ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ДАННЫЕ ОБ ОПТИМИЗАЦИИ ТЕХНОЛОГИЙ ДЛИТЕЛЬНОГО СОХРАНЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ СЫВОРОТОК С АНТИТЕЛАМИ К ECHINOCOCCUS SPP. И TOXOCARA SPP. В УСЛОВИЯХ НИЗКИХ ТЕМПЕРАТУР

Аннотация:

Научное обоснование технологий и управления процессами сохранения функциональной активности сывороток при формировании паспортизированных и стандартизированных коллекций определены задачами стратегии развития здравоохранения Российской Федерации в рамках реконструкции Национального Банка сывороток. В Правилах ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований (ГОСТ Р 53079.4-2008) для стабилизации аналитов в пробах крови (сыворотки) установлены требования к срокам хранения сывороток крови: не более 4 часов - при комнатной температуре; 4 дня - при температуре холодильника( +4°), и до одного года -замораживание при -20°С, дополнительно указывается в методических указаниях хранение при -40°С без указания срока хранения («длительном хранении»). Известно, что активность антител сывороток крови при длительном их хранении снижается за счет необратимых изменений физико-химического состояния и утраты функциональных свойств. Последующие исследования подтвердили, что при умеренной температуре в образцах крови происходят окисление и протеолитическая деградация белков, при этом степень их выраженности возрастает с повышением температуры. При температуре +4°С длительное хранение сывороток приводит к потере активности, в первую очередь, иммуноглобулинов класса М (Ig М). Наиболее широко применяются технологии длительного хранения сывороток in vitro при низких и ультранизких температурах замораживания. По данным Tucker M.J., Liebermann J. (2007), с понижением температуры от -37°С до -130°С происходит кристаллизация внеклеточной жидкости и адсорбированной воды вокруг белков в виде гелеобразных структур. Rail и Fahy (1985) считают, что при достижении такого стеклоподобного состояния останавливаются процессы химической и физической деградации объекта. Наиболее продуктивно холодовые технологии применяются при производстве банка крови, биологических препаратов из плазмы крови, а также в репродуктивной медицине - для криоконсервации гамет, эмбрионов, фрагментов тканей. Бругеллер и Майер (1980) показали, что добавление в среду для замораживания криопротекторов предотвращают развитие терминальных криоповреждений в биосистемах за счет образования водородных связей между молекулами воды и уменьшения температуры замерзания аналитов. Н.А. Максимов (1948) описал криозащитное свойство у многоатомного спирта глицерина. Благодаря наличию ОН-радикала, глицерин образует водородные связи с молекулами воды, растворяется в ней в любых соотношениях, что определяет его высокую криопротекторную активность. В то же время немногочисленны данные о влиянии глицерина на функциональную стабильность антител при их длительном нахождении в условиях низких температур, зависимости формирующихся эффектов от концентрации глицерина, времени и температуры совместной инкубации, что послужило обоснованием направления и цели научного поиска. Цель исследования: Оптимизация технологии длительного хранения функциональной активности сывороток с антител к Echinococcus spp. и Toxocara spp. в условиях низких температур.

Авторы:

Издание: Медицинская паразитология и паразитарные болезни
Год издания: 2018
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2018.-N 4.-С.26-32. Библ. 19 назв.
Просмотров: 12