СРАВНЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ДОСТУПНЫХ ИСТОЧНИКОВ АУТОГЕННЫХ КОЛОНИЕФОРМИРУЮЩИХ ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК

Аннотация:

Колониеформирующие эндотелиальные клетки (КФЭК) являются ценным материалом для тканевой инженерии сосудов и клеточной терапии ишемизированных тканей. Основная проблема использования КФЭК касается сложности их получения. В литературе описано выделение КФЭК из периферической крови и жировой ткани. Цель настоящего исследования: сравнительная оценка эффективности получения КФЭК без использования клеточной сепарации из периферической крови, подкожной и перикардиальной жировой ткани. КФЭК выделяли из периферической крови, подкожной и эпикардиальной жировой ткани 8 пациентов мужского пола с диагнозом ишемическая болезнь сердца, направленных на плановую операцию коронарного шунтирования. Стромально-васкулярную фракцию из подкожного (СВФ-ПЖ, n=8) и эпикардиального жира (СВФ-ЭЖ, n=8), а также мнонуклеарную фракцию крови (МНФ, n=8) культивировали в полной питательной среде EGM-2. Фенотип полученных культур определяли с помощью проточной цитометрии и конфокальной микроскопии, пролиферативную активность оценивали на анализаторе xCELLigence, способность формировать капилляроподобные структуры изучали на Матригеле in vitro. КФЭК были выделены из 50% образцов МНФ, 12,5% образцов СВФ-ПЖ и 37,5% СВФ-ЭЖ. 75% культур КФЭК из МНФ демонстрировали высокую и среднюю пролиферативную активность, тогда как КФЭК из жировой ткани в основном обладали низким уровнем пролиферации. Пересев клеточных культур из МНФ, содержащих колонии КФЭК, позволял избавиться отгемопоэтических клеток, и к 3 пассажу получить чистые культуры КФЭК (более 99%) без использования клеточной сепарации. Клеточные культуры из жировой ткани, сформировавшие колонии КФЭК, были гетерогенны и содержали, кроме КФЭК, активно пролиферирующие мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК). При данном способе выделения клеток периферическая кровь представляет собой более эффективный источник аутогенных КФЭК по сравнению с жировой тканью. Однако из жировой ткани могут быть получены аутогенные ММСК и смешанные культуры ММСК и эндотелиальных клеток.

Авторы:

Издание: Гены @ Клетки
Год издания: 2019
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2019.-N 4.-С.35-45. Библ. 40 назв.
Просмотров: 13