СРАВНИТЕЛЬНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ БИОПТАТОВ И ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ПРОГНОЗА ТЕЧЕНИЯ ДИСПЛАСТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ ШЕЙКИ МАТКИ У МОЛОДЫХ НЕРОЖАВШИХ ЖЕНЩИН С ВИРУСОМ ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА

Аннотация:

Сравнительный анализ гистологического исследования биоптатов и жидкостной цитологии шейки матки доказывает высокую информативность последней. Жидкостная цитология в сочетании с иммуноцитохимическим определением pl6ink4a у женщин с ВПЧ достаточна для установления степени тяжести диспластических изменений шейки матки, а установление диагноза не требует гистологического подтверждения. Ключевые слова: жидкостная цитология, иммуногистохимия, шейка матки плоский эпителий, дисплазия. В литературе последних лет широко обсуждаются диагностические методы определения диспластических состояний шейки матки у женщин, инфицированных ВПЧ. Внедрение новых технологических приемов с использованием цитохимических и гистохимических маркеров, позволяют не только достоверно трактовать диагноз, но и прогнозировать течение патологического процесса. В тоже время, для молодых, нерожавших женщин достаточно актуальным остается вопрос неинвазивных методик диагностики диспластических состояний шейки матки. Наряду со ставшими традиционными методами, такими, как расширенная кольпоскопия или цитологические методы, стали широко обсуждаться молекулярно-генетические, Digene-TecT, TruScreen, иммуноцитохимические и иммуногистохимические исследования маркеров р 16, Ki67. Отметим, что РАР-тест в настоящее время, несмотря на его широкое применение многими клиницистами, уже не рассматривается как достаточно информативный для диагностики диспластических изменений шейки матки. «Сухая» цитология по данным различных источников информативна не более, чем в 60% случаев, что крайне недостаточно для женщин групп высокого риска по развитию рака шейки матки. Цель исследования: сравнительный анализ гистологического исследования биоптатов с данными жидкостной цитологии у женщин с патологией шейки матки, ассоциированной с ВПЧ. Задачи исследования: - провести медико-социальный анализ молодых женщин с воспалительной болезнью шейки матки (код МКБ N72) с наличием ВПЧ и без ВПЧ; - соотнести показатели вирусно-бактериологического и цитологического исследования с кольпоскопической картиной патологии шейки матки, выделив при этом группы женщин с интраэпителиальной неоплазией шейки матки различной степени; - сопоставить иммуногистохимическое исследование pl6ink4a в полученных гистологических препаратах с данными иммуноцитохимического исследования; -оценить прогноз течения диспластических процессов шейки матки у молодых женщин, основываясь на результаты гистологических и цитологических исследований. Материалы и методы. Нами было обследовано 70 женщин с воспалительной болезнью шейки матки (шифр МКБ-10 N72), ассоциированной с ВПЧ (основная группа), и 48 пациенток с воспалительной болезнью шейки матки без ВПЧ (группа сравнения). Критериями включения в группы являлись: наличие предварительного диагноза воспалительной болезни шейки матки, наличие ВПЧ высокого онкологического риска (или его отсутствие), отсутствие изменений шейки матки как следствия процесса родов или диагностических манипуляций, возраст обследуемых до 27 лет. Критериями исключения из группы служили: возраст женщин старше 27 лет, послеродовые изменения шейки матки, травматические повреждения шейки матки в процессе проведения диагностических или лечебных процедур, специфические инфекции и инфекции, передающиеся половым путем. При проведении гистологического исследования мы пользовались стандартными протоколами, предусмотренными для описания изменений тканей шейки матки и морфологической классификацией M.N. Schiffman (1995), которая соответствует цитологической классификационной системе Bethesda (2001). Для иммуногистохимического определения антигена р16INK4a использовались концентраты № ФСЗ 2010/08079, 2010-11-03 от «Микротесты в биологии, медицине и ветеринарии ООО (Россия)» производитель Cell Marque Corporation (США). Микроскопия полученных препаратов осуществлялась при помощи светового микроскопа Leica при увеличении в 200 и 400 раз. Морфометрия оцифрованных изображений препаратов производилась при помощи программы ToupView 3.2 на персональном компьютере. Измерения проводились в 50 полях зрения в каждом препарате, согласно методическим рекомендациям Г.