ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ЭМБРИОНА ПО ПРОФИлСЕЮ ЭКСПРЕССИИ МАЛЫХ НЕКОДИРУЮЩИХ РНК В КУАЬТУРАЛЬНОЙ СРЕДЕ ЭМБРИОНА В ПРОГРАММАХ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ РЕПРОДУКТИВНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ

Аннотация:

Цель исследования. Изучение профиля малых некодирующих РНК (microRNA и piwiRNA) в культуральной среде эмбриона на 4-е сутки культивирования для идентификации потенциальных биомаркеров качества эмбриона. Материалы и методы. Применен метод глубокого секвенирования для идентификации спектра малых некодирующих РНК (мнРНК), присутствующих в полости бластоцисты и в культуральной среде эмбриона, количественная оценка которых в 48 образцах культуральной среды эмбрионов, перенесенных в полость матки, была проведена методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени. Результаты. С помощью дискриминантного анализа методом частных наименьших квадратов(РЬЗ-ЭА) был проанализирован вклад шести мнРНК в определение качества эмбриона, характеризуемый значением параметра важности переменной в проекции (variable importance in projection - VIP). В результате анализа было выявлено, что наибольший вклад имеют четыре мнРНК: piR020401 (VIP=1,46027), let-7c-5p (VIP=l, 17416), let-7b-5p (VIP=0,994657), let-7i-5p (VIP=0,942665), а наименьший: miR-143-5p (VIP=0,623108) и miR-92a-3p (VIP=0,471951). Методом ранговой корреляции no Спирмену выявлена статистически значимая корреляция между уровнем экспрессии мнРНК (hsa-let-7b-5p, hsa-let-7c-5р, hsa-piR020401) в среде культивирования и качеством переносимого в полость матки эмбриона. Использование непараметрического критерия Манна—Уитни выявило статистически значимые отличия уровня экспрессии piR020401 и miR-92a-3p в среде культивирования эмбрионов, формирующих группы по морфофункциональным параметрам. Заключение: мнРНК (let-7c-5p, let-7b-5p, piR020401), обнаруженные в культуральной среде, статистически значимо коррелируют с морфофункциональными характеристиками эмбриона на 4 сутки после оплодотворения, среди которых наибольший вклад в определение качества эмбриона вносит piR020401. Уровень экспрессии miR-92a-3p и piR020401 в культуральной среде зависит от стадии развития эмбриона, дифференцируя стадию морулы и бластоцисты. Учитывая, что отставание в скорости развития эмбриона к пятым суткам культивирования не всегда предопределяло отсутствие имплантации эмбриона в матку, ориентироваться исключительно на морфологические параметры эмбриона при выборе кандидата на перенос в полость матки нецелесообразно, а рекомендуется дополнительно оценивать профиль экспрессии let-7c-5p, let-7b-5p, miR-92a-3p, piR020401 на 4 сутки культивирования эмбриона. Таким образом, полученные данные позволяют оптимизировать выбор эмбриона и проведение программы вспомогательных репродуктивных технологий.

Авторы:

Издание: Акушерство и гинекология
Год издания: 2019
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2019.-N 6.-С.78-86. Библ. 23 назв.
Просмотров: 36