Дальневосточный государственный медицинский университет Поиск | Личный кабинет | Авторизация
Поиск статьи по названию
Поиск книги по названию
Каталог рубрик
в коллекциюДобавить в коллекцию

Стуктурно-функциональные изменения нейронов неокортекса белых крыс после 20-минутной окклюзии общих сонных артерий


Аннотация:

Цель исследования — изучение структурно-функциональных изменений нейронов сенсомоторной коры головного мозга белых крыс в норме и после 20-минутной окклюзии общих сонных артерий. Методика. С помощью световой (окраска гематоксилином и эозином, по Нисслю), флуоресцентной (окраска DAPI), иммунофлуоресцентной (нейрон-специфическая енолаза — NSE) и электронной микроскопии была изучена нейроцитоархитектоника сенсомоторной коры (СМК) головного мозга белых крыс в норме (п=5) и в динамике — 1, 3, 7, 14, 21 и 30 сут.; после 20-минутной окклюзии общих сонных артерий (п=30). Согласно рекомендациям Nomenclature Committee on Cell Death (2009), проведено детальное описание и сравнение всех морфотипов измененных пирамидных нейронов СМК мозга белых крыс после острой ишемии. Морфометрический анализ проведен с помощью программы ImageJ 1.46. Результаты. Использование комплекса морфологических методов позволило классифицировать нейроны на основании четких структурных маркеров и доказать возможность апоптоза гиперхромных нейронов СМК после воспроизведения ишемии. Показано, что через 3 сут. в слое III 6—12% гиперхромных нейронов подвергалось апоптозу, 13,4—24,6% — коагуляционному некрозу, а остальные выходили из патологического состояния в отдаленном восстановительном периоде. Необратимо измененные клетки-тени составляли 11,5% (95% ДИ: 7,4—16,8%). Общая численная плотность пирамидных нейронов в течение 30 сут. постишемического периода в слое III СМК снижалась на 30,5% (95% ДИ: 24,2—38,7%), а в слое V — на 14,4% (95% ДИ: 9,9—20,0%). Заключение. Показана смешанная природа гибели нейронов — одновременное сочетание процессов некроза и апоптоза (парапоптоз). Однако основную роль в гибели нейронов играли процессы быстрого и отдаленного ишемического некроза. Ключевые слова: острая ишемия; белая крыса; неокортекс; нейроны; световая, флуоресцентная, электронная микроскопия; морфометрия; некроз; апоптоз. Введение. Необратимые изменения нейронных сетей коры головного мозга (КГМ) после острой ишемии являются причиной многих неврологических нарушений, которые по своему медико-социальному значению остаются одной из актуальных проблем современной медицины. Особое значение при этом уделяется заболеваниям, связанным с повреждением магистральных артерий головного мозга. В связи с этим представляет интерес изучение структурно-функционального состояния нейронов КГМ после острой дозированной по времени ишемии, вызванной окклюзией общих сонных артерий в эксперименте. Имеются исследования, в которых изучалось структурно-функциональное состояние нервных структур КГМ на различных экспериментальных моделях локальной, тотальной транзиентной, полной и неполной ишемии головного мозга, а также у человека на аутопсийном и биопсийном материале. В этих работах охарактеризованы основные реакции нейронов на ишемию и реперфузию. Гибель нейронов происходит путем некроза (острого, отсроченного, отдалённого) и апоптоза, а также сочетания обоих процессов — парапоптоза. Есть работы, посвященные изучению коры головного мозга белых крыс после окклюзии общих сонных артерий. Однако структурные механизмы реорганизации нервной ткани неокортекса в период реперфузии во многом остаются неясными. Особое значение для понимания механизмов повреждения и структурно-функционального восстановления высших отделов головного мозга млекопитающих при ишемии и реперфузии имеет изучение ультраструктуры различных поврежденных нейронов, так как это позволяет понять механизм гибели конкретной клетки (некроз или апоптоз). Флуоресцентные (окраска DAPI), иммунофлуоресцентные (NSE) методы дают дополнительную информацию о пространственном распределении ДНК в ядре и степени ее конденсации, используется для выявления различных этапов постишемической некротической и апоптозной трансформации ядра. Цель исследования — изучение с помощью световой, флуоресцентной (окраска DAPI), иммунофлуоресцентной (NSE) и электронной микроскопии морфофункционального состояния нейронов сенсомоторной коры головного мозга белых крыс в норме и в динамике после 20-минутной окклюзии общих сонных артерий. Методика. Исследования проводили в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных" (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.77 № 755) и с рекомендациями Международного комитета по науке о лабораторных животных, поддержанных ВОЗ, директивой Европейского Парламента № 2010/63/EU от 22.09.10 «О защите животных, используемых для научных целей» и одобрена этическим комитетом ГБОУ ВПО Омского государственного медицинского университета. Эксперименты выполнены на самцах белых беспородных крыс массой 180—200 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария. Моделирование острой ишемии мозга проводили путем 20-минутной окклюзии общих сонных артерий (сосудистая модель неполной глобальной ишемии без гипотонии) на фоне премедикации (сульфат атропина 0,1 мг/кг, подкожно) и общей анестезии (Zoletil 100, 10 мг/кг). Материал для морфологического исследования нейронов брали через 1, 3, 7, 14, 21 и 30 сут. после окклюзии по 5 животных на каждый срок. Контролем служили интактные крысы (п=5). Головной мозг фиксировали путем перфузии смеси 1% раствора глютарового альдегида, 4% раствора параформа на 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,4) и 5% раствора сахарозы через восходящую часть дуги аорты под давлением 90—100 мм рт.ст. и путем погружения в аналогичный раствор. Затем часть материала заключали в парафин, готовили фронтальные срезы (5 мкм) на уровне сенсомоторной коры (СМК). Эти срезы окрашивали по Нисслю и DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole). Для иммуногистохимической окраски использовали антитела к нейронспецифической енолазе (NSE), визуализацию иммунной реакции осуществляли с помощью козьих поликлональных вторичных антител, ассоциированных с флюоресцентным красителем TexasRed® Sulfonyl Chloride. Применялась двухканальная флуоресценция для одновременного выявления в нейронах ядер (DAPI — различные оттенки синего) и цитоплазмы нейронов (NSE — красная). Цифровые изображения получали с помощью камеры AxioCam MRc и объектива ЕС Plan-Neofluar х40 (апертура 0.9). Применялись 2 фильтра производства Karl Zeiss: для Texas Red® и DAPI. С помощью программы AxioVision формировались двухслойные графические файлы. Нейроны легко верифицировались, их цитоплазма окрашена в красный цвет (NSE). Для ультраструктурного исследования выделяли СМК, рассекали на пирамидные блоки, контрастировали 1—2 ч в 1% незабуференном растворе четырех-окиси осмия, промывали, обезвоживали и заключали в смесь эпона и аралдита. Ультратонкие (70—100 нм) срезы готовили на ультрамикротоме LKB-8800 (Швеция), окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца, просматривали и фотографировали на микроскопе Hitachi-600H (Япония). На каждый срок фотографировали по 50 полей зрения при увеличении Х12 000. На оцифрованных электронограммах проводили качественную оценку ультраструктуры клеток. Статистический анализ осуществлялся с помощью программ MedCalc® и StatSoft Statistica 8.0. Проверку статистических гипотез проводили при помощи непараметрических критериев. В ходе проведения статистического анализа нулевая гипотеза отвергалась при р<0,05. Результаты и обсуждение: На рис. 1 показаны два поля зрения СМК головного мозга белой крысы в норме, окрашенные по Нисслю (а) и DAPI (б). При окраске по Нисслю можно было оценить общую численную плотность (ОЧП) перикарионов. Например, на рисунке 1, а, по данным морфометрического анализа, она составила 315/1 мм2. Глиальные клетки трудно различались среди других структур СМК, что затрудняло оценку их количества и размеров (рис. 1, а). Флуоресцентная окраска с помощью DAPI позволила надежно верифицировать нейроны (большие, круглые ядра темно-синего цвета с небольшим количеством конденсированного хроматина — яркое свечение) и астроциты (небольшие овальные, яркие светло-синие ядра) (рис. 2 и 3). Например, на рисунке 1, б ОЧП ядер нейронов составила 290, а глиальных клеток — 435 на 1 мм2. Таким образом, при