Иммунохимические и протективные свойства конъюгированного капсульного полисахарида Streptococcus pneumoniae серотипа 9N

Аннотация:

Получены конъюгаты капсульного полисахарида Streptococcus pneumoniae серотипа 9N со столбнячным анатоксином. Изучено их взаимодействие со специфическими антителами к столбнячному анатоксину и полисахариду 9N при сэндвич-иммуноанализе, в результате чего отобран препарат с оптимальным соотношением полисахарида и белка-носителя (3:4). С помощью количественного ИФА определены параметры эффективной сорбции антигенов на гидроксиде алюминия для проведения экспериментов in vivo: в частности, соотношение конъюгата и адъюванта должно быть <1:1 (по массе). Двукратная иммунизация выбранным конъюгатом, адсорбированным на гидроксиде алюминия, обеспечивала увеличение титра антител к полисахариду до 70400 (р<0,001), что в 140 раз выше по сравнению с неконъюгированной формой антигена. Исследование протективных свойств антител на модели интраназального заражения аутбредных мышей штаммом S. pneumoniae 9N показало, что через 72 ч после контаминации титр бактериальной обсемененности в образцах легочной ткани иммунизированных конъюгатом мышей был в 10 раз меньше, чем у мышей из неиммунизированной группы (р>0,05). Streptococcus pneumoniae — один из основных этиологических факторов развития инвазивных инфекций среди детей, пожилых и иммуно-компрометированных лиц. На сегодняшний день известно более 90 серотипов пневмококка (97, по данным К.А. Geno и др.), большинство из которых могут проявлять вирулентные свойства. Известно, что иммунный ответ на инфекцию S. pneumoniae является типоспецифичным и определяется преимущественно продукцией антител против капсульного полисахарида. Однако полисахариды являются тимус-независимыми антигенами, не формируют иммунологическую память и практически неиммуногенны для детей первых лет жизни. В связи с этим для профилактики пневмококковых инфекций у данных возрастных групп были разработаны и введены в практику конъюгированные вакцины, содержащие капсульные полисахариды наиболее распространенных серотипов пневмококка, ковалентно связанные с белком-носителем, обеспечивающим формирование Т-клеточного иммунного ответа. Внедрение данных препаратов в клинику привело к снижению заболеваемости, вызванной таргетными серотипами микроорганизма. Со временем возникла необходимость в расширении спектра защитного действия вакцины, и были созданы 7-, 10- и 13-валентные препараты, включающие гликоконъюгаты серотипов 1,3,4,5, 6А, 6В, 7F, 9V, 14, 18С, 19А, 19F и 23F. В последние годы продолжает наблюдаться смена спектра циркулирующих в популяции серотипов 5.pneumoniae, так что возбудителями инвазивных форм инфекций все чаще становятся «невакцинные» серотипы. По данным эпидемиологических исследований, после начала применения 10- и 13-валентных вакцин в европейском регионе 71 ,9% от зарегистрированных пневмококковых инвазивных серотипов, вызывавших инфекции у детей, принадлежали к «невакцинной» группе. В связи с этим актуальным остается вопрос обновления состава вакцин с учетом данных эпидемиологических исследований. Спектры серотипов пневмококка могут значительно различаться в зависимости от конкретного региона или страны. Одним из вирулентных, но не представленных в конъюгатных вакцинах серотипов S. pneumoniae является 9N. Согласно международным данным, он ответственен за 1,3% случаев инвазивных пневмококковых инфекций у детей и входит в число наиболее распространенных вирулентных серотипов, выявляемых после начала применения 10- и 13- валентных вакцин. Роль носителя в лицензированных конъюгатных вакцинах наряду с дифтерийным анатоксином и нетоксичной мутантной формой дифтерийного токсина CRM 197 выполняет столбнячный анатоксин. Использование данного белка в качестве носителя обусловлено его высокой иммуногенностью и известным профилем безопасности. Цель данной работы состояла в получении гликоконъюгата на основе капсульного полисахарида S. pneumoniae серотипа 9N и CAT, создании системы оценки его иммунохимических характеристик в ИФА, а также в изучении его иммуногенных и протективных свойств.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2018
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2018.-N 3.-С.33-41. Библ. 15 назв.
Просмотров: 41