ИССЛЕДОВАНИЕ БИОПЛЕНКООБРАЗОВАНИЯ У ШТАММОВ VIBRIO CHOLERAE ИЗ ОБЪЕКТОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Аннотация:

Формирование биопленочных сообществ возбудителем холеры в природных условиях является одной из форм адаптации Vibrio cholerae к агрессивным факторам окружающей среды. В целом процесс биопленкообразования состоит из несколько этапов: первичное прикрепление планктонной формы клеток к субстрату под действием адгезинов и физико-химических взаимодействий, активный синтез межклеточного матрикса [Teschler, 2015], интенсивное клеточное деление и распространение клеток путем дисперсии верхнего слоя биопленки [Femandez-Delgado, 2016]. В поверхностных водоемах биопленкообразование V. cholerae зависит от содержания питательных и токсичных веществ, активности солнечной радиации, температуры, водородного показателя (рН), силы тока воды [Fer-nandez-Delgado,2016] и др. Однако адаптационный потенциал отдельных вариантов холерного вибриона во многом определяется особенностями организации генетических детерминант биопленкообразования, а одной из причин устойчивости биопленки к неблагоприятным условиям окружающей среды, является вибриоидный зкзополисахарид (VPS), кодируемый кластерами генов vpsA-K и vpsL-Q [Silva, 2016]. Поскольку известна вариабельность свойств штаммов V. cholerae разных серогрупп, то логично предположить, что и процессы формирования ими биопленок будут иметь различия. В то же время изучение биопленкообразования холерного вибриона представляет не только научный, но и практический интерес, поскольку при установлении определенных закономерностей возрастает точность прогнозирования эпидемиологических рисков, связанных с выживаемостью и персистенцией холерного вибриона в окружающей среде. Цель работы - исследовать фенотипические и молекулярные особенности процессов биопленкообразования у штаммов V. cholerae 01 и не 01/0139 серогрупп, а также R-вариантов, изолированных в рамках мониторинга вибриофлоры из поверхностных водоемов Сибири и Дальнего Востока. В качестве объектов исследования использовали семь штаммов V. cholerae, не имеющих в геноме основных факторов патогенности (ctx-tcp-). Культивирование поверхностных биопленок проводили на 1 % пептонной воде рН 7,6 при 37 °С в течение 72 ч с последующим отбором проб через 0, 4, 6, 8, 24, 48 и 72 ч. Фенотипические особенности биопленок исследовали с помощью метода сканирующей электронной микроскопии (SEM). Нуклеотидные последовательности генов биопленкообразования получали на основании анализа полных геномов исследуемых штаммов V. cholerae и сравнения их с геномом референсного штамма холерного вибриона (Vibrio cholerae 01 biovarE!TorN1696). WGS проводили на платформе MiSeq (lllumina). Экспрессию четырех генов кластера vps(vpsA и vpsL-структурные, vpsRw vpsT- регуляторные) [Lambert, 2016] изучали, применяя полимеразную цепную реакцию в режиме реального времени (PGR real time) и метод 2"MCT[Rao, 2013], при этом в качестве референсного использовали ген «домашнего хозяйства».

Авторы:

Издание: Дальневосточный журнал инфекционной патологии
Год издания: 2019
Объем: 2с.
Дополнительная информация: 2019.-N 37.-С.99-100. Библ. 0 назв.
Просмотров: 40