ВЛИЯНИЕ КЛЕТОЧНО-ОПОСРЕДОВАННОЙ ДОСТАВКИ КОМБИНАЦИИ ГЕНОВ VEGF165, GDNF И NCAM1 НА МОЛЕКУЛЯРНЫЕ И КЛЕТОЧНЫЕ РЕАКЦИИ В СПИННОМ МОЗГЕ СВИНЕЙ С КОНТУЗИОННОЙ ТРАВМОЙ

Аннотация:

В настоящее время способы лечения травмы спинного мозга ограничены. Одним из наиболее перспективных подходов, направленных на преодоление негативных посттравматических последствий в спинном мозге, является генная терапия. Многочисленные исследования, выполненные на грызунах, свидетельствуют о положительном влиянии доставки терапевтических генов в спинной мозг для стимулирования нейрорегенерации. Однако для выведения разработанных протоколов генной терапии на стадию клинических испытаний необходимо верифицировать полученные результаты в экспериментах на крупных лабораторных животных. Цель исследования: иммунофлуоресцентный анализ реакции маркеров клеточного стресса и апоптоза, синаптических белков и нейроглии при посттравматическом ремоделировании спинного мозга свиней породы вьетнамская вислобрюхая после интратекальной доставки генов, кодирующих сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF165), глиальный нейротрофический фактор (GDNF) и нейрональную молекулу клеточной адгезии [NCAM1], с помощью мононуклеарных клеток крови пуповины человека (МККП). У опытных свиней (п=2) через 4 часа после моделирования дозированной контузионной травмы спинного мозга на уровне Th8-Th9 интратекально вводили 2x10 в 6 степени генетически модифицированные МККП, сверхэкспрессирующие рекомбинантные молекулы VEGF, GDNF и NCAM в 200 мкл физиологического раствора. Контрольным животным (п=2) в цереброспинальную жидкость вводили 200 мкл физиологического раствора. Интактные свиньи (п=2) были использованы в работе для получения базовых значений для иммунофлуоресцентного анализа посттравматических молекулярных и клеточных реакций. Через 60 суток иммунофлуоресцентный анализ в ростральном и каудальном отделах спинного мозга относительно эпицентра травмы выявил положительные изменения у опытных свиней на фоне клеточно-опосредованной доставки генов VEGF165, GDNF и NCAM1. В передних рогах рострального и каудального отделов спинного мозга животных из терапевтической группы были обнаружены более высокий уровень флуоресценции синаптического белка синаптофизина, меньшее число астроцитов и клеток микроглии, что может свидетельствовать о функциональном восстановлении нейронов и сдерживании развития астроглиоза. В ростральном отделе в области кортикоспинального тракта генная терапия поддерживала численность олигодендроцитов, обеспечивающих миелинизации регенерирующих аксонов. Полученные результаты дают основание полагать, что генетически модифицированные МККП, сверхэкспрессирующие рекомбинантные молекулы VEGF и GDNF [в качестве терапевтических молекул] и NCAM (в качестве молекулы, обеспечивающей выживание и адресное наведение клеточных носителей), способствуют посттравматической регенерации спинного мозга.

Авторы:

Издание: Гены @ Клетки
Год издания: 2020
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2020.-N 3.-С.85-91. Библ. 30 назв.
Просмотров: 25