МОНИТОРИНГ АРБОВИРУСОВ НА ТЕРРИТОРИИ ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Аннотация:

Представлены результаты мониторинговых исследований на территории Дальневосточного Региона РФ в отношении ряда природно-очаговых вирусов, в том числе Западного Нила, Батаи, Комплекса калифорнийской серогруппы, а также завозных случаев арбовирусных заболеваний. Полученные данные указывают на активную циркуляцию арбовирусов в природных очагах и синантропных биоценозах на территории некоторых субъектов Дальнего Востока РФ и вероятность заноса возбудителей посредством транспортных и туристических связей. Ключевые слова: арбовирусы, природно-очаговые инфекции, специфическая диагностика, антитела, завозные случаи. Арбовирусные инфекции - это инфекции с природной очаговостью, которые в естественных условиях передаются, главным образом, через укус кровососущих членистоногих. Большинство арбовирусных инфекций являются зоонозами. Циркуляция возбудителей осуществляется среди диких и сельскохозяйственных животных, а также среди птиц, зимующих в странах субтропического-тропического и субэкваториально-экваториального климата. Пути миграции перелетных птиц, проходящие на территории Дальнего Востока РФ, определяют возможность заноса арбовирусов с мест зимовок с дальнейшим формированием сезонных или стойких природных очагов . Переносимые комарами вирусы, бактерии и простейшие, вызывают эпидемии и эпизоотии с большими экономическими потерями . По оценкам ВОЗ экспансия флавивирусов Западного Нила и Денге в неэндемичные районы, вспышки, вызванные вирусом Чикунгунья, наряду с туляремией и малярией приводят к 1 млрд клинически подтверждённых заболеваний и 1 млн смертельных случаев ежегодно. Актуальность изучения эпидемиологии арбовирусных инфекций обусловлена их повсеместной распространенностью, массовостью эпидемических вспышек, трудностью этиологической расшифровки из-за большого антигенного разнообразия возбудителей, недостаточностью специфических средств лечения и профилактики. Ежегодный мониторинг за циркуляцией арбовирусов обусловлен наличием в России природных очагов вирусных энцефалитов. Кроме того, в последнее время в связи с развитием массового туризма, интенсификацией миграционных процессов, деловых и торговых связей возникла проблема завозных зоонозных вирусных инфекций из тропических и субтропических стран мира в неэндемичные регионы. Целью наших исследований явилось изучение циркуляции природно-очаговых и завозных случаев арбовирусных инфекций на территории Дальнего Востока. Материалы и методы.Мониторинг за природными очагами включал обследование на маркеры арбовирусов потенциальных переносчиков, источников инфекции, ретроспективное исследование крови больных с не-уточненным диагнозом, поступивших в инфекционные стационары в период наибольшей активности переносчиков - с июля по сентябрь. На инфицированность вирусами Западного Нила (ЗН), Калифорнийской серогруппы (КСГ), энцефалита Батаи и других арбовирусов обследовались дикие перелетные и синантропные птицы, комары, крупный рогатый скот, лошади. Сбор проб проводился выездными формированиями станции и охотоведческими структурами в различные временные периоды. Диапазон лабораторных исследований включал серологические, вирусологические и генодиагностические тесты. Детекцию РНК ЗН и вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) проводили методом ОТ-ПЦР с использованием тест-систем «АмплиСенс ТВЕ-FL» и «АмплиСенс WNV-FL» производства ЦНИИ эпидемиологии (г. Москва). Для детекции РНК флавивирусов использовали ОТ-ПЦР с праймерами, соответствующими фрагменту гена NS5 флавивирусов .Специфичность продуктов ОТ-ПЦР подтверждали определением нуклеотидных последовательностей с использованием автоматического анализатора ДНК модели ABI 3500 («Applied Biosystems») и последующего филогенетического анализа. Для изоляции штаммов использовали пермиссивную культуру клеток Vero-Еб и заражение новорожденных белых мышей (НБМ). Лабораторному тестированию подвергнуты 398 птиц, 62750 экземпляров (251 пул по 250 экз.) комаров, 344 лошади и 497 голов крупного рогатого скота (КРС). В течение 7 лет нами осуществлялся этиологический мониторинг завозных случаев арбови-русных заболеваний. Обследованы 286 больных, посетивших страны Юго-Восточной