РОЛЬ ПРОТЕИНКИНАЗ р38 И СК2 В ОТВЕТАХ МАКРОФАГАЛЬНЫХ КЛЕТОК RAW 264.7 НА ЛИПОПОЛИСАХАРИД

Аннотация:

Исследовали роль протеинкиназ р38 и СК2 (казеинкиназа 2) в формировании ответов макрофагальных клеток линии RAW 264.7 на липополисахарид (LPS) из грамотрицательных бактерий. С использованием специфических блокаторов активности р38 (р38 MAP kinase Inhibitor XI) и СК2 (Casein Kinase II Inhibitor III) изучали влияние этих протеинкиназ на LPS-вызванную активацию сигнальных путей ядерного фактора кВ (NF-кВ), стресс-активируемых протеинкиназ/c-Jun N-концевых киназ (SAPK/JNK), р38 и регуляторного фактора интерферона (I RF)3, продукцию толл-подобного рецептора 4 (TLR4), индуцибельных белков теплового шока HSP72 и HSP90, интерлейкинов (IL) IL-la, IL-ip, 1L-6, фактора некроза опухолей (TNF) а и 1L-10. Активацию проапоптозной системы в макрофагальных клетках оценивали по соотношению активированной и неактивированной форм каспазы-3 и фосфорилированию р53. Показали, что через 6 ч после добавления LPS (2,5 мкг/мл) к клеткам RAW 264.7 происходит активация TLR4-CHrHarbHbix путей, что сопровождается достоверным повышением фосфорилирования киназы 1кВ (IKK) а/р, NF-кВ (как по Ser536, так и по Ser276), р38, JNK и IRF3. При этом наблюдали увеличение содержания белка TLR4, индуцибельных форм белков теплового шока, про- и противовоспалительных цитокинов и незначительную активацию проапоптозной системы клетки. С помощью ингибиторного анализа показали, что при ранних ответах макрофагальных клеток на LPS как казеинкиназа 2, так и р38 регулируют активацию сигнальных путей митоген-активируемых протеинкиназ/NF-KB, фосфорилирование р65 по Ser276/Ser536, вызывают накопление белков теплового шока HSP70, HSP90 и LPS-распознающего рецептора TLR4. Кроме того, снижение активности этих протеинкиназ при использовании р38 MAP kinase Inhibitor XI и Casein Kinase II Inhibitor III вызывает дисбаланс эффекторной функции макрофагов, проявляющийся в снижении продукции провоспали-тельных цитокинов раннего ответа, а также в несогласованности работы про- и противоапоптозных сигнальных путей, что может привести к апоптозу клеток. Обнаруженные нами эффекты свидетельствуют о неэффективности терапевтического использования ингибиторов р38 и СК2 на ранних стадиях воспалительной реакции. КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: RAW 264.7, липополисахарид, р38, казеинкиназа 2, сигнальные пути NF-кВ и SAPK/JNK, цитокины, белки теплового шока, TLR4.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2018
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2018.-N 6.-С.949-959. Библ. 43 назв.
Просмотров: 39