использовании окраски по Нисслю и DAPI в одинаковых слоях СМК нами были получены близкие значения ОЧП нейронов. Однако окраска DAPI точно верифицировала ещё и ядра других клеток. По данным светооптического исследования, после острой ишемии в СМК выявлены: различные проявления гидропической дистрофии нервных клеток, очаговый и тотальный хроматолиз, эктопия ядер, гиперхроматоз, гомогенизация ядер и цитоплазмы, распад ядер и ядрышка, кариоцитолизис (клетки-тени), гиперхромные сморщенные клетки (пикноморфные) и нейронофагия. Превалировали гиперхромные ишемические изменения без сморщивания нейронов. Морфометрический анализ (для каждого срока оценивалось по 250 нейронов в произвольно взятых полях зрения) показал, что содержание наиболее типичных для острой ишемии гиперхромных нейронов (всех типов) статистически значимо изменялось в течение 30 сут. постишемического периода: в слое III (ANOVA, Н-критерий Краскела—Уоллиса =15,5, р=0,001) и слое V (14,7, р=0,002). На 3-й сут. после ишемии выявлено максимальное содержание гиперхромных нейронов в слое III — 62,5% (95% ДИ: 56,2—68,5%) и слое V — 58,5% (95% ДИ: 52,1—64,7%). В этот же срок отмечено максимальное содержание необратимо измененных клеток-теней — 11,5% (95% ДИ: 7,8—16,1%) и пикноморфных клеток — 18,5% (95% ДИ: 13,9—23,9%, слой III), 12,2% (95% ДИ: 8,4—16,9%, слой V). В сравнении с нормой (интактные животные) общая численная плотность пирамидных нейронов в течение 30 сут. постишемического периода в слое III СМК снижалась на 30,5% (95% ДИ: 24,9—36,6%), а в слое V — на 14,4% (95% ДИ: 10,3—19,4%). Таким образом, по данным светооптического исследования (окраска по Нисслю), после 20-минутной окклюзии общих сонных артерий установлены диффузно-очаговые реактивные и патологические изменения нейронов СМК. Однако только часть этих нейронов острого периода (1 и 3 сут.) в последующем подвергалась необратимой деструкции и элиминации. При двойной окраске DAPI и на NSE было установлено, что нормохромные пирамидные нейроны имели большие округлые ядра с незначительным количеством конденсированного хроматина на фоне равномерного синего свечения окружающего эухроматина. В цитоплазме нейронов четко верифицировались скопления NSE (красные гранулы), что отличало их от ярких ядер глиальных клеток (рис. 2, а). В постишемическом периоде в ядрах гиперхромных нейронов увеличивалось количество конденсированного хроматина (рис. 2, б, в). В цитоплазме несморщенных гиперхромных нейронов выявляли высокое содержание NSE, что, вероятно, свидетельствовало о компенсаторной активации данного фермента гликолиза при ишемии. После острой ишемии вокруг реактивно измененных темных пирамидных нейронов прогрессивно увеличивалось количество астроцитов, максимально через 7 и 14 сут. Ядра этих клеток были мельче, чем ядра нейронов, содержали существенно больше конденсированного хроматина, что объясняет их очень яркое свечение (рис. 2, б, в). Среди реактивно измененных темных нейронов отмечали клетки с признаками апоптоза (рис. 2, г, д, е), относительное содержание которых через 1 сут. было на уровне 4% (95% ДИ: 1,9—7,2%), а через 3 сут. достигало максимума — 9% (95% ДИ: 5,8—13,3%). Выявили статистически значимую динамику содержания апоптозных клеток (слой III: Н =12,2, р =0,01; слой V: Н =11,4, р =0,03). При окраске DAPI фрагментированные апоптозные ядра отчетливо выявлялись в виде типичных групп, близко расположенных плотных флуоресцирующих телец ДНК-содержащего материала, что позволяло их легко идентифицировать (рис. 2, д). Необходимо отметить длительное сохранение в постишемическом периоде реакции на NSE в цитоплазме нейронов с конденсированным ядерным хроматином (гиперхромные и апоптозные клетки) (рис. 2. е). Проведено сопоставление различных морфотипов нейронов, выявленных при световой, флуоресцентной и электронной микроскопии. Функциональное состояние нейронов в ходе электронно-микроскопического исследования оценивали на основании сравнительного анализа показателей: 1) количества и распределения гетеро- и эухроматина, РНП-частиц (транскрипционной активности); 2) структурной организации ядрышка (размеры, форма, плотность, состав); 3) состояния ядерных мембран (инвагинации, поры, перинуклеолярное пространство); 4) белоксинтезирующего аппарата цитоплазмы (гранулярная эндоплазматическая сеть — ГЭС); 5) энергетической системы (популяции митохондрий); 6) аппарата Гольджи и системы вакуолей. Перикарион нормохромных нейронов на ультраструктурном уровне представлен крупным округлым ядром, содержащим ядрышко и гомогенную кариоплазму, а также цитоплазмой с клеточными органеллами. Конденсированного хроматина в ядрах было мало, превалировал эухроматин (рис. 3, а). Ультраструктурная организация нормохромных нейронов была сопоставима с результатами световой и флуоресцентной микроскопии этих клеток (рис. 1, а, 2, а) В постишемическом периоде в СМК белых крыс были выявлены изменения ультраструктуры всех ее компонентов — нейронов, их отростков (аксонов, дендритов), синапсов, глиальных клеток, а также микрососудов. Характер реактивных, деструктивных и компенсаторно-восстановительных изменений нейронов прежде всего зависел от периода: острый постишемический (1,3 сут.), ранний восстановительный (7, 14 сут.) и поздний восстановительный период (21, 30 сут.). В остром постишемическом периоде (1, 3 сут.) прежде всего появлялись структурные изменения, связанные с дисфункцией водно-электролитного и белкового обмена, приводящие к развитию цитотоксического отека-набухания (рис. 3, б, в). В наибольшей степени повреждались отростки фибриллярных астроцитов вокруг микрососудов, протоплазматических астроцитов и других структур нейропиля (синаптические терминали, мелкие дендриты). Необратимый распад нейронов сочетался с деструкцией митохондрий и разрушением цитомембран (рис. 3, в). Такие изменения нейронов являлись выражением быстрого фокального или тотального ишемического колликвационного некроза (развитие кариоцитолизиса, клетки-тени). Другие нейроны СМК, напротив, превращались в гиперхромные с различной степенью конденсации хроматина (рис. 3, г). Именно эти клетки были наиболее многочисленными, неоднородными по структуре и длительно сохранялись в постишемическом периоде. Общим для них явилось наличие электронно-плотного ядра и цитоплазмы. По ультраструктурным признакам выделяли несколько состояний гиперхромных нейронов: 1 — сниженной активности, 2 — дегенеративных (необратимых) изменений с исходом в коагуляционный некроз (пикноморфные нейроны) (рис. 4, а, б, в) и 3 — с исходом в апоптоз (рис. 4, г, д), а также 4 — с повышенной активностью и функциональным напряжением (рис. 5). Через 1 и 3 сут. после острой ишемии преобладали гиперхромные нейроны в состоянии сниженной биосинтетической активности, с признаками дегенеративных изменений. Через 7, 14, 21 и 30 сут. после острой ишемии — необратимо поврежденные пикноморфные нейроны, а также нейроны с признаками повышенной активности и функционального напряжения. В отдаленном постишемическом периоде (в сравнении с острым) в 2—3 раза увеличивалась доля нормохромных нейронов. То есть, тинкториальные свойства части гиперхромных нейронов восстанавливалась. В нейронах с снижением функциональной активностью, по сравнению с нормой, уменьшались размеры ядра и ядрышка, увеличивалось содержание гетерохроматина и отсутствовали интерхроматиновые гранулы, отмечалась выраженная осмиофилия кариоплазмы. Плотные ядрышки смещались на периферию ядра, неравномерно расширялись перинуклеарные пространства, появлялись складки поверхности ядра, многочисленные светлые митохондрии с разрушенными кристами, расширялись канальцы эндоплазматической сети (рис. 4, а). При этом эти нейроны сохраняли неповрежденные аксосоматические синапсы (рис. 4, е). Итогом тяжелого ишемического повреждения нейронов были коагуляционный некроз (пикноморфные нейроны) и апоптоз (рис. 4, в, д). Для пикноморфных нейронов характерно: выраженная осмиофилия ядра и цитоплазмы, уменьшение размеров тела клетки за счет сморщивания; деформация клеточного ядра, инвагинации; массивные скопления гетерохроматина под внутренней ядерной мембраной; фрагментация ядрышка и перемещение его частей к внутренней ядерной мембране; суженное перинуклеарное пространство; увеличенные размеров митохондрий, светлый матрикс и разрушение значительной части крист; плохо различимые канальцы