РЕСВЕРАТРОЛ СПОСОБСТВУЕТ ДИФФЕРЕНЦИРОВКЕ in vitro ОСТЕОБЛАСТОВ МС3Т3-Е1 ПУТЕМ ПОТЕНЦИРОВАНИЯ КАЛЬЦИНЕУРИН/NFATC1 - ОПОСРЕДОВАНННОГО СИГНАЛЬНОГО ПУТИ

Аннотация:

Ранее было показано, что ресвератрол (RSVL) может стимулировать in vitro дифференцировку остеобластов МСЗТЗ-Е1. Однако механизмы, лежащие в основе анаболического влияния ресвератрола на остеобласты, остаются в большей части невыясненными. Целью настоящей работы являлось изучение молекулярного механизма действия ресвератрола на процесс дифференцировки клеток МСЗТЗ-Е1. Эти клетки на протяжении 8 дней подвергали обработке различными концентрациями ресвератрола (10 в -8 степени моль/л-10 в -6 степени моль/л) и циклоспорина А (является специфическим ингибитором калцинеурин/NFАТ-опосредованного сигнального пути) в концентрации 10 в -6 моль/л. На основании результатов предварительных тестирований клеточной пролиферации и определения активности щелочной фосфатазы, нами была определена концентрация ресвератрола, равная 10 в -7 степени моль/л, которую затем использовали в последующих экспериментах. Определение уровня экспрессии мРНК и белка, кодируемых генами, ассоциированными с процессом остеоза, а именно, генами CaN, NFATcl и Runx2 осуществляли с помощью ОТ-ПЦР в реальном времени и вестерн-блоттинга соответственно. Было обнаружено, что ресвератрол вызывает повышение экспрессии генов CaN, NFATcl и Runx2 с образованием соответствующих мРНК и белков по сравнению с контрольной группой (р<0,05). Циклоспорин А, напротив, снижал стимулирующий эффект ресвератрола (р<0,05). С помощью и иммуногистохимических методов показано, что обработка клеток ресвератролом приводит к накоплению белка NFATcl в клеточных ядрах. Обработка клеток циклоспорином А вызывает ингибирование индукции ресвератролом накопления белка NFATcl. Ресвератрол оказывает свое действие на остеобласты при участии CaN/NFATc1-опосредованного сигнального пути.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2019
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2019.-N 8.-С.1139-1146. Библ. 23 назв.
Просмотров: 29