ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БАКТЕРИЦИДНОГО ДЕЙСТВИЯ МОЧЕВИНЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ПОВЕРХНОСТНЫХ СТРУКТУР YERSINIA PSEUDOTUBERCULOSIS 0:1b И ИХ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ И АНТИГЕННЫЕ СВОЙСТВА

Аннотация:

Псевдотуберкулез - заболевание, вызываемое грамотрицательной бактерией Yersinia pseudotuberculosis с фекально-оральным механизмом передачи и характеризующееся полиморфизмом клинических проявлений с преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта, кожи, опорно-двигательного аппарата и выраженной интоксикацией, затрудняющих клиническую диагностику. Одним из основных подходов для диагностики псевдотуберкулеза является использование серологических методов, усовершенствование которых остается актуальным до настоящего времени. Поскольку наиболее специфичные иммунодоминантные антигены располагаются в поверхностных структурах микробной клетки, выделение из них антигенов и использование их в диагностике может представлять практический интерес. Цель работы - выделение и характеристика антигенов поверхностных структур псевдотуберкулезного микроба, перспективных для конструирования диагностических тест-систем. В работе использовался штамм У. pseudotuberculosis 3704 0:1b, из которого получены поверхностные структуры клетки путем лизиса и одновременного обеззараживания живых клеток 4,5 М раствором мочевины с последующим дифференциальным центрифугированием. Экстракцию липополисахари-дов (ЛПС) из клеток проводили смесью фенол-вода с получением водной и фенольной фракций. Гипериммунные сыворотки получали путем иммунизации кроликов породы «шиншилла» препаратами НМ и БЛПК псевдотуберкулезного микроба. Из бактериальной массы клеток У. pseudotuberculosis 3704 получены препараты наружных мембран (НМ), мочевинного экстракта (МЭ) и белково-липополисахаридного комплекса (БЛПК), а также водная и фенольная фракции ЛПС. Содержание белка в препаратах У. pseudotuberculosis 3704 составило: НМ - 30,5 % ± 2,0 %, МЭ - 37,8 % ± 3,0 %, БЛПК - 24,0 % ± 0,4 %. Посредством электрофоретического фракционирования в денатурирующих условиях по методу Laemmli в 12 % полиакриламидном геле выявлены полипептидные спектры изучаемых препаратов. При окраске ионами серебра в препарате НМ установлено наличие 14 мажорных полипептидов, тогда как при окраске раствором Coomassie Brilliant Blue R-250 - 10 мажорных полипептидов с молекулярными массами от 131,5 до 13,9 кДа и от 104,6 до 18,4 кДа, соответственно. В препарате МЭ при окраске ионами серебра выявлено 16 мажорных полипептидов, при окраске раствором Coomassie Brilliant Blue R-250 - также 16 мажорных полипептидов с молекулярными массами от 91,5 до 13,5 кДа, и от 101,6 до 14,7 кДа, соответственно. Мажорные полипептиды с массами 43,3, 39,8, 29,7, 24,4 кДа явились общими у препаратов НМ и МЭ.

Авторы:

Издание: Дальневосточный журнал инфекционной патологии
Год издания: 2019
Объем: 2с.
Дополнительная информация: 2019.-N 37.-С.93-94. Библ. 0 назв.
Просмотров: 29