эндоплазматической сети. Пикноморфные нейроны были окружены зоной отека-набухания астроцитарных отростков (рис. 4, в). Начальные проявления коагуляционно-ишемического некроза и апоптоза, из-за сходных ультраструктурных характеристик, очень сложно было отличить даже с помощью электронной микроскопии (рис. 4, б, г). Однако для ишемического коагуляционного некроза нейронов в большей степени были характерны такие ультраструктурные изменения, как набухание митохондрий, локальная коагуляция, гиперосмиофилия протеинов мембран, микротрубочек, крист митохондрий и цистерн эндоплазматической сети, конденсация хроматина ядра в плотные глыбки, увеличение в кариоплазме количества перихроматиновых гранул, уплотнение агрегированного хроматина и дезинтеграция ядрышка. От цистерн гранулярной эндоплазматической сети отделялись рибосомы, значительно расширялись цистерны оболочки ядра и эндоплазматической сети, отмечалась необратимая денатурация и коагуляция белков цитозоля, появлялись неструктурированные нерастворимые соединения (рис. 4, а, б, в). При коагуляционно-ишемическом отсроченном некрозе не выявлено признаков активации лизосом (рис. 4 а, б, в), а утилизация остатков погибших нейронов происходила длительное время с привлечением фагоцитов. Наиболее надежным дифференциальным критерием, отличающим коагуляционно-ишемический некроз от апоптоза в раннем постишемическом периоде, являлось морфологическое состояние ядра. При апоптозе в пикнотизированном ядре с гофрированными контурами ядрышко сохранялось (рис. 4, г). При коагуляционном некрозе наблюдали глубокий пикноз ядра с разрушением ядрышка (рис. 4, в). Абсолютным признаком программированной клеточной гибели было формирование апоптотических тел и разрушение цитолеммы (рис. 4, д). Кроме нормохромных и гиперхромных нейронов в отдаленном восстановительном периоде в СМК встречались гипохромные нейроны 7% (ДИ: 4,2—10,9%) с большим содержанием остаточных телец, поврежденными митохондриями, расширенными цистернами эндоплазматической сети, малым содержанием рибонуклеопротеинов в ядре (хроматина) и цитоплазме, неровными краями ядра. Вполне вероятно, что подобные изменения отражали функциональное истощение нейронов. Очень редко 3% (95% ДИ: 1,3—6%) встречались апоптозные клетки (рис. 4, г, д). Таким образом, после 20-минутной окклюзии общих сонных артерий нами выявлены реактивные тинкториальные, гидропические дистрофические и некробиотические (колликвационные и коагуляционные) изменения, а также структурные признаки апоптоза. Максимальной активности механизмы апоптоза достигали через 3 сут. после острой ишемии. За счет апоптоза ОЧП нейронов СМК уменьшалась на 9-17%. В отдаленном восстановительном периоде (14, 21 и 30 сут.) часть не сморщенных гиперхромных и нормохромных нейронов имела признаки активного функционирования и напряжения (транскрипционной активности). У этих нейронов отмечалась высокая электронная плотность ядер, неровность их контуров, очаговые скопления интерхроматиновых гранул и перихроматиновых фибрилл на фоне светлого эухроматина. Ядрышки этих нейронов увеличивались в размере, располагались эксцентрично, содержали гранулярные компоненты. Краевой хроматин ядра был представлен небольшими скоплениями под внутренней ядерной мембраной, фрагментарно расширялось перинуклеарное пространство, отмечались складки ядерной мембраны. В перинуклерной зоне цитоплазмы выявлено большое количество темных неповрежденных митохондрий. В некоторых клетках наблюдалось очаговое расширение канальцев эндоплазматической сети, увеличение плотности свободных рибосом, гипертрофированный комплекс Гольджи, мультивезикулярные и мультиламинарные тела (рис. 5). Следовательно, структурная организация части нормохромных и гиперхромных нейронов (в состоянии активации и напряжения) указывала на высокую интенсивность протекающих в них транскрипционных процессов (в клеточном ядре) и белоксинтетических процессов (в цитоплазме — внутриклеточная регенерация и компенсаторная гиперплазия). Вероятно, именно за счет подобных нейронов происходило восстановление функций поврежденного головного мозга в отдаленном постишемическом периоде. По данным литературы, динамика, основные фазы и