СБОРКА КОМПЛЕКСА 30S СУБЪЕДИНИЦЫ РИБОСОМЫ И ФАКТОРА RbfA S. aureus in vitro ДЛЯ СТРУКТУРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Аннотация:

Связывающий рибосому фактор RbfA из золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus) является белком холодовой адаптации и требуется для роста патогенных клеток при пониженных температурах (10—15°С) RbfA участвует в процессинге 16S рРНК, а также в сборке и стабилизации малой 30S субъединицы рибосомы. Изучение структуры и функции RbfA, структуры комплекса фактора с малой субъединицей, а также механизма их связывания поможет лучше разобраться в деталях такого сложного и фундаментального процесса, как сборка 30S субъединицы рибосомы, определяющего и контролирующего общий уровень биосинтеза белка в целом. В работе описаны протоколы получения фактора RbfA и малых субъединиц рибосом S. aureus, а также оптимизированный протокол сборки и очистки комплекса 30S субъединицы и фактора RbfA для дальнейших структурных исследований методом криоэлектронной микроскопии. КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Staphylococcus aureus, рибосома, криоэлектронная микроскопия, RbfA, фактор трансляции, сборка 30S субъединицы рибосомы. Золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) в настоящее время является одним из самых распространенных и опасных патогенных микроорганизмов. Эти грамположительные бактерии вызывают множество больничных и внебольничных заболеваний дыхательных путей и кожных покровов человека. Основным методом борьбы с патогеном является антибиотикотерапия, однако ее эффективность постоянно снижается за счет прогрессирующей резистентности стафилококка к используемым против него антибиотикам. Существуют штаммы S. aureus, такие как, например, метициллин-устойчивый золотистый стафилококк (methicillinresistant Staphylococcus aureus, MRSA), имеющие множественную устойчивость к антибиотикам последних классов. Ключевым элементом абсолютно любой живой клетки, контролирующим общий уровень её жизнедеятельности, является рибосома. Количество рибосом и их функциональная активность определяют общий уровень синтеза белка на каждом этапе нормального развития клетки и в стрессовых условиях. Рибосома — это макромолекулярный РНК-белковый комплекс, сборка которого является сложным процессом, включающим в себя сопряженные этапы биосинтеза рРНК и белков большой и малой субъединиц, их модификаций, сворачивания и связывания друг с другом.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2020
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2020.-N 5.-С.637-646. Библ. 27 назв.
Просмотров: 28