РАЗРАБОТКА IN VITRO МОДЕЛИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ВЛИЯНИЙ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ НА КЛЕТКИ МЕЖПОЗВОНКОВОГО ДИСКА В ТРЕХМЕРНОЙ КУЛЬТУРЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АКТИВИРОВАННЫХ МАКРОФАГОПОДОБНЫХ КЛЕТОК ЛИНИИ ТНР-1

Аннотация:

Дегенеративные заболевания межпозвонкового диска (МПД) являются одной из ведущих причин снижения трудоспособности в мире. В развитии дегенерации МПД, а также болевого синдрома одним из основных факторов считается хроническое воспаление. Установлено, что провоспалительные цитокины секретируются как макрофагами, Т-клетками и нейтрофилами, так и самими клетками пульпозного ядра (ПЯ) и фиброзного кольца (ФК) МПД. Важную роль в продукции провоспапительных медиаторов играют макрофаги, присутствие которых подтверждается гистологическими исследованиями образцов ткани дегенерированных МПД после хирургического лечения, а также при иммуногистохимическом окрашивании на макрофагальный маркер CD68. Провоспапительные цитокины часто используются в качестве катаболической среды для изучения дегенеративных каскадов в культурах клеток МПД. В литературе описаны двумерные in vitro модели, реализующие воздействие провоспалительных цитокинов на клетки МПД: добавление отдельных или нескольких провоспалительных цитокинов, модели сокультивирования клеток МПД с аутологичными или аллогенными мононуклеарами периферической крови, а также с моноцитоподобными клетками линии ТНР-1. Клеточная линия ТНР-1 по морфологическим и функциональным характеристикам схожа с моноцитами периферической крови и широко используется для исследования иммунных реакций путем дифференцировки их в макрофагоподобные клетки, которые секретируют провоспалительные цитокины. Целью данного исследования являлась разработка и оценка трехмерной in vitro модели для изучения провоспалительного действия комплекса цитокинов на клетки МПД при сокультивировании с макрофагоподобными клетками линии ТНР-1. Разработана новая модель для исследования влияния комплекса провоспалительных цитокинов на клетки межпозвонковых дисков в трехмерной культуре - сокультивирование с активированными макрофагоподобными клетками линии ТНР-1. Методом проточной цитометрии с использованием микросфер исследованы уровни секреции ФНО-а, ИЛ-1бета, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10 и ИЛ-12р70. Выявлены значимые различия в уровне спонтанной секреции цитокинов неповрежденными и дегенерированными межпозвонковыми дисками. Показано значимое увеличение уровня ИЛ-1бета и ИЛ-8 в группах сокультивирования, что подтверждает состоятельность разработанной модели.

Авторы:

Издание: Клеточные технологии в биологии и медицине
Год издания: 2018
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2018.-N 3.-С.176-179. Библ. 13 назв.
Просмотров: 15