СВОЙСТВА РЕКОМБИНАНТНОГО МАЛИК-ФЕРМЕНТА У АЭРОБНОГО МЕТАНОТРОФА Methylosinus trichosporium

Аннотация:

Рекомбинантный малик-фермент из облигатного метанотрофа Methylosinus trichosporium получен гетерологичной экспрессией в Escherichia coli и очищен металл-хелатной аффинной хроматографией. Гомогексамерный малик-фермент (6 х 80 кДа) катализировал обратимую реакцию декарбоксилирования малата с образованием пирувата и СО2 в присутствии одно- и двухвалентных катионов и NADP+ в качестве кофактора. Значения kсаt/Km указывали на более высокую каталитическую эффективность фермента в реакции декарбоксилирования малата по сравнению с реакцией карбоксилирования пирувата. Анализ транслированной аминокислотной последовательности белка выявил С-концевой участок, гомологичный последовательности фосфоацетилтрансферазы, однако фосфоацетилтрансферазная активность не обнаружена ни для полноразмерного белка, ни для С-концевого фрагмента, полученного как самостоятельный протеин. С-концевой домен белка оказывал стимулирующее влияние на активность малик-фермента.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2019
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2019.-N 4.-С.532-539. Библ. 27 назв.
Просмотров: 27