ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ БЕЛКОВ OPRF И АТОХ PSEUDOMONAS AERUGINOSA НА СОЗРЕВАНИЕ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК МЫШЕЙ IN VITRO

Аннотация:

В настоящее время накоплены многочисленные экспериментальные и клинические данные об успешном применении в иммунотерапии онкологических и инфекционных заболеваний клеточных вакцин на основе дендритных клеток (ДК). Цель: исследовать морфологические и иммунофенотипические особенности ДК, генерированных из кпеток-предшественников костного мозга мышей линии BALB/c под воздействием рекомбинантных антигенов OprF и аТох Pseudomonas aeruginosa. Материалы и методы. Препараты. 25 мкг OprF, 50 мкг аТох, сорбированные на 75 мкг гидроксида алюминия (ФГБНУ НИИВС, Россия). Препарат рекомбинантных белков смешивали в равных весовых долях с гелем гидроксида алюминия, разводили в фосфатно-солевом буфере (ФСБ) и проводили сорбцию в течение 12 часов при температуре 4°С. Дендритные клетки (ДК) получали из клеток костного мозга мышей линии BALB/c при культивировании с GM-CSF и IL-4 (Biosource, США). В качестве индуктора созревания использовали белки OprF и аТох P. aeruginosa (15 мкл/мл) и коммерческий TNF-a (20 нг/мл, Biosource, США). Оценку иммунофенотипа ДК осуществляли методом проточной цитометрии. Окраску актинового цитоскелета производили с использованием фаллоидина с флуоресцентным красителем (Alexa Fluor 594 phalloidin, Invitrogen). Результаты. Установлено, что морфологические характеристики дендритных клеток при использовании в качестве индуктора созревания как белков OprF и аТох, так их сочетания с гидроксидом алюминия, не имеют существенных отличий. Исследуемые препараты вызывали снижение численности незрелых клеток (CD34), увеличение клеточной популяции с маркерами адгезии и межклеточных взаимодействий (CD38), антигенной презентации МНСИ, костимулирующими молекулами CD80/CD86 и молекулой терминальной дифференцировки. Но все же белки в присутствии адъюванта активнее стимулировали дифференцировку ДК. Выводы. Кандидатная вакцина против синегнойной палочки на основе ее рекомбинантных белков OprF и аТох индуцирует созревание дендритных клеток из клеток-предшественников костного мозга мышей. Полученные данные расширяют возможности для разработки новых источников индукции созревания дендритных клеток, а также могут служить критерием оценки эффективности разрабатываемой вакцины против синегнойной инфекции.

Авторы:

Издание: Иммунология
Год издания: 2018
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2018.-N 5-6.-С.270-275. Библ. 12 назв.
Просмотров: 24