ОБНАРУЖЕНИЕ ТРАНСГЕННЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ПОМОЩИ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ IN SITU

Аннотация:

Описана методика выявления как собственных, так и чужеродных последовательностей ДНК в хромосомах и ядрах отдельных клеток мышей, трансгенных по сателлитной ДНК Bos taurus, при помощи полимеразной цепной реакции in situ. Изучали клетки доимплантационных и постимплантационных зародышей, а также взрослых животных. Особое внимание уделено оптимизации состава реакционной среды, способу фиксации и предварительной обработке хромосомной ДНК. Реакция занимает лишь несколько часов и не нуждается в дорогостоящем оборудовании. Трансгенные животные являются в настоящее время (а клонированные несомненно будут являться в ближайшем будущем) крайне популярной экспериментальной системой для решения таких вопросов современной биологии, как механизмы дифференцировки, импринтинга и др. Обычно для идентификации трансгенных животных используются блотинг по Саузерну и полимеразная цепная реакция. Недавно для этой цели в качестве более быстрого и простого подхода было предложено использовать флуоресцентную гибридизацию. Обычная ПЦР (in vitro) позволяет обнаруживать до 1 копии интересующей последовательности на клетку из 104 клеток или более, лишенных данной последовательности.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 1999
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 1999.-N 8.-С.693-697
Просмотров: 31