ПОЛУЧЕНИЕ И ОЧИСТКА РЕКОМБИНАНТНОИ ДИПЕПТИДИЛПЕПТИДАЗЫ 4 TENEBRIO MOLITOR

Аннотация:

Дипептидилпептидаза 4 — уникальная пролин-специфичная пептидаза, способная гидролизовать связи, образованные остатком пролина, отщепляя с N-конца пептидов и белков дипептид, содержащий остаток этой аминокислоты в положении Р1. В экспрессионной системе Pichiapastoris впервые получен препарат рекомбинантной дипептидилпептидазы 4 из насекомого Tenebrio molitor и предложен способ его очистки. Аутентичность полученного рекомбинантного фермента подтверждена масс-спектрометрически. Использование полученного препарата фермента Т. molitor перспективно для проведения гидролиза труднорасщепляемых богатых пролином пептидов и белков, в частности проламинов — запасных белков семян злаковых растений, не гидролизуемых полностью пищеварительными ферментами человека и вызывающих у предрасположенных людей аутоиммунное заболевание желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) — целиакию. Пролин является единственной аминокислотой среди двадцати природных протеиногенных аминокислот. В связи с этим богатые пролином белки обладают рядом структурных особенностей. Находясь внутри полипептидной цепи, пролин формирует такую ее конформацию, которая препятствует деградации богатых пролином белков пептидазами широкого спектра действия. В природе гидролиз пролинсодержащих белков осуществляется преимущественно под действием особой группы протеолитических ферментов — пролин-специфичных пептидаз (ПСП). Важными представителями богатых пролином белков являются проламины — запасные белки семян злаковых растений, составляющие основу рациона большинства населения. В структуре проламинов содержится до 30% аминокислотных остатков пролина и до 50% остатков глутамина. Некоторые пептиды проламинов, главным образом, глиадинов из семян пшеницы, устойчивые к протеолизу пищеварительными пептидазами человека, вызывают у предрасположенных людей аутоиммунное заболевание тонкого кишечника — целиакию. Цель работы — получение рекомбинантной формы пищеварительной ДПП4 насекомого Tenebrio molitor, вредителя зерновых культур, для которого проламины являются главными пищевыми белками.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2019
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2019.-N 3.-С.231-236. Библ. 30 назв.
Просмотров: 24