КОНСТРУИРОВАНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО ШТАММА BREVIBACILLUS CHOSHINENSIS, ПРОДУЦИРУЮЩЕГО РЕКОМБИНАНТНЫЙ ХИМЕРНЫЙ БОРРЕЛИОЗНЫЙ АНТИГЕН

Аннотация:

Целью работы являлось создание рекомбинантного химерного белка с использованием системы вектор - хозяин Brevibacillus choshinensis (TAKARA, Япония) со встроенным слитным геном dbpAG, состоящим из частей генов dbpA и dbpG, которые кодируют главные антигенные детерминанты декорин-связывающих белков A (DbpA) двух видов возбудителей клещевых боррелиозов - Borrelia afzelii и Borrelia garinii. Такая плазмида должна обеспечить синтез и секрецию в культуральную жидкость стабильного рекомбинантного антигена, состоящего из двух доменов - DbpA В. afzelii (DbpAA) и В. garinii (DbpAAG) - в нашивной конформации и растворимой форме, что важно для его эффективного применения в серодиагностике боррелиозов. Выбор экспрессионной системы TAKARA на основе штамма Brevibacillus choshinensis и плазмиды pNCM02 обусловлен возможностью получения секретируемых целевых белков в растворимом виде в нативной конформации и с сохранёнными антигенными детерминантами. Сконструирована плазмида pNCM02 со слитным геном dbpAAG, которой был трансформирован штамм Brevibacillus choshinensis. Полученный рекомбинантный клон Brevibacillus choschinensis/pNCM02/dbpAAG при культивировании в жидкой питательной среде продуцирует секретируемый белок, который имеет мол. массу около ЗОкД и обладает высокой иммунореактивностью с сыворотками от больных с подтверждённым диагнозом «боррелиоз».

Авторы:

Издание: Клиническая лабораторная диагностика
Год издания: 2018
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2018.-N 7.-С.450-454. Библ. 19 назв.
Просмотров: 22