Г. Автандилова (1990). Изготовление и окрашивание иммуноцитохимических препаратов осуществлялось автоматизировано в процессоре ThinPrep ® 5000 (TP 5000). Анализ препарата осуществлялся ручным способом. Определение pl6ink4a осуществлялось с применением тест-системы и анализатора CINtec PLUS (Roche, Швейцария). Результаты считались положительными при получении окрашенных клеток. Подсчет и характер окрашивания клеток оценивались визуально. Полученные препараты фотографировались в 30 полях зрения (окуляр 10Х/0,25; объектив 10Х/0,65) и сохранялись в файлах *JPG, затем полученные цифровые изображения обрабатывались с помощью компьютерной программы Tool 3.0 (USA). Статистическая обработка полученных результатов проводилась на персональном компьютере «PC IBM Pentium IV». В процессе работы использовался стандартный статистический программный пакет Statistica for Windows версия 10 (англ.), а также Microsoft Exel 2003. Достоверность различий между показателями оценивалась с использованием t-критерия Стьюдента. Расчет индекса информативности проводили по формуле парного коэффициента Браве - Пирсона. Оценка величины информативности: r=0,99-0,95 (отличная); r=0,94-0,90 (хорошая); r=0,89-0,80 (удовлетворительная), r=0,79-0,70 (сомнительная); r<0,69 (плохая). В основой группе женщин было достоверно выше число CIN I степени - 14(14,3%), имелись отсутствующие в группе сравнения женщины с койлоцитозом (как одним из проявлений ВПЧ) - 18(25,7%), а также достоверно меньше было число женщин с гистологическими признаками хронического воспаления - 26(37,1%). В группе сравнения 3(6,3%), ноль и 44(91,7%), соответственно. Отметим, что, несмотря на большую в абсолютных значениях частоту дисплазии средней степени в основной группе, - статистически достоверных данных по этому значению получено не было. Так, в основной группе частота CIN II составила 10(14,3%), в группе сравнения 1(2,1%). Что касается CIN III, то в основной группе таких пациенток было 2(2,9%). В группе сравнения таких женщин выявлено не было. На рис. 1 представлена типичная картина койлоцитоза, для которого характерны изменения формы ядер, гиперхроматоз ядер, наличие в клетках вакуолей и патологические митозы. Отметим, что эти изменения регистрируются в поверхностных слоях эпителия и типичны для ВПЧ. На рис. 2—4 представлены результаты собственных наблюдений содержания pl6ink4a, иммуноцитохимическим и иммуногистохимическим способом в сопоставлении с гистологической и кольпоскопической картиной пациентки М. 1992 г.р. Далее нами было проведено сопоставление полученных результатов жидкостной цитологии и гистологических заключений женщин обследуемых групп с основой определения pl6ink4a. При сопоставлении гистологических и цитологических результатов в основной группе наибольшие расхождения получены у тех женщин, у которых в цитологическом заключении фигурировали ASC-US и LSIL. Индивидуальное исследование цитологических и гистологических препаратов позволило установить, что у тех женщин, у которых гистологически была установлена СЕМ II и III, полученные результаты полностью совпадали с показателями жидкостной цитологии как в плане оценки результатов окрашивания по Папаниколау, так и в плане содержания pl6ink4a. Вместе с тем, наибольшие расхождения в результатах были отмечены у женщин с CIN I. В этой группе гистологически CIN I регистрировался только у 14(11,3%) пациенток, в то время, как цитологические изменения фиксировались в 42(33,9%) случаях. В тоже время, присутствие белка pl6ink4a в окрашенных цитологических препаратах практически совпадало с данными гистологического заключения. Заключение. Таким образом, результаты сопоставления гистологических (как наиболее информативных на данный момент времени) результатов и жидкостной цитологии позволяют сделать вывод, что на ранних этапах клеточного повреждения ВПЧ большую информацию о состоянии эпителия шейки матки дает определение pl6ink4a, индекс информативности которого в плане диагностики дисплазий составляет r=0,96.

Авторы:

Издание: Вестник медицинского института Реавиз
Год издания: 2018
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2018.-N 2.-С.71-76. Библ. 20 назв.
Просмотров: 1763