ПОЛУЧЕНИЕ И ТЕСТИРОВАНИЕ КЛЕТОК, ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫЕ БЕЛКИ, ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ОПУХОЛЕВОГО МИКРООКРУЖЕНИЯ МЕТОДОМ ИНТРАВИТАЛЬНОЙ МИКРОСКОПИИ

Аннотация:

Метод интравитальной микроскопии широко применяется для исследования механизмов канцерогенеза in vivo, а также ответа на противоопухолевую терапию. Для визуализации опухолевых клеток с помощью интравитальной микроскопии используют клеточные линии, экспрессирующие флюоресцентные белки. Экспрессия экзогенных белков может влиять на скорость роста клеток и их туморогенность, поэтому для адекватного моделирования опухолевого микроокружения необходим анализ морфофункциональных свойств трансду-цированных клеточных линий. Методом лентивирусной трансдукции было получено 6 опухолевых линий мыши, экспрессирующих зеленый или красный флюоресцентный белок. Анализ морфологии, скорости роста и чувствительности к химиотерапии in vitro не выявил существенных различий между исходными и трансдуцированными линиями. Включение генов флюоресцентных белков в геном клеток 4Т1 (рак молочной железы мыши) и B16-F10 (меланома мыши) не влияло на скорость роста опухолей после подкожного введения животным, однако клетки опухоли толстой кишки мыши CT26-GFP и CT26-RFP отторгались начиная с 8-х суток после имплантации. Изучение механизмов отторжения клеток линий CT26-GFP/RFP позволит модифицировать методику трансдукции для получения моделей опухолевого микроокружения, доступных для визуализации in vivo. Трансдуцированные клеточные линии 4Т1 и B16-F10 могут применяться для изучения опухолевых клеток, сосудов и субпопуляций лейкоцитов методом интравитальной микроскопии.

Авторы:

Издание: Клеточные технологии в биологии и медицине
Год издания: 2019
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2019.-N 1.-С.3-11. Библ. 20 назв.
Просмотров: 30