ХАРАКТЕРИСТИКА ПОЛУЧЕННОГО МЕТОДОМ МИНИ-Тn5 МУТАГЕНЕЗА ШТАММА Yersinia pestis, ДЕФЕКТНОГО ПО СИНТЕЗУ ЛИПОПОЛИСАХАРИДА

Аннотация:

Для определения генов, продукты которых позволяют Yersinia pestis уклониться от действия антибиотиков катионно-пептидной природы, использовали стратегию ненаправленного инсерционного мутагенеза при помощи мини-транспозона Тп5с последующим скринингом библиотеки, позволяющим обнаружить чувствительные к полимиксину Б мутанты. Для одного из них охарактеризована мутация, ответственная за полимиксин-чувствительный фенотип, и определена структура липополисахарида (ЛПС). В штамме Y. pestis КМ218-АЗ мини-Тn5 находился в начале открытой рамки считывания, продукт которой на 82% идентичен белку GmhB Е. coli, выполняющему функцию D-глицеро-D-манно-гептозо-1,7-дифосфатфосфатазы. Массспектр ESI ICR FT с регистрацией анионов немодифицированного ЛПС штамма Y. pestis КМ218-АЗ позволил выявить молекулы с полным кором или неполным кором двух типов: один состоял только из дисахаридов Kdo-Kdo и Ko-Kdo, а другой - из трисахаридов Hep-(Kdo)-Kdo или Hep-(Ko)-Kdo. Проведенная комплементация подтвердила, что полученный дефект в биологических свойствах мутантного штамма являлся следствием инактивации гена gmhB. Продемонстрировано, что продукт гена gmhB необходим Y. pestis для образования «дикого» типа ЛПС, устойчивого к антимикробным пептидам и сыворотке крови.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2019
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2019.-N 4.-С.540-549. Библ. 43 назв.
Просмотров: 37