ЭФФЕКТИВНОСТЬ МИЕЛОПИДА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ КРИТИЧЕСКОЙ ИШЕМИИ КОНЕЧНОСТЕЙ

Аннотация:

Изучены ангиопротекторные свойства миелопида на модели критической ишемии конечности у крыс-самцов линии Вистар. В качестве препарата сравнения применяли актовегин. Установлено, что миелопид в дозе 50 мкг/кг внутримышечно через 3 ч после операции, затем через 1, 2, 3 сут увеличивает плотность капиллярной сети в среднем на 31,7% (р<0,05), уменьшает артерио-венулярное шунтирование на 1,5% (р>0,05), оказывает позитивное влияние на микроциркуляцию и регенераторный процесс в ишемизированных тканях. Ключевые слова: критическая ишемия; конечности; лечение; миелопид; актовегин; крысы. ВВЕДЕНИЕ: Окклюзионно-стенотическими поражениями артерий страдает 10% взрослого населения промышленно развитых стран. Ожидается увеличение числа больных в связи с глобальным распространением ожирения, курения табака, гипертонической болезни, сахарного диабета. У каждого пятого больного развивается критическая ишемия с угрозой потери конечности, требующая интенсивной консервативной терапии и хирургического лечения. Базовыми средствами для лечения критической ишемии конечностей являются: антиагреганты (ацетилсалициловая кислота, клопидогрел); ангиопротекторы (пентоксифиллин); вазодилататоры (алпростадил, нафтидрофурилцилостазол); антигипоксанты и тканевые репаранты (актовегин, солкосерил), эндотелиопротекторы (сулодексид). Анализ литературных данных показывает, что до настоящего времени не существует препарата, действующего на все звенья патогенеза заболевания. Инновационным направлением в ангиологии сосудистой хирургии является стимуляция неоваскулогенеза в ишемизированных тканях. Для этого используются как генные, так и клеточные технологии и стволовые клетки костного мозга. Введение стимулятора неоангиогенеза (генного препарата сосудисто-эндотелиального фактора роста VEGF-165) вызывает достоверное увеличение размеров капиллярной сети, гемореологических показателей и микроциркуляции у больных хронической ишемией нижних конечностей. К сожалению, высокая стоимость отечественного фармакологического препарата "Неоваскулген" препятствует широкому применению генноинженерных стимуляторов в клинической практике. Интенсивное изучение клеточных механизмов ангиогенеза и выделение клеток-предшественников сосудистого эндотелия и ангиобластов позволили сначала в экспериментальных, а затем в клинических условиях для лечения ишемии тканей широко применять стволовые клетки, содержащиеся в мононуклеарной фракции костного мозга. Однако выделение стволовых клеток из костного мозга является слишком затратным с экономической точки зрения. В то же время имеются фармакологические препараты из клеток костного мозга, которые в основном применяются как иммуностимуляторы при вторичных иммунодефицитных состояниях, а действие их на ишемизированные ткани не изучено. Одним из таких препаратов является миелопид — экстракт из костного мозга телят, который применяется при иммунодефицитных состояниях после хирургических операций, механических, термических и химических травмах. Критическую ишемию конечностей можно рассматривать как ишемическое повреждение тканей конечностей вследствие недостаточного поступления артериальной крови. Поэтому можно ожидать позитивного влияния препарата на течение критической ишемии конечностей. Цель работы — изучение ангиопротекторных свойств миелопида при лечении экспериментальной критической ишемии конечностей. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: Опыты проводили на 100 белых крысах-самцах линии Wistar массой 300 - 350 г без внешних признаков заболевания, находящихся в виварии Курского государственного медицинского университета в одинако параметр был статистически значимо ниже на всех сроках наблюдения в сравнении с интактной: на 10 сут на 36,7%, на 21 сут — на 24,4%, на 28 сут — на 14,4%. Из табл. 1 видно, что плотность капилляров в ишемизированной конечности во всех исследуемых группах увеличивалась, по сравнению с контрольной: при применении миелопида — на 10 и 21 сут — в 1,4 раза и на 28 сут — в 1,6 