АНТИТЕЛА К ПРОТЕКТИВНОМУ АНТИГЕНУ BACILLUS ANTHRACIS, ОБЕСПЕЧИВАЮЩИЕ ЗАЩИТУ ПРОТИВ СИБИРЕЯЗВЕННЫХ ТОКСИНОВ

Аннотация:

Моноклональные антитела (МКАт) к компонентам летального токсина В. anihracis рассматриваются в качестве эффективного препарата для терапии сибиреязвенной инфекции, особенно поздних стадий заболевания. Эффективность терапии подтверждена в экспериментах на лабораторных животных. Важным требованием к таким МКАт является проявление ими токсиннейтрализующей активности в отношении сибиреязвенных токсинов, что можно выявить в моделях in vitro и in vivo. В предыдущих работах нами были получены мышиные моноклональные антитела к субъединице летального токсина В. anthracis - протективному антигену (ПА). Экспериментальные исследования позволили выявить МКАт, способные эффективно нейтрализовать летальный токсин (клон 1Е10), взаимодействующее с эпитопом в IV домене ПА. Цель работы - создание рекомбинантного химерного моноклонального антитела xi1E10 на основе мышиного антитела 1Е10. Из гибридомы-продуцента Sp-2/1E10 выделяли тотальную РНК и амплифицировали кДНК Fab-фрагмента методом 5'-RACE. После секвенирования полученных нукпеотидных последовательностей синтезировали праймеры для амплификации вариабельных доменов VH и VL и клонировали ПЦР-продукты в два экспрессирующих вектора, которые содержали константные домены тяжелой и легкой цепи человеческого иммуноглобулина lgG1. Проверку правильности сборки генетических конструктов оценивали после совместной трансфекции двух векторов в клетки НЕК293Т по положительной реакции культуральной жидкости с ПА в реакции ИФА.

Авторы:

Издание: Дальневосточный журнал инфекционной патологии
Год издания: 2019
Объем: 2с.
Дополнительная информация: 2019.-N 37.-С.98-99. Библ. 0 назв.
Просмотров: 23