NOTCH-ЗАВИСИМАЯ АКТИВАЦИЯ ОСТЕОГЕННОГО ПОТЕНЦИАЛА КЛЕТОК ПЕРИОДОНТА

Аннотация:

Стволовые клетки периодонта — перспективный материал для стоматологии и челюстно-лицевой хирургии. Сигнальный путь Notch является одним из ключевых в отношении поддержания стволовых и дифференцировочных свойств стволовых клеток. Целью данной работы было выяснить, каким образом сигнальный путь Notch влияет на остеогенный потенциал периодонтальных стволовых клеток (СК). Материалы и методы. В работе использовали лентивирусную трансдукцию периодонтальных СК, добавляя различное количества вируса (1, 3, 5, 15 MOI), несущего последовательность, кодирующую активированный внутриклеточный домен рецептора Notchl — NICD. С помощью метода ПЦР в реальном времени анализировали изменения уровней экспрессии остеогенных маркеров (RUNX2, COL1A1, OGN, POSTN) в зависимости от силы активации сигнального пути Notch. Мы определяли степень активации Notch, детектируя уровень экспрессии гена-мишени — HEY1 — через 48 и 120 часов после индукции остеогенной дифференцировки. Используя методику экстракции красителя ализаринового красного, проводили количественную оценку интенсивности минерализации культур периодонтальных СК на финальной стадии остеогенной дифференцировки. Результаты. Установлено, что активация сигнального пути Notch ведет к усилению экспрессии остеогенных маркеров уже на ранних этапах индукции остеогенной дифференцировки, что, в свою очередь, приводит к развитию финальной стадии остеогенной дифференцировки, характеризующейся формированием кальцификатов. Более того, чем большее количество лентивирусных частиц было использовано при трансдукции клеток, тем, соответственно, интенсивнее был изначальный запуск Notch, и в ответ на это мы отмечали более эффективное прохождение процессов остеогенной дифференцировки клеток. Заключение. Активация сигнального пути Notch приводит к повышению остеогенного потенциала периодонтальных СК дозозависимым образом и индуцирует в клетках процессы, связанные с накоплением кальцификатов, интенсивность образования которых напрямую зависит от «силы сигнала» Notch. Полученные в данной работе результаты убеждают в том, что Notch способен модулировать остеогенную дифференцировку, влияя на ее эффективность, по-видимому, за счет интенсивности сигнала, передающегося от одной клетки к другой.

Авторы:

Издание: Трансляционная Медицина
Год издания: 2020
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2020.-N 2.-С.21-32. Библ. 35 назв.
Просмотров: 18