раза; при применении актовегина соответственно по срокам в 1,11, в 1,16 и 1,1 раза. По влиянию на плотность капиллярной сети ишемизированной конечности миелопид на всех сроках эксперимента превосходил актовегин. Динамика уровня артериовенулярного шунтирования представлена в табл. 2. У интактных животных уровень артериовенулярного шунтирования колеблется в пределах (28,8±1,2)%. Из табл. 2 видно, что уровень артериовенулярного шунтирования в ишемизированной конечности в группе животных, получавших миелопид, на 10 сут был меньше на 9,2%, на 21 сут — на 14,5%, на 28 сут — на 12,2% в сравнении с контрольной группой (р<0,05). После применения актовегина уровень артериовенулярного шунтирования на 10 сут был меньше на 14%, на 21 сут — на 6,4% и на 28 сут — на 12,6% в сравнении с контрольной группой. Достоверных различий по влиянию на уровень артериовенозного шунтирования между миелопидом и актовегином не выявлено. Для определения нормальных показателей перфузии тканей у интактных животных оценили уровень микроциркуляции в мышцах голени задней конечности методом ЛДФ. Полученное среднее значение уровня микроциркуляции было принято за "норму" и составило (535,22+17,53) перфузионных единиц (п.е.). Ошибка этого среднего значения (37,1) не превышает 10% от абсолютного значения, что свидетельствует о достаточном количестве единиц наблюдения в группе. Результаты оценки уровня микроциркуляции у интактных крыс, в контрольной, опытных группах и группе сравнения с моделированием ишемии задней конечности представлены в табл. 3. В опытной группе у животных, получавших миелопид, уровень микроциркуляции, по сравнению с контрольной группой, на 10 сут возрастал на 48,3%, на 21 сут — на 50,6%, на 28 сут — на 105,9%. В группе сравнения у крыс, получавших актовегин, уровень микроциркуляции в мышце по сравнению с животными контрольной группы был выше на 10 сут — на 19%; на 21 сут — на 28%; на 28 сут — на 45%. Уровень микроциркуляции в бедренной мышце у животных, получавших миелопид был достоверно выше, чем у животных, получавших актовегин, на 29,6 %. Удельная площадь некроза в мышечных волокнах на различных сроках эксперимента представлена в табл. 4. У крыс, получавших миелопид, площадь некроза мышечных волокон уменьшилась, по сравнению с контрольной группой, на 10 сут на 21,5%, на 21 сут — на 11,5% и на 28 сут — на 9,1%. Площадь некроза мышц в ишемизированной конечности у животных на фоне применения актовегина уменьшилась, по сравнению с контрольной группой, на 10 сут на 8,3%, на 21 сут — на 0,7% и на 28 сут — на 4,1%. На всех сроках эксперимента в динамике морфологических изменений в ишемизированных конечностях в группе животных, получавших миелопид, удельная площадь некроза была достоверно ниже, чем в группе сравнения в среднем на 5%, р<0,05. Гистологическая картина ишемизированных мышц на 10 сут представлена на рис. 1. В контрольной группе животных в пораженных мышцах обнаруживались крупные участки некроза, на периферии которых и в их глубине имелась картина тяжелого воспаления в виде выраженной инфильтрации сегментоядерными нейтрофилами и макрофагами (рис. 1, а). В опытной группе после введения миелопида небольшие очаги некроза были инфильтрированы нейтрофилами, макрофагами и гистиоцитами. Определялось неравномерное кровенаполнение микроциркуляторного русла, умеренный отек интерстиция. Появлялись очаги новообразованной грануляционной ткани, представленной сосудами капиллярного типа, фибробластами и немногочисленными регенерирующими миобластами (рис. 1, б). В группе сравнения на фоне актовегина определялись большие очаги некроза отдельных мышечных волокон, с воспалительной инфильтрацией по периферии и инфильтративным отеком стромы. Имелись новообразованные сосуды капиллярного типа, недифференцированные клетки соединительной ткани (рис. 1, в). Гистологическая картина ишемизированных мышц на 21 сут эксперимента представлена на рис. 2. У крыс контрольной группы в ткани бедренной мышцы вокруг зоны некроза отмечено интенсивное образование грануляционной ткани, на 21 сут сохранялась выраженная воспалительная реакция (рис. 2, а). В мышечной