ИДЕНТИФИЦИРОВАННЫЕ В ЖИВОТНЫХ ТКАНЯХ ИЗОФОРМЫ 2-ОКСОАДИПАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ, КОДИРУЕМОЙ ГЕНОМ DHTKD1, НЕ ОБРАЗУЮТСЯ ПРИ ЭКСПРЕССИИ DHTKD1 ЧЕЛОВЕКА В БАКТЕРИАЛЬНОЙ ИЛИ ДРОЖЖЕВОЙ СИСТЕМАХ

Аннотация:

В отличие от представленной во всех тканях животных 2-оксоглутаратдегидрогеназы (ОГДГ, ген OGDH), наличие в тканях ее изофермента — 2-оксоадипатдегидрогеназы (ОАДГ, ген DHTKD1) — зависит от многих факторов, и фенотип при мутациях DHTKD1 выражен редко. Поскольку оба изофермента катализируют превращения как 2-оксоглутарата, так и 2-оксоадипата, физиологическая роль ОАДГ не очевидна. По аналогии с другими представителями семейства дегидрогеназ 2-оксокислот считают, что ОАДГ является компонентом полиферментного комплекса, катализирующего окислительное декарбоксилирование 2-оксоадипата. Целью настоящего исследования являлась молекулярная характеристика ОАДГ животных тканей. Филогенетический анализ дегидрогеназ 2-оксокислот обнаружил ОАДГ лишь у животных и слизевика Dictyostelium discoideum в составе общей с бактериальными ОГДГ ветви. Исследование частично очищенной из животных тканей ОАДГ методами иммуноблоттинга и масс-спектрометрии показало, что фермент представлен двумя изоформами с мол. массами ~130 и 70 кДа. Эти изоформы не детектируются при получении ОАДГ человека в бактериальной или дрожжевой системах экспрессии, где молекулярная масса ОАДГ соответствует ожидаемой (~100 кДа). Таким образом, обнаруженные изоформы ОАДГ могут быть продуктами специфической для животных регуляции экспрессии DHTKD1 и/или посттрансляционных модификаций фермента. Положение идентифицированных пептидов ОАДГ в структуре белка свидетельствует о том, что у изоформы 70 кДа отсутствует TV-концевой фрагмент, но сохранен активный центр. Поскольку N-концевой домен ОГДГ необходим для формирования полиферментного комплекса, можно предположить, что изоформа ОАДГ 70 кДа катализирует неокислительные превращения дикарбоновых 2-оксокислот, которые не требуют полиферментной структуры. В этом случае соотношение охарактеризованных изоформ ОАДГ в тканях животных может отражать соотношение окислительного и неокислительного декарбоксилирования 2-оксоадипата, катализируемого ОАДГ.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2020
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2020.-N 8.-С.1080-1090. Библ. 31 назв.
Просмотров: 14