направления структурно-функциональных изменений нейронов головного мозга белых крыс после острой ишемии остаются актуальными проблемами нейроморфологии. Изучение структурных механизмов повреждения нейронов в постишемическом периоде неизбежно сталкивается с необходимостью верификации некроза и апоптоза. Существует множество различных методов, которые позволяют визуализировать различные признаки постишемической гибели клеток. Однако наиболее надежным методом, способным однозначно различать некроз и апоптоз, является детальный анализ клеточной ультраструктуры с помощью электронной микроскопии. Поэтому в настоящее время многие авторы рекомендуют делать акцент на детальном описании морфологической картины патологически измененных клеток. Наряду с иммуногистохимией, TUNEL- и ISEL-методами это позволяет избежать искажения интерпретации морфометрических результатов и наиболее точно дифференцировать «апоптоз» и «некроз». Необходимо учитывать, что механизмы, посредством которых нейроны погибают и восстанавливаются при ишемии очень сложны и до конца не изучены. Согласно рекомендациям Nomenclature Committee on Cell Death (2009), смерть клетки может быть классифицирована на основе морфологического внешнего вида (некроз, апоптоз, аутофагия и различные смешанные фенотипы), но только тогда, когда доказаны: 1 — потеря целостности плазматической мембраны, 2 — полный распад клетки, включая ее ядро, или 3 — фагоцитоз фрагментов или клетки в целом. При этом иммуногистохимические маркеры апоптоза играют вспомогательную роль. К сожалению, несмотря на огромный объем информации, «точка невозврата» и направление гибели при оценке состояния конкретных гиперхромных нейронов после острой ишемии до сих пор не определены и нет простых решений этих проблем. В большинстве случаев при анализе морфологических данных можно судить только о вероятности появления некроза или апоптоза для конкретного гиперхромного нейрона. В настоящей работе проведено детальное описание всех морфотипов измененных пирамидных нейронов СМК белых крыс после острой 20-минутной ишемии с помощью световой, флуоресцентной (DAPI) и электронной микроскопии. Сочетанное использование методов позволило классифицировать нейроны и, при наличии четких структурных маркеров (распад ядер, клетки, фагоцитоз) доказать возможность апоптоза гиперхромных нейронов СМК после 20-минутной окклюзии общих сонных артерий. При окраске DAPI фрагментированные апоптозные ядра отчетливо выявлялись в виде типичных групп, близко расположенных плотных флуоресцирующих телец ДНК-содержащего материала, что позволяло их легко идентифицировать. Наиболее надежным критерием, отличающим коагуляционно-ишемический некроз от апоптоза в раннем постишемическом периоде, являлось морфологическое состояние ядра, а абсолютным признаком программированной клеточной гибели является формирование апоптотических тел и разрушение цитолеммы. Например, на основании подобного подхода, в слое III через 3 сут. показано, что 5,8—13,3% гиперхромных нейронов подвергалось апоптозу, 13,9—23,9% — коагуляционному некрозу, а остальные выходили из патологического состояния в отдаленном восстановительном периоде. Необратимо измененные клетки-тени составляли 7,8—16,1%. В результате общая численная плотность пирамидных нейронов в течение 30 сут. постишемического периода в слое III СМК снижалась на 24,9—36,6%, а в слое V — на 10,3—19,4%. Ранее близкие значения показаны в процессе формирования очага ишемического инсульта после полной локальной ишемии в зоне пенумбры. Заключение. Таким образом, при использовании 2-сосудистой модели неполной глобальной ишемии без гипотонии была доказана смешанная природа гибели нейронов в СМК — одновременное сочетание процессов некроза и апоптоза (парапоптоз). Однако основную роль в гибели нейронов все же играли процессы быстрого и отдаленного ишемического некроза. Полученные результаты могут быть полезны при изучении динамики, основных фаз и направлений структурно-функциональных изменений нейронов неокортекса млекопитающих при сравнении разных экспериментальных моделей острой ишемии головного мозга, а также для понимания структурных основ патогенеза постишемической энцефалопатии.