Азии. Подавляющее большинство из них отдыхали в Таиланде. Основными симптомами заболевания являлись лихорадка, сыпь, суставные боли. Для постановки лабораторного диагноза на первой неделе от начала заболевания с 2011 года применяли ПЦР тестирование с применением наборов праймеров, специфичных к вирусам Денге 1 - 4 серотипов , а впоследствии использовали набор реагентов «АмплиСенс» на присутствие РНК вирусов Денге (1-4) и иммунохроматографический тест («Dengue NS1 Ад», Standard Diagnostics) на наличие NS1 антигена вируса Денге. Серологический статус больных определялся с помощью ИФА-тест-систем на выявление IgM и IgG к вирусам Западного Нила, Денге, Чикунгунья, Крымская-Конго геморрагическая лихорадка. При наличии IgG к вирусу Денге в целях исключения перекрестных реакций иммунитета с другими представителями флавивирусов осуществлялась постановка РН с вирусами Западного Нила (liit.FCG) и клещевого энцефалита (шт. Софьин). При отрицательных результатах на природно-очаговые заболевания и геморрагические лихорадки и наличии парных проб крови осуществляли постановку РТГА с диагностикумами вирусов гриппа и парагриппа. Возможное участие в инфекционной патологии вирусов лихорадки Западного Нила, Батаи и ККЭ изучалось ретроспективным обследованием доноров и больных людей, госпитализированных в инфекционные стационары в период максимальной активности комаров. Сыворотки 179 здоровых людей и 234 пациентов с лабораторно не расшифрованными диагнозами (ЛНГ, энцефалит, менингит, ОРВИ, клещевые инфекции) были тестированы в реакции нейтрализации (РН) с вирусами ЗН (шт. FCG), Батаи (шт. 9024) и КСГ (шт. Заяц-Беляк). Результаты и обсуждение. В таблице 1 представлены данные мониторинговых исследований по изучению иммунной прослойки у перелетных птиц и сельскохозяйственных животных за 2011 - 2017 гг. на территории Хабаровского края и Еврейской автономной области в отношении ряда природно-очаговых инфекций, в том числе: Западного Нила, энцефалита Батаи, вирусов КСГ.У диких водоплавающих птиц (чайки, утки) показатель серопозитивности к ВЗН составил 1,3%, к вирусам КСГ - 0,8% , к вирусу Батаи - 1,3%. Анализ изучения иммуноструктуры сельскохозяйственных животных - прокормителей членистоногих показал наличие специфических антител как к вирусам КСГ (15,8%), так и к вирусу Батаи (16,6%). При более детальном анализе можно отметить существенные различия в чувствительности к этим двум возбудителям у различных видов сельскохозяйственных животных. У лошадей уровень серопозитивности к вирусам группы ККЭ составила 27,3%, а у КРС - 7,8%; к вирусу Батаи наоборот - частота обнаружения специфических антител выше у КРС - 20,3%, чем у лошадей - 2,0%. Уровни антител определялись в диапазоне от 1:10 до 1:160. Результаты наших исследований согласуются с данными ряда авторов о высокой чувствительности лошадей к вирусам КСГ [10]. В 2013 году в пробах крови 2 больных и 8 здоровых людей обнаружены специфические нейтрализующие антитела к вирусам КСГ. Нейтрализующие антитела к возбудителю ЛЗН обнаружены у трех водоплавающих птиц в 2012 и 2015 гг. в титрах 1 : 20 - 1 : 80. В результате молекулярно-генетического мониторинга за циркуляцией вируса Западного Нила среди перелетных птиц в 6 из 397 проб головного мозга детектирована РНК вируса Западного Нила. Показатель инфи-цированности составил 1,5%. Кроме того, в пробах крови 2-х больных и 8 здоровых людей ретроспективно были выявлены специфические антитела к вирусу КСГ. Исследованиями по изучению циркуляции арбовирусов в популяциях кровососущих членистоногих за семилетний период были охвачены Хабаровский край, Сахалинская и Еврейская автономная области. Видовой состав не определялся (табл. 2). Антиген вирусов КСГ выявлен методом ИФА (тест-системы ЗАО «Биосервис») в двух пулах комаров, отловленных в южных районах Хабаровского края. В 2013 году из 28 пулов комаров, добытых в Смидовичском районе ЕАО, в 4 пробах обнаружен генетический материал флавивирусов (не идентифицированных), а в 2016 г. - РНК вируса клещевого энцефалита. Детекция РНК вируса Западного Нила не дала положительных результатов. На перевиваемых клеточных линиях и мышах сосунках из 10%-ных суспензий комаров удалось получить 23 изолята. Один из них типирован как ВКЭ, два других, по результатам РН с