СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ АНИОНОВ НА ЩЕЛОЧНОЕ СОСТОЯНИЕ ЦИТОХРОМА с

Аннотация:

Изучено специфическое влияние анионов на структуру и термостабильность, а также на пероксидазную активность нативного (состояние III) и щелочного (состояние IV) цитохрома с (cyt с) с помощью методов УФабсорбционной спектроскопии, собственной флуоресценции триптофана и кругового дихроизма. Термическая и изотермическая денатурация, контролируемая, соответственно, по флуоресценции триптофана и методом кругового дихроизма, предполагают более низкую стабильность cyt с в состоянии IV по сравнению с состоянием III. Значения рКа щелочной изомеризации cyt с зависят от присутствующих солей, в соответствии с эффектом Хофмейстера на стабильность белка, т.е. космотропные анионы увеличивают, а хаотропные анионы уменьшают его значение. Пероксидазная активность cyt с в состоянии III, измеренная путём окисления гваякола, показывает четкую зависимость от положения солей в ряду Хофмейстера, в то время как cyt с в щелочном состоянии не проявляет пероксидазной активности независимо от типа анионов, присутствующих в растворе. Щелочная изомеризация cyt с в присутствии 8 М мочевины, измеренная по флуоресценции Тrр59, предполагает существование высокоаффинного не природного для гемового железа лиганда даже при частично денатурированной конформации белка. Конформация cyt с в щелочном состоянии в 8 М мочевине заметно модулируется специфическим эффектом анионов. Основываясь на снижении флуоресценции Тrр59 при титровании до щелочного значения рН в 8 М мочевине и используя метод молекулярной динамики, мы предполагаем, что Lys79-конформер является, скорее всего, доминирующим щелочным конформером cyt с. Высокое сродство шестого лиганда к гемовому железу, вероятно, является причиной отсутствия пероксидазной активности у cyt с в щелочной среде.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2021
Объем: 16с.
Дополнительная информация: 2021.-N 1.-С.73-88. Библ. 124 назв.
Просмотров: 27