СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЬТУР СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЭПИТЕЛИЯ РОГОВИЦЫ ЧЕЛОВЕКА И СОЗДАНИЕ БИОСОВМЕСТИМОГО КОМПОЗИТА СО СТВОЛОВЫМИ КЛЕТКАМИ

Аннотация:

В последние годы аутогенные стволовые клетки переднего эпителия роговицы все шире исследуются для лечения дегенеративных заболеваний этой прозрачной части наружной оболочки глаза человека. В качестве специализированного депо данных клеток в органе зрения рассматривается лимб. Разработано несколько способов выделения стволовых клеток из эпителия лимба роговицы и их культивирования in vitro. Цель работы: проанализировать возможности двух методов получения культур эпителиальных стволовых клеток переднего эпителия роговицы (СКР) — эксплантного и суспензионного, по критериям эффективности пролиферации, временных затрат и постоянства морфофункциональных параметров клеточной культуры, изучить биосовместимость СКР с офтальмологическими гелевыми препаратами для использования в составе биокомпозита, пригодного к применению в клинической практике. Первичные монослойные культуры СКР были получены двумя методами (эксплантным и суспензионным) из биоптатов неповрежденного участка лимба роговицы 10 пациентов в возрасте от 39 до 73 лет, страдающих различными видами кератопатий. При сравнительном анализе культур СКР исследовали морфологию клеток, определяли их жизнеспособность, пролиферативный потенциал и иммунофенотип. Было показано, что эксплантный метод является более эффективным по сравнению с суспензионным, поскольку позволяет в более короткие сроки нарастить значительное количество клеток с эпителиоподобной морфологией. Популяция клеток была представлена преимущественно эпителиальными СКР: 95% клеток синтезировали белок К19. Индекс пролиферации СКР, выделенных эксплантным методом, составлял 3,5-4,0, время удвоения популяции при культивировании в среде DMEM/F12 с 10 нг/мл ЭФР — 48 ч. С помощью эксплантного метода из одного биоптата лимба (1 х2 мм) получали биомассу СКР в количестве 4,0±1,2 млн клеток в течение 3-4 недель (1 -2 пассажей). При исследовании ряда коммерческих гелевых препаратов на биосовместимость с клетками препарат Провиск оказался лучшим по этому показателю, что дает возможность рекомендовать его в качестве носителя для клеток при изготовлении биомедицинских клеточных продуктов.

Авторы:

Издание: Гены @ Клетки
Год издания: 2019
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2019.-N 4.-С.29-34. Библ. 27 назв.
Просмотров: 14