ВЫДЕЛЕНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ КЛАССА G, АССОЦИИРОВАННЫХ С ТКАНЬЮ ПЛАЦЕНТЫ ЧЕЛОВЕКА

Аннотация:

Проведена оптимизация метода выделения антител из ткани плаценты условно здоровой пациентки. Были оценены четыре протокола выделения антител и рекомендован для использования протокол с измельчением ткани (без гомогенизации) и элюцией антител последовательно кислым и щелочным буфером. Охарактеризован репертуар выделенных антител с помощью гликочипа. Установлено частичное совпадение специфичности выделенных антител с антителами в периферической крови, что свидетельствует об их вероятной ассоциации с углеводными антигенами в плаценте. Идентификация потенциальных молекулярных мишеней антител, являющихся резидентными в плаценте, необходима для понимания механизмов формирования иммунологической толерантности к плоду. В ткани плаценты экспрессируются аллогенные антигены плода. Уклонение от надзора материнской иммунной системы обеспечивается функционированием комплекса клеточных и гуморальных механизмов, направленных на иммунорегуляторные взаимодействия между генетически различными клетками и маскировку аллогенных антигенов, в том числе продукцией "блокирующих антител". Известно, что иммуноглобулины класса G (IgG) играют важную роль в долгосрочном гуморальном иммунитете, обладая способностью проходить через плацентарный барьер. Более того, фетальный трофобласт, образующий ткань плаценты, способен синтезировать и секретировать IgG. Согласно данным работы, значительная часть этих антител нестандартно гликозилирована—только по одному из Fаb-фрагментов (т.е. это асимметричные IgG—acIgG). Предполагается, что acIgG способны связываться с фетальными антигенами плаценты (предположительно углеводной природы), выполняя блокирующую функцию и предотвращая их распознавание эффекторными клетками. Количество acIgG в крови возрастает во время беременности и возвращается к начальному уровню после родов. Низкий уровень acigG по сравнению с физиологической беременностью обнаружен при невынашивании и может служить маркером отторжения плода. Для изучения антител, ассоциированных с тканью плаценты, их необходимо элюировать в максимально нативном виде. Использованные ранее жесткие методики элюции не гарантируют соблюдения этого условия, а методы анализа (гель-электрофорез и иммуногистохимия) не позволяют охарактеризовать репертуар специфичности выделенных антител. Целью данного исследования являлся подбор условий выделения плацента-ассоциированных IgG и первичная характеристика их углеводной специфичности.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2019
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2019.-N 1.-С.129-132. Библ. 8 назв.
Просмотров: 30