ВАРИАНТЫ СИНТЕЗИРОВАННОГО В Escherichia coli РЕКОМБИНАНТНОГО ЭРИТРОПОЭТИНА ЧЕЛОВЕКА: ВЛИЯНИЕ ДОПОЛНИТЕЛЬНЫХ ДОМЕНОВ НА АКТИВНОСТЬ in vitro И in vivo

Аннотация:

Целью работы являлась сравнительная характеристика трех вариантов синтезированного в клетках Escherichia coli рекомбинантного эритропоэтина человека с дополнительными белковыми доменами: белка 6His-s-tag-EPO, несущего на N-конце s-tag — 15-звенный олигопептид из рибонуклеазы А поджелудочной железы быка, и белков HBD-EPO и EPO-HBD, содержащих, соответственно, в N-и С-концевых положениях дополнительный гепарин-связывающий домен (НВD) из костного морфогенетического белка В М Р-2 Danio rerio. В качестве препарата сравнения был использован коммерческий препарат эпостим (ООО «Фарма-парк», Россия), полученный синтезом в клетках яичников китайского хомячка. Белок ЕРО-НBD — вариант синтезированного в Е. coli рекомбинантного эритропоэтина с доменом HBD на С-конце, присоединенный к эритропоэтиновому домену жестким междоменным спейсером, — имеет лучшие характеристики по сравнению с белком HBD-EPO с обратной последовательностью соединения доменов. Белок EPO-HBD обладает повышенной в -13 раз биологической активностью in vitro, заключающейся в способности вызывать пролиферацию клеток эритролейкемии человека TF-1, большей скоростью ассоциации с рецептором эритропоэтина EPOR, а также лучшими среди четырех исследованных белков параметрами связывания и пролонгированного выхода из носителя — деминерализованного костного матрикса (ДКМ). При подкожном введении EPO-HBD, иммобилизованного на ДКМ, наблюдается существенно более выраженная васкуляризация окружающих тканей, чем при введении ДКМ с другими белками и ДКМ без нанесенного белка. Таким образом, по всем изученным параметрам белок EPO-HBD обладает лучшими характеристиками в сравнении с другими исследованными вариантами ЕРО, и представляется перспективным изучение возможности его медицинского применения.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2019
Объем: 15с.
Дополнительная информация: 2019.-N 1.-С.85-99. Библ. 36 назв.
Просмотров: 26