ОЧИСТКА ПРОТЕАЗЫ - АКТИВАТОРА ПРОТЕИНА С ПЛАЗМЫ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА, ПРОДУЦИРУЕМОЙ МИКРОМИЦЕТОМ Aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D

Аннотация:

Протеин С — витамин-К-зависимый антикоагулянтный белок, образующийся главным образом в печени и эндотелии в форме неактивного одноцепочечного профермента. Активная форма протеина С образуется в результате ограниченного протеолиза профермента под действием комплекса тромбина с тромбомодулином и представляет собой сериновую протеазу. Функция активной формы протеина С заключается в ингибировании процесса свертывания крови за счет стимуляции фибринолиза и прерывания тромбиногенеза. Вследствие важной физиологической роли протеина С в медицине существуют различные методы определения его функциональной активности, необходимые для диагностики ряда заболеваний системы гемостаза и их своевременной профилактики. В основе подавляющего большинства этих методов лежит использование активаторов протеина С из яда змей, чаще всего — южноамериканского медноголового щитомордника Agkistrodon contortrix contortrix. Ограниченная доступность ключевого компонента препятствует более широкому использованию диагностических методов в практике. Ранее было показано, что ряд штаммов микромицета Aspergillus ochraceus секретирует протеазы, обладающие способностью активировать протеин С. Эти белки по ряду свойств сходны с активаторами, получаемыми из змеиного яда. В частности, они обладают высокой тромбино- и плазминоподобной активностями и специфически расщепляют соответствующие хромогенные пептидные субстраты. Поэтому активаторы протеина С, продуцируемые микромицетами A. ochraceus, могут рассматриваться как потенциально более доступные аналоги активаторов из змеиного яда. Разработан метод очистки протеазы — активатора протеина С плазмы крови человека из культуральной жидкости микромицета Aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D. Свойства этого белка близки свойствам активатора протеина С из яда змеи Agkistrodon contortrix contortrix, который используется в современной лабораторной диагностике протеина С. Метод представляет собой комбинацию фракционирования сульфатом аммония и гидрофобной, ионообменной и гель-проникающей хроматографии. В результате был получен высокоочишенный препарат активатора протеина С, удельная активность которого в процессе очистки возросла более чем в 350 раз.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2020
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2020.-N 1.-С.39-44. Библ. 25 назв.
Просмотров: 26