ОДНОСТАДИЙНАЯ ОЧИСТКА CRISPR-НУКЛЕАЗЫ Cas13a МЕТОДОМ МЕТАЛЛ-ХЕЛАТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ПОСЛЕ ГЕТЕРОЛОГИЧНОЙ ЭКСПРЕССИИ С СОХРАНЕНИЕМ КОЛЛАТЕРАЛЬНОЙ РИБОНУКЛЕАЗНОЙ АКТИВНОСТИ

Аннотация:

CRISPR/Cas13a-нуклеазa рассматривается сегодня как основа для создания нового поколения биосенсоров для ультрачувствительной, в том числе полевой детекции бактериальных и вирусных патогенов. Получена рекомбинантная Саs13а-нуклеаза с функциональной активностью в результате гетерологической экспрессии в Е. coli с помощью простой одностадийной очистки металл-хелатной хроматографией с использованием N-концевой полигистидиновой метки. Упрощение процедуры очистки Саs13а-нуклеазы расширяет возможности разработки и практического использования диагностических биосенсорных систем на её основе. Масс-спектрометрическая идентификация показала, что неохарактеризованный ранее белок U2PWF1 Leptotrichia wadei является Cas13а-нуклеазой.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2020
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2020.-N 6.-С.587-594. Библ. 24 назв.
Просмотров: 19