Применение конфокальной микроскопии в фундаментальных исследованиях и клинической практике эндокринолога: современные возможности

Аннотация:

Конфокальная микроскопия - современный метод визуализации, открывающий широкие возможности для исследований in vitro и in vivo. В клинической части обзора основное внимание уделено прочно вошедшим в практику методикам, таким как конфокальная микроскопия роговицы при диагностике диабетической нейропатии или эндокринной офтальмопатии; кратко описаны новые методики (интраоперационная оценка тканей, получаемых при удалении аденом гипофиза, щитовидной и околощитовидной желез). В части, посвященной фундаментальным исследованиям, рассматривается использование конфокальной микроскопии для характеристики колокализации белков, а также трехмерных внутриклеточных структур и сигнальных путей in vivo. Диализируются индикаторы внутриклеточного кальция. Конфокальная микроскопия - принцип работы: Конфокальная микроскопия (КМ) характеризуется высоким пространственным разрешением и контрастированием изображений. В КМ может использоваться как отраженный свет, так и различные флуорофоры, испускающие свет определенной длины волны. В традиционном микроскопе весь образец, находящийся в поле зрения, одновременно освещается и визуализируется, что сопровождается высоким уровнем фонового сигнала (шума) из-за освещения участков образца вне фокальной плоскости. Это снижает качество изображения. В конфокальном же микроскопе проблема решается за счет использования специальной диафрагмы (пинхола), расположенной в плоскости промежуточного изображения. Такая диафрагма пропускает только небольшое количество световых лучей от точечного участка образца, находящегося в фокальной плоскости и, таким образом, ограничивает фоновую засветку. Размер детектируемого фокусного пятна определяется диаметром диафрагмы и сопоставим с длиной волны возбуждающего света (порядка 500 нм). В связи с потерей интенсивности полезного сигнала в КМ в качестве детекторов применяют высокочувствительные фотоэлектронные умножители.

Авторы:

Издание: Проблемы эндокринологии
Год издания: 2019
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2019.-N 3.-С.174-183. Библ. 50 назв.
Просмотров: 20