СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ПЦР-ДИАГНОСТИКИ ЛЕПРЫ ПУТЁМ АМПЛИФИКАЦИИ ВИДОСПЕЦИФИЧНОГО ПОВТОРЯЮЩЕГОСЯ ФРАГМЕНТА ГЕНОМА MYCOBACTERIUM LEPRAE

Аннотация:

Сохранение высокого уровня заболеваемости лепрой в ряде государств мира, а также активизация трансграничных миграционных потоков повышают актуальность эффективной диагностики данного заболевания и в странах со спорадической заболеваемостью лепрой, к которым относится Российская Федерация. Цель исследования - разработка высокочувствительного ПЦР-теста для обнаружения генетического материала Mycobacterium leprae и сравнение его эффективности с коммерчески доступной тест-системой «Leprosy genesig Standard Kit» (Primerdesign Ltd., Великобритания). Предложенный подход заключался в амплификации участка некодирующего повторяющегося элемента генома М. leprae - RLEP. С использованием референсных образцов ДНК патогенных и условно-патогенных микобактерий показана высокая специфичность проводимого анализа, а его сравнение с ПЦР, ориентированной на обнаружение одно-копийных генов М. leprae (rrs.fbp, MntH), продемонстрировало уменьшение порога детекции, выражаемого количеством циклов амплификации, на котором кривая накопления флуоресцентного сигнала превышала базовый уровень. Использование коммерчески доступной тест-системы, основанной на обнаружении однокопийного гена гроВ, обеспечивало 59,4% чувствительность детекции М. leprae в клиническом материале, в то время как применение разработанного подхода повышало этот показатель до 96,8%. Разработанная тест-система для ПЦР-диагностики лепры представлена на государственную регистрацию, после чего её практическое использование позволит решить широкий круг задач по выявлению и подтверждению новых случаев лепры, мониторингу эффективности проводимого лечения, а также эпидемиологическому (в том числе трансграничному) мониторингу распространения данного заболевания.

Авторы:

Издание: Клиническая лабораторная диагностика
Год издания: 2018
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2018.-N 8.-С.511-516. Библ. 27 назв.
Просмотров: 22