ДНК-АПТАМЕРЫ К ЭКЗОСАЙТУ I ТРОМБИНА. СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ВЗАИМОСВЯЗИ И АНТИТРОМБОТИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ

Аннотация:

ДНК-аптамеры (олигонуклеотиды), взаимодействующие с экзосайтом I тромбина, имеют в своем составе структуру G-квадруплекса, две Т-Т- и одну T-G-T-петли. Они препятствуют связыванию экзосайта I с фибриногеном и рецепторами тромбина на поверхности тромбоцитов и благодаря этому подавляют стимулируемые тромбином образование фибрина из фибриногена и агрегацию тромбоцитов. Ранее мы синтезировали оригинальный антитромбиновый аптамер RE31 (5'-GTGACGTAGGTTGGTGTGGTTGGGGCGTCAC-3'), содержащий (кроме G-квадруплекса) шарнирную область, соединенную с шестью парами комплементарных оснований (дуплексная область). В настоящей работе сравнивали свойства аптамера RE31 с его аналогами, содержащими разное количество оснований в дуплексной области и вставки нуклеотидов в шарнирной области. Уменьшение количества нуклеотидов в дуплексной области на 1—4 пары (по сравнению с аптамером RE31) приводило к снижению стабильности структуры аптамеров (более низкие температуры плавления) и снижению их способности ингибировать стимулированное тромбином образование фибрина в плазме крови человека в тестах тромбинового, протромбинового и активированного частичного тромбопластинового времени. В то же время увеличение количества оснований на 1—2 пары не вызывало существенных изменений стабильности и антитромбиновой активности аптамеров. Вставки в шарнирной области аптамера RE31 приводили к снижению антитромбиновой активности. Исследование антитромботических свойств RE31 показало, что он: 1) замедляет образование тромбина в плазме крови человека (тест генерации тромбина), 2) ускоряет растворение фибринового сгустка тканевым активатором плазминогена в модели in vitro, и 3) подавляет артериальное тромбообразование в модели in vivo. На основании полученных данных аптамер RE31 может рассматриваться как потенциально эффективное антитромботическое соединение.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2019
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2019.-N 12.-С.1876-1885. Библ. 25 назв.
Просмотров: 10