Антибиотикорезистентность и мобильность ее генетических детерминант у штамма Lactobacillus fermentum

Аннотация:

Цель работы. Выяснить возможность передачи генетических детерминант устойчивости к антибиотикам от лактобацилл Lactobacillus fermentum 5-1 к грамотрицательным представителям кишечной микробиоты. Материалы и методы. Оценку чувствительности бактерий к антибиотикам проводили методом градиентного агара и методом микроразведений. Детекцию генов антибиотикорезистентности (АР) в геномной ДНК бактерий осуществляли с помощью ПЦP-анализа с последующим секвенированием продуктов амплификации методом Сэнгера и анализом полученных первичных нуклеотидных последовательностей с помощью программы BLASTn. Из 9 штаммов грамотрицательных бактерий в качестве реципиентов генов АР выбрали бактерии Acinetobacter baumannii, Citrobacter freundii и Escherichia coli, у которых мы экспериментально установили отсутствие фенотипической и генотипической устойчивости к тетрациклину. Возможность транспорта генов АР от L. fermentum 5-1 к этим бактериям исследовали в условиях совместного культивирования в среде, имитирующей содержимое кишечника, методом «коньюгации на мембране» и трансформации бактерий методом электропорации. Результаты. На основе значений минимальных подавляющих концентраций (МПК) установили, что штамм L. fermentum 5-1 устойчив к ванкомицину (МПК=256 мкг/мл), ципрофлоксацину (МПК=64 мкг/мл), аминогликозидам (МПК=64—256 мкг/ мл), хлорамфениколу (МПК=8 мкг/мл), чувствителен к ампициллину (МПК=0,5 мкг/мл), рифампицину (МПК=2 мкг/мл) и цефотаксиму (МПК=0,12 мкг/мл), обладает промежуточной (низкой) устойчивостью к эритромицину (МПК=1 мкг/мл) и тетрациклину (МПК=8 мкг/мл). С помощью ПЦP-анализа в хромосомной ДНК L. fermentum 5-1 мы обнаружили ген устойчивости к эритромицину егтВ, а в плазмидной ДНК — два гена устойчивости к тетрациклину — tetM и tefK. Далее мы показали, что при электропорации и последующей трансформации бактерий С. freundii плазмидной ДНК исследуемых лактобацилл происходила передача гена tefK. Заключение. Полученный нами результат доказывает пагубный вклад лактобацилл в проблему распространения резистентности к антибиотикам и обосновывает необходимость более жесткого контроля практического применения молочнокислых бактерий.

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 2020
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2020.-N 4.-С.162-169. Библ. 30 назв.
Просмотров: 26