МОЛЕКУЛЯРНЫЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПОСЛЕДСТВИЯ УТРАТЫ СУБЪЕДИНИЦЫ 8А ЦИТОХРОМ с-ОКСИДАЗЫ

Аннотация:

В настоящей работе нами был на молекулярном уровне изучен эффект отсутствия наименьшей, кодируемой ядерным геномом субъединицы СОХ8А цитохром с-оксидазы (СОХ) в фибробластах пациентов с гомозиготной мутацией сайта сплайсинга и в клетках НЕК293Т, чей геном был отредактирован с помощью метода CRISPR/Cas9. В обеих клеточных модельных системах было обнаружено 20—30% остаточной ферментативной активности СОХ. В иммуноблотах белковых комплексов митохондрий, выделенных из обеих клеточных моделей, разделенных с помощью метода нативного электрофореза, почти полностью отсутствовали мономеры или димеры нативной формы СОХ. Интересно, что суперкомплексы СОХ, образованные с участием комплекса III, а также с комплексами I и III, сохраняли значительную иммунореактивность, в то время как почти никакой иммунореактивности, приписываемой подструктурам, найдено не было. Это означает, что СОХ, у которой отсутствует субъединица 8А, стабилизируется в составе суперкомплексов, в то время как её мономеры и димеры подвергаются быстрой деградации. При проведении в исследуемых клеточных моделях дефицита субъединицы СОХ8А транскриптомного анализа с помощью метода секвенирования 3'RNA нам не удалось обнаружить изменения уровня транскрипции генов, участвующих в процессе накопления развернутых белков в матриксе митохондрий, а также в интегрированном ответе на стресс. Таким образом, наши данные убедительно свидетельствуют о том, что для поддержания структурной стабильности мономеров и димеров СОХ необходима наименьшая субъединица цитохром с-оксидазы — СОХ8А.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2021
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 2021.-N 1.-С.43-55. Библ. 36 назв.
Просмотров: 25