Вариабельность по экспрессии GF.P-reHa в моноклональных клеточных линиях Arabidopsis thaliana

Аннотация:

Создана серия трансгенных моноклональных клеточных линий Arabidopsis thaliana, полученных в результате отбора при агробактериальной трансформации отдельных клеток (клеточных агрегатов) со случайными событиями интеграции GFР-гена. Выход рекомбинантного GFP-белка в созданных клеточных линиях составил от 0,06 до 2,37 % от общего растворимого белка. Выделено три линии с максимально высоким, около 2% от общего растворимого белка, накоплением целевого GFP-белка. Определены районы встраивания инсерций Т-ДНК в растительный геном для 12 моноклональных клеточных линий. Вариабельность по накоплению рекомбинантного GFP-белка среди исследуемых 21 клеточной линии может послужить в качестве референсных значений при геномном редактировании A. thaliana с применением технологии CRISPR/Cas9, направленном на повышение синтеза рекомбинантных белков в растительных системах экспрессии. Линии с максимально высоким уровнем накопления рекомбинантного белка в дальнейшем представляют интерес для выявления и детальной характеристики сайтов интеграции трансгена. Такие сайты могут быть использованы в качестве мишеней для целевой интеграции генов при создании линий-биопродуцентов рекомбинантных белков.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2019
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2019.-N 1.-С.58-67. Библ. 21 назв.
Просмотров: 33