Авторы:

Степанов А.С.
Авдеев Д.Б.
Акулинин В.А.
Степанов С.С.

Издание: Патологическая физиология и экспериментальная терапия
Год издания: 2018
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2018.-N 2.-С.30-38. Библ. 22 назв.
Просмотров: 49

Рубрики
Ключевые слова
180
cell
med
st
tu
абсолютный
авторский
агрегированный
аксонов
активация
активность
активные
акты
акцентуация
альдегид
анализ
аналоги
анестезия
антитела
аорты
апертура
апоптоз
аппарат
артерии
ассоциированные
астроцитарных
астроциты
атропин
аутопсийный
аутофагия
белая
белковый
белокЕ7
белые
биопсия
биосинтетический
блока
болезни
болезнь
большая
брал
буферные
быстрого
бытовые
вакуоли
введен
верификация
вероятности
вероятность
визуализация
внешний
внутренняя
внутриклеточные
водное
возможности
воспроизведение
восстанавливающие
восстановительное
восстановление
восходящая
временная
время
вспомогательные
вторичные
вызванные
выполнение
выражение
высокий
высшая
выходного
выявление
выявленный
гематоксилин
гета
гетерохроматин
гибель
гидра
гиперплазия
гипертрофированное
гиперхромным
гипотеза
гипотония
гипохромная
глиальные
гликолиз
глобального
глубокая
голова
головного
головной
гольджи
гомогенный
государственная
готовность
гоффы
гранулы
гранулярный
графический
групп
давлением
данные
данных
двойная
дегенеративное
дезинтеграция
денатурация
дендриты
деструктивных
деструкции
детям
деформации
динамика
директивы
дистрофии
дистрофическая
дисфункции
дифференциальная
диффузная
длительная
длительное
днк
дозирование
доля
дополнительные
другого
дуги
европейское
енолаза
животного
животные
заболевания
защита
здравоохранение
значению
зоны
зрения
игровая
идентификация
изменение
изменения
измененное
изображение
изучение
изучению
иммунная
иммуногистохимическое
иммуногистохимия
иммунофлуоресцентный
инвагинация
инсульт
интактной
интенсивность
интерпретация
информации
искажения
использование
исследование
истощение
исход
итоги
ишемии
ишемическая
ишемия
камеры
канальцев
канальцевый
кариоцитолиз
картина
качественный
класс
клетка
клетки
клеток
клеточная
ключ
коагуляционные
коагуляция
козье
количество
комитет
компенсаторный
комплекс
компонент
конденсация
конденсированные
конкретный
контра
контроль
контуров
коры
краевая
красители
краски
красные
критерии
круглая
крупного
крыса
крысы
лабораторная
лабораторные
легкая
лизосомы
литература
локальная
магистральные
максимальная
максимум
малого
маркер
массивные
массой
материал
матрикс
медики
медицин
медицинская
международна
мел
мелкий
мембран
метод
методика
методов
механизм
микроскопия
микроскопы
микрососуда
микротрубочек
министерство
минутн
митохондрии
млекопитающие
модели
моделирование
мозг
мозга
морфологическая
морфометрический
морфометрия
морфотип
морфофункциональная
мульти
набухание
наибольшая
наличия
направлениях
напряжение
нарушения
настоящие
наука
научной
начальный
небольших
неврологическая
незначительная
нейроморфология
нейрон
нейронная
нейроновые
нейронофагия
нейронспецифический
нейроны
нейроциты
некробиотические
некроз
некротический
необходимости
