Детекция наночастиц серебра во внутриклеточном пространстве с помощью проточной цитометрии

Аннотация:

Продемонстрировано обнаружение наночастиц серебра во внутриклеточном пространстве с помощью проточной цитофлуориметрии. В эндотелиальных клетках линии EA.hy926, инкубированных в растворе, содержащем 2 мкг/мл наносеребра, измеряли боковое светорассеяние. По сравнению с контрольными образцами этот параметр возрастал, в то время как прочие значимые характеристики не изменялись. Это подтверждает чувствительность метода к изменившемуся состоянию клеток и указывает на поглощение наночастиц серебра клетками при концентрации ниже токсической. Взаимодействие наноразмерных частиц (НЧ) с живыми организмами представляет собой важный предмет изучения ввиду всё возрастающего применения таких материалов в биомедицинских исследованиях. Влияние широко применяемых наночастиц серебра (НЧС) на жизнедеятельность клеток в значительной мере зависит от того, попадают ли они во внутриклеточное пространство. Было неоднократно показано, что НЧС могут высвобождать ионы серебра, находясь внутри клеточных органелл, особенно при попадании в лизосомы. Вследствие этого проникновение наночастиц в клетки остаётся важным вопросом для изучения. В литературе имеются сведения о том, что у клеток, содержащих НЧ, заметно возрастает боковое светорассеяние, характеризующее изменения гранулярности клеток. Исследование параметров рассеяния клеток с помощью цитометрии может быть разумной альтернативои высокочувствительным, но трудоемким и дорогостоящим методам детекции НЧ в клетках, традиционно используемым в исследовательской практике в тех случаях, когда требуется подтвердить неспецифические изменения внутриклеточного содержимого. Данный подход всё ещё требует доработки, так как в нем не учитываются возможные патоморфологические изменения клеток, не связанные с поглощением частиц, в частности, уменьшение размеров в ходе развития апоптоза. Однако, если прямое рассеяние от клеток (параметр, характеризующий размеры клеток) и общая жизнеспособность не меняются, то можно предположить, что изменение гранулярности обусловлено именно агломератами наночастиц, а не является патоморфологическим признаком, присущим апоптозу. Цель данного исследования — выявление агломератов НЧС в эндотелиальных клетках человека в эксперименте in vitro с использованием характеристик рассеяния.

Авторы:

Издание: Патологическая физиология и экспериментальная терапия
Год издания: 2018
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2018.-N 4.-С.227-236. Библ. 14 назв.
Просмотров: 31