АНАЛИЗ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ЭКСПРЕССИИ МАТРИКСНЫХ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗ В СТАБИЛЬНОЙ И НЕСТАБИЛЬНОЙ АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ БЛЯШКАХ МЕТОДОМ ПОЛНОГЕНОМНОГО СЕКВЕНИРОВАНИЯ РНК: ПИЛОТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Аннотация:

Цель. Выполнить анализ дифференциальной экспрессии генов металлопротеиназ, вовлеченных в процесс стабилизации/дестабилизации атеросклеротической бляшки методом полногеномного секвенирования РНК и определить уровень металлопротеиназ в гомогенатах атеросклеротических бляшек разного типа методом иммуноферментного анализа (ИФА). Материал и методы. Исследование выполнено на образцах атеросклеротических бляшек пациентов 45-65 лет, жителей Западно-Сибирского региона с коронароангиографически документированным коронарным атеросклерозом без острого коронарного синдрома со стабильной стенокардией напряжения II-IV функционального класса. Забор тканей атеросклеротической бляшки проводился в ходе операции при наличии интраоперационных показаний. Выполнено гистологическое исследование бляшек. В гомогенатах фрагментов интима/медии методом ИФА с использованием наборов ВСМ Diagnostics определены уровни деструктивных биомаркеров ММР-1, ММР-3, ММР-7, ММР-9, TIMP-1 на анализаторе Muitiscan EX (Thermo Fisher Scientific, USA). Подготовка библиотек для полногеномного секвенирования РНК проведена с использованием набора IIIumina's TruSeq RNA Sample Preparation Kit (IIIumina, USA). Профиль экспрессии в тканях бляшек определен на приборе HiSeq 1500 (IIIumina, USA). Результаты. Отличия в экспрессии между типами бляшек были отмечены для генов матриксных металлопротеиназ ММР2, ММР7, ММР8, ММР9, ММР12, и ММР14. Наблюдалось 8-кратное статистически значимое увеличение уровня экспрессии ММР9 (р<0,001) в нестабильной атеросклеротической бляшке дистрофически-некротического вида. Исследование методом ИФА содержания ММР-7, являющейся активатором про-ММР-9, а также содержания самой ММР-9, выявило их повышение в нестабильных бляшках в сравнении липидными пятнами (в 1,5 и 2,4 раза) и молодыми стабильными бляшками (в 1,4 и 2,1 раза). Заключение. Для гена ММР9 получены статистически значимые различия уровня экспрессии в стабильной атеросклеротической бляшке фиброзного вида и нестабильной атеросклеротической бляшки дистрофически-некротического вида. При проведении ИФА выявлено, что в липидных пятнах и молодых стабильных атеромах коронарных артерий повышена концентрация ММР-3 и снижена активность тканевого ингибитора металлопротеиназ. В нестабильных бляшках со склонностью к изъязвлению/разрыву повышены концентрации ММР-1, ММР-7, ММР-9.

Авторы:

Издание: Российский кардиологический журнал
Год издания: 2018
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2018.-N 8.-С.52-58. Библ. 15 назв.
Просмотров: 28