированном РМЖ. У крыс с РМЖ без лечения увеличивался объем синусной системы, выявлялись морфологические признаки угнетения клеточного звена иммунитета и пониженная активность гуморального звена иммунитета, макрофагальная реакция. При химиотерапии РМЖ уменьшались объемы паракортикальной зоны и лимфоидных узелков, снижалась пролиферативная активность лимфоидных клеток в паракортикальной и В-зоне, уменьшалось количество макрофагов. При удалении опухоли молочной железы с последующим проведением курса химиотерапии по сравнению с неоадъювантной терапией повышался транспорт лимфы, увеличивался объем паракортикальной зоны, повышалась пролиферативная активность клеток в паракортикальной и В-зоне, уменьшались объемы лимфоидных узелков с герминативными центрами и без них, а также мозговых тяжей. Ключевые слова: химически индуцированный рак молочной железы, крысы-самки Вистар, брыжеечный лимфатический узел, морфометрия. Морфофункциональный статус лимфатического узла (ЛУ) можно рассматривать в качестве маркера компенсаторно-приспособительных реакций в организме. Большое прогностическое значение для определения состояния дренируемого ЛУ органа отводится структурно-функциональному состоянию ЛУ. Исследование преобразований, происходящих в отдаленных от первичного опухолевого узла ЛУ, имеет большое значение для определения интенсивности метастазирования опухоли. При метастазировании основным, а зачастую и единственным методом лечения рака является химиотерапия (XT), которая усугубляет имеющийся дисбаланс в иммунной системе, оказывая повреждающее действие на лимфоидную ткань, что является одной из центральных проблем терапии опухолей. Изучение структурных изменений в брыжеечных ЛУ при химически индуцированном РМЖ, который имеет много общего с РМЖ у человека, при неоадъювантной и адъювантной терапии позволит оценить изменения резистентности организма и состояние местного иммунного ответа при данных методах лечения. Целью исследования являлось изучение структурных преобразований в брыжеечных ЛУ при химически индуцированном РМЖ, XT и сочетании резекции РМЖ и XT. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ. Эксперимент проведен на 80 половозрелых (3 мес на начало эксперимента) крысах-самках Вистар массой 250-300 г с соблюдением принципов гуманности. Было сформировано четыре группы животных: 1-я — контрольная (интактные животные), 2-я — РМЖ без лечения, 3-я —РМЖ+ХТ, 4-я — резекция РМЖ с последующим курсом XT (резекция РМЖ+ХТ). В каждой группе было по 20 животных. РМЖ индуцировали 5-кратным введением N-метил-N-нитрозомочевины (МИМ; "Sigma") с интервалом в 7 сут (подкожно в область 2-й молочной железы справа). Курс XT проводили через 6 мес с момента индукции РМЖ и он включал внутрибрюшинное введение 15 мг/кг 5-фторурацила и 2.5 мг/кг метотрексата ("Ebewe") на 1 -е и 8-е сутки и 3 мг/кг циклофосфана ("Биохимия") внутрибрюшинно ежедневно однократно в течение 14 сут. Из эксперимента крыс выводили через 6.5 мес с момента индукции РМЖ под наркозом (40 мг/кг нембутала внутрибрюшинно; "Sigma"). Гистологическое исследование брыжеечных ЛУ (краниальных) проводили по стандартной методике. При микроскопии определяли общую площадь среза ЛУ, проведенного на уровне ворот, площади лимфоидных узелков со светлыми и без светлых центров, межузелковой и паракортикальной зон, мозговых тяжей и синусов, краевого синуса, капсулы и трабекул. Вычисляли относительные объемы указанных структурных компонентов. В разных зонах ЛУ подсчитывали абсолютное количество клеток на стандартной площади 2025 мкм2. Для всех морфологических данных вычисляли абсолютные и относительные показатели. Статистическую обработку проводили в программе "Statistica 6.0" ("StatSoft Inc.") с использованием t критерия Стьюдента. Различия считали достоверными прир<0.05. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. При химически индуцированном РМЖ по сравнению с интактными крысами (контроль) увеличивался общий объем брыжеечных ЛУ (на 26%), относительные объемы вторичных лимфоидных узелков со светлыми центрами (на 31 %), мозговых синусов (на 24%) и краевого синуса, а также уменьшались объемы паракортикальной зоны (на 26%), лимфоидных узелков без светлых центров на (24%; табл. 1). В краевом и мозговых синусах ЛУ обнаружены метастазы опухоли — крупные полиморфные атипичные клетки. Отмечено уменьшение количества лимфоцитов в В-зоне, увеличение количества иммунобластов и клеток в стадии митоза в светлых центрах лимфоидных узелков (табл. 2) и уменьшение количества плазматических клеток и зрелых плазмоцитов в мозговых тяжах и мозговых синусах. В паракортикальной зоне уменьшалось на 21% абсолютное количество малых лимфоцитов (контроль — 81.0±1.5; РМЖ без лечения — 64.1±.5), отмечался синусный гистиоцитоз, увеличивалось