ЭКСПРЕССИЯ ГЕННОЙ МАТРЕШКИ, КОДИРУЮЩЕЙ ГОМОЛОГ ИНГИБИТОРА ПЕПТИДАЗЫ КУНИТЦА, КОНТРОЛИРУЕТСЯ КАК НА УРОВНЕ ТРАНСЛЯЦИИ, ТАК И ТРАНСКРИПЦИИ

Аннотация:

Ген, кодирующий гомолог ингибитора пептидазы Кунитца (KPILP), содержит «вложенную» альтернативную открытую рамку считывания, контролирующую экспрессию материнской мРНК. В листьях интактного растения Nicotiana benthamiana содержание мРНК NbKPILP низкое, но резко увеличивается при длительном выдерживании растений в темноте или при введении чужеродной нуклеиновой кислоты. Возможно, помимо экспрессируемой альтернативной рамки, в механизме поддержания уровня мРНК NbKPILP важную роль играет активность промотора этого гена. Для выявления возможной роли промотора NbKPILP был выделен участок хромосомной ДНК N. benthamiana, определена его нуклеотидная последовательность и создана конструкция, где синтез мРНК репортерного гена Е. coli uidA, кодирующего бета-D-глюкуронидазу (GUS), находился под контролем промотора NbKPILP. При оценке эффективности направляемого исследуемым промотором или 358-промотором вируса мозаики цветной капусты синтеза мРНК uidA в условиях транзиентной экспрессии показано, что уровень накопления GUS сравним для обоих промоторов. Длительное выдерживание агроинъецированных растений в темноте приводило к повышению содержания мРНК uidA, синтез которой направляется промотором NbKPILP. Проведенные эксперименты подтвердили ранее сделанные наблюдения, что, наряду с регуляцией на уровне транскрипции, эффективность накопления мРНК NbKPILP может определяться активностью альтернативной открытой рамки считывания, контролируемой полипуриновым блоком, расположенным перед ней, поскольку внесение мутаций в этот блок приводило к резкому увеличению содержания «материнской» мРНК. Внесение мутации в стартовый кодон альтернативный рамки приводило к многократному повышению уровня как материнской мРНК, так и кодируемого ей NbKPILP в клетках.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2018
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2018.-N 10.-С.1562-1571. Библ. 31 назв.
Просмотров: 28