Получение промышленно важных ферментов на основе экспрессионной системы гриба Penicillium verruculosum

Аннотация:

В обзоре приведены данные по получению с помощью системы экспрессии низших грибов Penicillium verruculosum высокоактивных рекомбинантных штаммов — продуцентов широкого круга ферментов, используемых в различных областях промышленности и сельского хозяйства: эндоглюканаз, Р-глюканаз, ксиланаз, маннаназ, фитаз, а-галактозидаз, пектинлиаз, полигалактуроназ, декстраназ, экзоинулиназ, хитиназ. Реципиентный штамм P. verruculosum В1-537 (ДniaD) характеризуется высокой секреторной способностью (до 60 г/л внеклеточного белка в культуральной жидкости), а рекомбинантные штаммы-продуценты — высокой продуктивностью целевых ферментов; полученные с их помощью ферментные препараты содержат, как правило, 30-70% целевых рекомбинантных ферментов (в некоторых случаях — до 80%) от общего пула белка. Система экспрессии P. verruculosum позволяет легко трансформировать экспрессионные конструкции, содержащие целевые гетерологичные или гомологичные гены, функционально связанные с промотором и терминатором «сильного» индуцибельного промотора гена целлобиогидролазы-1 (cbhl), причем генетическую трансформацию реципиентного штамма можно осуществлять одновременно несколькими векторными конструкциями. Встраивание целевых генов в хромосому реципиентного штамма — процесс интегративный; при этом кодируемые ими «чужеродные» рекомбинантные белки не подвержены протеолизу. Технология первичного отбора позитивных трансформантов на агаризованных средах, а также вторичного отбора при их культивировании в качалочных колбах и ферментерах проста и надежна в использовании — в том числе благодаря стандартизированным параметрам: состава питательной среды и условий культивирования рекомбинантных штаммов-продуцентов различных целевых ферментов. Затраты времени на получение продуцента целевого фермента — от постановки задачи до получения рекомбинантного штамма-продуцента — составляют от 3 до 6 месяцев. Важно подчеркнуть, что рекомбинантные штаммы P. verruculosum как продуценты различных целевых ферментов успешно используются в промышленном производстве.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2020
Объем: 18с.
Дополнительная информация: 2020.-N 6.-С.17-34. Библ. 71 назв.
Просмотров: 32