ИАЖ к различным арбовирусам, были определены как вирусы Гета (сем. Togaviridae), остальные 9 - как вирусы КСГ. В 2013 из ПЦР позитивных проб на наличие РНК флавивирусов удалось выделить 2 биологических агента, патогенных для новорожденных белых мышей. Филогенетический анализ нуклеотид-ных последовательностей фрагмента гена NS5 определил их как флавивирус Chaoyang, ранее выявленный в Китае и Корее.. При последующих пассажах штаммы теряли свою патогенность. Из числа штаммов, полученных в течение семилетнего периода наблюдения, не удалось идентифицировать 9 изолятов. Возрастающая торгово-экономическая и туристическая активность ДФО с зарубежными странами обозначила актуальность проблемы завозных арбовирусных заболеваний. В анализируемом периоде обследовано 286 пациентов - жителей Хабаровского и Приморского краев, а также Сахалинской, Амурской, Магаданской областей и Еврейской АО. Для подавляющего большинства обследованных лиц страной посещения были Таиланд или Вьетнам (табл. 3). Диагноз «Лихорадка Денге» подтвержден у 136 заболевших, в т.ч. выделением вирусов Денге 1-3 серотипов на клеточной культуре Vero Е6 и мышах сосунках у 20 обследованных (Хабаровский край, Амурская область, Приморский край).В декабре 2015 года впервые на Дальнем Востоке зарегистрирован летальный случай лихорадки Денге, связанный с поездкой в Таиланд. У больного, жителя г. Комсомольска-на-Амуре Хабаровского края, наблюдалась тяжелая форма лихорадки Денге с синдромом шока.. Этиологический диагноз был установлен на основе наличия IgM в титре 1:3200, антигена NS1 в пробах крови, сыворотки, суспензии селезенки, детекции РНК вируса Денге 2 генотипа в крови. У двух жителей Приморского края серологическими методами выявлена J13H, а еще один пациент оказался инфицирован вирусом лихорадки Чикунгунья (ЛЧ). Диагноз «Флавивирусная инфекция» был подтвержден у 2-х хабаровчан и 2-х жителей Приморского края. Во всех лабораторно подтвержденных случаях ЛД, ЛЗН и ЛЧ этиологический диагноз был установлен по наличию 2-3 положительных тестов. На протяжении периода наблюдения были подтверждены 2 случая малярии у жителей г. Хабаровска: один в течение трех месяцев находился в рабочей командировке в Южной Америке, второй - посетил остров Гоа (Индия). Основанием для постановки этиологического диагноза явилось наличие в крови пациентов антигена и специфических антител к PI. falciparum и PI. ovalae. С сентября 2016 года в связи со вспышкой заболеваемости лихорадки Зика в странах Южной Америки и Карибского бассейна нами параллельно проводились ПЦР исследования на наличие РНК вируса Зика. Положительных находок не обнаружено. У 4 пациентов альтернативным диагнозом, подтвержденным положительной сероконверсией, оказался грипп A(H3N2) и A(H1N1)pdm. Еще у одного больного был документирован четырехкратный прирост антител к вирусу парагриппа 3 типа. Заключение. Таким образом, данные экологического мониторинга за арбовирусными заболеваниями дают основание полагать, что на территории Дальнего Востока функционируют природные очаги клещевого энцефалита, энцефалита Батаи, вирусов Гета и Калифорнийской серогруппы, передаваемые кровососущими членистоногими. Подтверждена существенная роль в циркуляции арбовирусов лошадей, крупного рогатого скота, перелетных и синантропных птиц. Необходимость проведения мониторинга за арбовирусами определяется реальной опасностью заносов возбудителя этого заболевания перелетными птицами и формирования очагов инфекции на территории ДФО Российской Федерации. Высока также вероятность заноса возбудителей посредством транспортных и туристических связей. Необходимо дальнейшее наблюдение за распространением арбовирусных инфекций на территории Дальневосточного округа, а также усиление эпидемиологической настороженности практических врачей ЛПУ и их нацеленность на более широкое, с учетом эпиданамнеза, лабораторное обследование лихорадящих больных на маркеры арбовирусных инфекций. Дальнейшие исследования по идентификации и выявлению новых штаммов арбовирусов позволят дать более полную характеристику природных очагов в Дальневосточном Регионе РФ.

Авторы:

Издание: Дальневосточный журнал инфекционной патологии
Год издания: 2018
Объем: 3с.
Дополнительная информация: 2018.-N 34.-С.33-35. Библ. 13 назв.
Просмотров: 43