ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ ИЗ КЛЕТОЧНОЙ БИОМАССЫ МИКРОВОДОРОСЛИ CHLORELLA VULGARIS И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИХ КОЛИЧЕСТВА ФОТОКОЛОРИМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ

Аннотация:

Нуклеиновые кислоты хлореллы участвуют в передаче закодированной генетической информации от поколения к поколению микроводоросли, обеспечивая сохранность и долговечность вида. Информация о количестве нуклеиновых кислот, присутствующих в хлорелле, позволит в дальнейшем создать препараты на основе ДНК и РНК в виде натриевых солей. Представлены результаты количественного анализа нуклеиновых кислот в зеленой микроводоросли Chlorella vulgaris (штамм ИФР № С-111). Щелочной и кислотный гидролиз РНК и ДНК из биомассы данного микроорганизма проводился по адаптированному и приспособленному биохимическому методу Шмидта-Тангаузера. Разработан и модернизирован эффективный метод фотоколориметрического определения количества ДНК и РНК в гидролизате по специфическим цветным реакциям на углеводные мономеры дезоксирибозу и рибозу соответственно, с использованием 96-луночного планшетного фотометра-ридера, применяемого для иммуноферментного (ИФА) скрининга. Определен экспериментально оптимальный светофильтр на 620 нм (оранжевый) для регистрации окрашенных соединений дезоксирибозы и рибозы после цветных реакций специфическими растворами реагентов дифениламина и орцина. Построены соответствующие градуировочные зависимости с коэффициентом линейности не менее r = 0,999 для количественного определения ДНК и РНК в объеме гидролизатов, что позволило определить количество нуклеиновых кислот в навеске биомассы Chlorella vulgaris.

Авторы:

Издание: Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии
Год издания: 2020
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2020.-N 1.-С.36-41. Библ. 14 назв.
Просмотров: 29