Оценка терапевтической чувствительности ганглиозных клеток сетчатки в культуре к таргетному пептидному биорегулятору

Аннотация:

Цель — изучить терапевтическую чувствительность культуры клеток сетчатки к пептидному биорегулятору, выделенному из сетчатки крупного рогатого скота (Ретиналамин), при моделировании глаукомной оптиконейропатии. Клетки выделяли из изолированных сетчаток новорожденных мышей. Клеточные пласты дезагрегировали и переводили в форму суспензии. Для удаления неиелевых популяций добавляли антитела для деплеции клеток с маркером CD48 и вносили связывающиеся с ними магнитные антибиотиновые микросферы. Для селекции ганглиозных клеток и получения их обогащенной фракции проводили иммуномагнитную сепарацию. Для проверки токсичности препарата на культуре фибробластов кожи провели цитотоксический тест с разведениями Ретиналамина в концентрациях 5,0—0,009 мг/мл. Клетки рассевали в концентрации 5000 на лунку и экспонировали с препаратом 24 ч. Для изучения эксайтотоксического повреждения в 1-ю группу лунок с клетками сетчатки вносили раствор глутамата натрия до концентрации 20 мМ, во 2-ю группу — Ретиналамин в концентрации 1,25 мг/мл, в 3-ю — оба вещества. Интактные лунки были контрольными. Экспозиция с тестируемыми субстанциями длилась 24 ч. Далее оценивали жизнеспособность клеток колориметрическим методом. Оптическую плотность измеряли автоматическим фотометром с длиной волны детекции 490 нм. Полученная в результате иммуномагнитной сепарации культура является смешанной и представлена ганглиозными и глиальными клетками. Ретиналамин не обладает значимой токсичностью ни в одной из исследованных концентраций. Эксайтотоксическое повреждение вызвало значимое снижение количества жизнеспособных клеток в культуре (9% от контроля). При совместном внесении глутамата и Ретиналамина в его конечной концентрации 1,25 мг/мл количество выживших клеток возросло до 51,6%. Межгрупповые различия статистически значимы при использовании критерия Стьюдента. Ретиналамин не обладает цитотоксичностью. При совместном внесении глутамата и Ретиналамина токсическое действие первого на выделенные клетки сетчатки достоверно снижается.

Авторы:

Издание: Вестник офтальмологии
Год издания: 2019
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2019.-N 1.-С.84-89. Библ. 19 назв.
Просмотров: 27