ПОЛУЧЕНИЕ ГОМОГЕННОЙ L-ЛAKTAT: ЦИТОХРОМ С-ОКСИДОРЕДУКТАЗЫ ИЗ НЕСЕРНОЙ ПУРПУРНОЙ БАКТЕРИИ Rhodovulum steppense И ИССЛЕДОВАНИЕ ЕЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ И РЕГУЛЯТОРНЫХ СВОЙСТВ

Аннотация:

В клетках несерной галоалкалофильной пурпурной бактерии Rhodovulum steppense штамм A-20s обнаружена активность L-лактат: цитохром с-оксидоредуктазы. В результате очистки получен электрофоретически гомогенный препарат фермента с удельной активностью 4.75 Е/мг белка, степенью очистки 81.9 раз и выходом 2.2%. Определены кинетические и физико-химические характеристики. Значение константы Михаэлиса по лактату составило 15 мкМ, температурный оптимум исследуемого фермента — 31°С, оптимум рН — 8.2. Установлено, что фермент является гомодимером с молекулярной массой ~ 140 кДа, при этом масса одной субъединицы — 68 кДа. L-лактат: цитохром с-оксидоредуктаза (L-ЛЦО, КФ 1.1.2.3,) — фермент, известный также как НАД-независимая лактатдегидрогеназа и флавоцитохром b2, был впервые выделен из дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Фермент катализирует реакцию превращения лактата в пируват, сопряжённую с восстановлением цитохрома с. У растений и у животных обнаружен ген, кодирующий D-лактат: цитохром с-оксидоредуктазу (D-ЛЦО, КФ 1.1.2.4,), по функции близкий к L-ЛЦО. У грибов рода Penicillium обнаружены гены как L-ЛЦО, так и D-ЛЦО. Гены этого фермента выявлены у представителей семейства Rhodobacteraceae, в том числе у Rhodovulum sulfidophilum. В связи с широким распространением гена L-ЛЦО у живых организмов подробное изучение биологической роли этого фермента представляет большой теоретический интерес. Бактериям Pseudomonas stutzeri этот фермент необходим для окисления содержащегося в питательной среде лактата. L-ЛЦО также представляет практический интерес как инструмент для энзиматического определения лактата в образцах пищевых продуктов. Цель работы — получение в гомогенном состоянии ЛЦО из галоалкалофильной бактерии Rhodovulum steppense A-20s и исследование ее кинетических и физико-химических свойств.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2018
Объем: 105с.
Дополнительная информация: 2018.-N 4.-С.257-361. Библ. 24 назв.
Просмотров: 56