ткани крыс опытной группы выявляли небольшие очаги некрозов с разрастанием фиброзно-грануляционной ткани и формирование капиллярной сети. Воспалительная реакция с инфильтрацией ткани макрофагами и гистиоцитами была выражена незначительно. Появлялись обширные скопления регенерирующих миобластов. На отдельных участках сохранялись дистрофические и атрофические изменения мышечных волокон (рис. 2, б). В группе сравнения выявлены небольшие очаги заместительного некроза с элементами регенерации отдельных мышечных волокон и началом образования капиллярной сети (рис. 2, в). Гистологическая картина на 28 сут эксперимента представлена на рис. 3. В контрольной группе зона некротизированной ткани на 28 сут стала постепенно замещаться грануляционной тканью, наблюдалось большое количество регенерирующих миобластов (рис. 3, а). В опытной группе зона некроза замещалась рыхло-волокнистой соединительной тканью. Воспалительная инфильтрация отсутствовала. В окружающих непораженных мышцах отмечалась пролиферация капилляров, не связанных с грануляционной тканью. Дистрофические и атрофические изменения мышечных волокон отсутствовали, завершался процесс регенерации мышечной ткани (рис. 3, б). В группе сравнения заканчивался процесс замещения участков некроза соединительной тканью, между которыми имелись немногочисленные новообразованные капилляры (рис. 3, в). В отличие от миелопида антигипоксанты (актовегин) меньше влияют на новообразование капилляров в ишемизированных мышцах. Восстановление микроциркуляции под влиянием миелопида достигается в меньшей мере за счет стимуляции неоангиогенеза, а в большей — за счет активации коллатерального кровотока в ишемизированной конечности, что увеличивает артериальный приток крови из проксимальных отделов конечности в дистальные, а актовегин непосредственно улучшает метаболизм и микроциркуляцию в ишемизированных тканях. Результаты проведенного нами исследования свидетельствуют о положительном эффекте применения миелопида при критической ишемии конечностей в отношении ангиогенеза и воспаления в тканях. Механизмом действия данного препарата является стимуляция неоангиогенеза в ишемизированных мышцах, которая приводит к регенерации мышечной ткани и уменьшает площадь ее некроза. В связи с этим целесообразно рекомендовать изучение свойств миелопида в клинике для дальнейшего возможного включения этого препарата в схему консервативного лечения больных с критической ишемией нижних конечностей на почве хронических облитерирующих заболеваний артерий. ВЫВОДЫ: 1. Миелопид в дозе 50 мкг/кг, введенный в мышцы правого бедра в виде водного раствора в объеме 0,1 мл через 3 ч после моделирования экспериментальной критической ишемии конечностей, затем через 1, 2, 3 сут, способствует стимуляции неоангиогенеза, увеличивает плотность капиллярной сетина 10 сут на 28% (р<0,05), на 21 сут — на 28% (р <0,05); на 28 сут — на 38% (р<0,05); уменьшает артериовенулярное шунтирование на 10 сут на 16% (р<0,05), на 21 сут — на 36% (р<0,05), на 28 сут — на 31% (р<0,05); оказывает позитивное влияние на микроциркуляцию и регенераторный процесс в ишемизированных тканях бедренной мышцы крысы на модели экспериментальной ишемии конечности по сравнению с нелеченым контролем. 2. Миелопид в дозе 50 мкг/кг, введенный в мышцы правого бедра в виде водного раствора в объеме 0,1 мл через 3 ч после моделирования экспериментальной критической ишемии конечностей, затем через 1, 2, 3 сут, по сравнению с актовегином, введенным в мышцы правого бедра в дозе 50 мкг/кг в виде водного раствора в объеме 0,1 мл через 3 ч после операции, затем ежедневно в течение 5 сут, увеличивает плотность капиллярной сети на 10 сут на 20% (р<0,05), на 21 сут - на 16% (р<0,05), на 28 сут — на 31% (р<0,05); уменьшает артериовенулярное шунтирование в среднем на 1,5% (р>0,05); увеличивает уровень микроциркуляции на 10 сут на 19% (р<0,05), на 21 сут — на 15% (р<0,05), на 28 сут — на 29% (р<0,05).

Авторы:

Издание: Экспериментальная и клиническая фармакология
Год издания: 2018
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2018.-N 6.-С.3-8. Библ. 8 назв.
Просмотров: 48