количество макрофагов во всех структурных зонах ЛУ. По сравнению с контролем в группе РМЖ+ХТ снижались объемы лимфоидных узелков со светлыми центрами и паракортикальной зоны и увеличивались объемы мозговых тяжей и мозговых синусов (табл. 1). По сравнению с группой РМЖ без лечения уменьшались общий объем брыжеечных ЛУ (на 56%) и объем лимфоидных узелков со светлыми центрами (на 43%), увеличивался объем мозговых тяжей (табл. 1). Отмечено уменьшение количества опухолевых клеток в мозговых синусах (на 40%), иммунобластов, средних лимфоцитов и клеток в стадии митоза в светлых центрах лимфоидных узелков, при увеличении количества незрелых плазматических клеток в мозговых тяжах и незрелых и зрелых плазматических клеток в мозговых синусах (табл.2). Количество малых лимфоцитов в паракортикальной зоне ЛУ увеличивалось, но уменьшалось количество посткапиллярных венул с высоким эндотелием и количество макрофагов в корковом веществе. В 4-й группе (резекция РМЖ+ХТ), как и в группе РМЖ без лечения, увеличивался объем мозговых синусов (на 33%) и уменьшался объем паракортикальной зоны и лимфоидных узелков без светлых центров (табл. 1). По сравнению с 3-й группой (РМЖ+ХТ) в 4-й увеличивался объем ЛУ (на 77%) и объем паракортикальной зоны, уменьшался объем лимфоидных узелков со светлыми и без светлых центров, мозговых тяжей. При этом в лимфоидных узелках со светлыми центрами возросло количество иммунобластов (в 2.2 раза), митотически делящихся клеток (в 12 раз), а в мозговых тяжах количество иммунобластов было увеличено на 62%. В корковом веществе количество макрофагов возросло до значений интактной группы (табл. 2), а в паракортикальной зоне количество средних лимфоцитов увеличивалось на 80%. Выявленные структурные преобразования в брыжеечных ЛУ 2-й группы (РМЖ без лечения) могут быть результатом их поражения метастазами. Эти изменения характеризуются выраженным синусным гистиоцитозом и макрофагальной реакцией, повышением транспортной функции (увеличение объема ЛУ, мозговых и краевого синусов), морфологическими признаками угнетения клеточного звена иммунитета (уменьшение объема паракортикальной зоны и количество лимфоцитов в ней) и пониженной активностью гуморального звена иммунитета. Гипоплазия паракортикальной зоны может быть обусловлена инволютивными изменениями тимуса (2-я фаза) при РМЖ, усилением продукции тимусом дефектных аутореактивных цитотоксических клеток, необходимых для формирования опухолевой иммунной толерантности. РМЖ вызвал структурные повреждения в брыжеечных ЛУ, которые свидетельствуют о снижении активности местного иммунного ответа, повышении транспортной и фильтрационной функций. В 3-й группе (РМЖ+ХТ) по сравнению со 2-й группой (РМЖ без лечения) в брыжеечных ЛУ выявлены морфологические признаки ослабления дренажа (уменьшение объема ЛУ, сужение краевого синуса) и барьерно-фильтрационных свойств: уменьшение объема паракортикальной зоны, объема лимфоидных узелков со светлыми центрами, снижение пролиферативной активности клеток в лимфоидных узелках со светлыми центрами и паракортикальной зоне; во всех структурных зонах ЛУ — уменьшение количества макрофагов. Эти деструктивные процессы в брыжеечных ЛУ могут быть обусловлены действием химиопрепаратов, оказывающими подавляющее воздействие на активно пролиферирующие и дифференцирующиеся клетки, что вызывает делимфотизацию паренхимы тимуса. В 4-й группе (резекция РМЖ+ХТ) по сравнению с 3-й (РМЖ+ХТ) в брыжеечных ЛУ выявлены морфологические признаки повышения транспортной функции (увеличение общего объема ЛУ, сохранение увеличенного объема мозговых синусов) к активности Т-звена иммунного ответа (увеличение объема паракортикальной зоны, количества макрофагов в корковом веществе ЛУ, повышение пролиферативной активности клеток в паракортикальной и В-зоне). При этом уменьшение объема лимфоидных узелков со светлыми и без светлых центров и мозговых тяжей можно рассматривать как благоприятные, с точки зрения сохранения активности клеточного звена лимфоидной системы, явления. Все это может свидетельствовать об ослаблении антигенной стимуляции и повышении барьерно-фильтрационных свойств ЛУ, а также о повышении активности цитотоксических Т-лимфоцитов, что подтверждается данными об увеличении плотности клеточных элементов в корковом веществе тимуса при удалении опухоли молочной железы и XT. Результаты морфологического исследования показали, что резекция основного очага опухоли молочной железы с последующим курсом XT, в отличие от неоадъювантной XT, способствует повышению активности местного иммунного ответа и барьерно-фильтрационных свойств брыжеечных ЛУ.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2018
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2018.-N 8.-С.204-208. Библ. 13 назв.
Просмотров: 29