неокортекс
непараметрическая
неполные
неравномерное
нервная
нескольким
неструктурированный
неясный
нормы
нулевые
обмен
оболочка
образ
общая
общей
общие
объект
объем
овальное
одновременная
одного
окклюзия
окраска
округ
окружающая
омская
описание
определения
органеллы
организации
осмий
основа
основание
основной
особо
остатки
остаточная
острая
остром
отдаленные
отдел
отек
отличия
относительная
отростка
отростковые
отсроченный
оттенки
отчетов
оценка
очага
очаговая
очаговые
пара
парафин
патогенез
патологическая
пенумбры
перемещение
перинуклеарный
период
перфузии
пирамидные
плазматическая
плотности
плотность
плохой
поверхности
повреждение
повреждения
повышенная
погружение
поддержания
подкожная
подобные
подход
поза
поздний
показатели
пола
полезная
поликлональные
полная
поля
помощи
популяции
поры
после
послед
постишемические
потери
премедикация
приводящей
признаки
приказы
природа
причина
проблема
проведение
проведения
проверка
программ
программированный
прогрессивные
производства
произвольная
простая
пространства
пространственная
протеин
протек
протоплазматическая
процесс
проявление
путем
работа
равными
развитие
различие
различный
размер
размеров
разрушение
раннего
ранний
распада
расположенные
распределение
раствор
расширение
расширенная
реактивное
реакцией
регенерация
редкие
результата
рекомендации
реорганизация
реперфузии
решение
рибонуклеопротеиновые
рибосомы
рисунок
роль
самцов
сахароза
светлые
световая
световой
свечение
свидетельства
свинца
свободное
свойства
связанные
связей
сенсомоторная
сети
сеть
синапс
синаптическая
синее
систем
складки
скопления
следовой
слова
сложные
слой
случаев
смерти
смеси
смесь
смешанная
сморщенная
снижение
сниженной
современная
содержание
содержащая
соединение
сонная
сонной
соответствие
сопоставление
состав
состояние
сосудистая
сохранение
сочетанная
способность
сравнение
сравнительная
среда
срезы
сроки
ссср
стандартные
статистические
статистический
степени
структур
структурная
суд
сульфат
счет
тел
тела
телец
темнота
терминали
течения
типичный
типов
ткань
тотального
тотальное
точная
транскрипции
трансформация
трудности
тяжелая
увеличение
указ
ультра
ультраструктура
ультраструктурное
ультратонкий
уменьшение
университет
уплотнение
уран
уровни
условия
утилизация
фагоцит
фагоцитоз
фаз
фазы
файлы
фенотип
фермент
фибриллы
фибриллярный
физиология
фильтры
флуоресцентная
флуоресценция
флюоресцентная
фокальная
фоновое
форма
формирование
фосфатная
фотография
фрагмент
фрагментация
фрагментированные
фронтальный
функции
функциональная
функционирование
характер
характеристика
характерного
хроматин
хроматолиз
цвет
цвета
целом
цель
целях
цистерна
цитозоль
цитомембрана
цитоплазма
цитотоксическая
цитрат
цифровые
частей
части
часть
человек
четыре
численный
швеция
эксперимент
экспериментальная
эктопия
электронная
электроны
элиминации
эндоплазматический
энергетическая
энцефалопатия
эозин
этап
этический
эухроматина
ядер
ядерного
ядерное
ядра
ядро
ядрышки
япония
Ваш уровень доступа: Посетитель (IP-адрес: 18.97.14.87)
Яндекс.Метрика