ТРАНСКРИПЦИОННЫЙ ФАКТОР HIF1 НЕГАТИВНО РЕГУЛИРУЕТ СОДЕРЖАНИЕ ГЛЮКОЗО-6-ФОСФАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ В КЛЕТКАХ НЕК293Т

Аннотация:

Выявление новых мишеней регуляции индуцируемого гипоксией транскрипционного фактора HIF1 является актуальной задачей клеточной и молекулярной биологии. С использованием индуктора накопления HIF1 хлорида кобальта (СоСl2) и блокатора его трансляции топотекана проверяли ранее описанный на мозге крысы феномен супрессии ключевого фермента пентозофосфатного пути глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ) транскрипционным фактором HIF1. На первичной культуре фибробластов кожи крысы были определены нетоксические дозы СоС12 (50 и 100 мкМ) и топотекана (0.2 и 1 мкМ). На линии клеток эмбриональной почки человека НЕК293Т (Human Embryonic Kidney 293Т) исследовали взаимосвязь между накоплением HIFla и содержанием Г6ФДГ методами вестерн блоттинг и дот-иммуноферментного анализа. Для проверки взаимосвязи между зависящим от дозы СоС12 и топотекана изменением содержания HIFla и HIF1-зависимой экспрессии клетки НЕК293Т трансфицировали вектором, содержащим ген люциферазы под контролем HIF1-зависимого промотора (HRE), и определяли ее активность хемилюминесцентным методом. Было установлено, что СоС12 дозозависимо повышает содержание HIFla и увеличивает люциферазную активность, способствуя уменьшению количества Г6ФДГ. Топотекан, напротив, снижает накопление HIFla, что сопровождается уменьшением активности люциферазы и нормализацией содержания Г6ФДГ. Результаты подтверждают наличие супрессирующего действия транскрипционного фактора HIF1 на содержание первого фермента пентозофосфатного пути в клетках человека.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2020
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2020.-N 9.-С.654-661. Библ. 0 назв.
Просмотров: 23